Подходящие виды материалов

Распространенным составляющим поделки являются – мелкие пластмассовые или надувные шары, которые требуется закрепить на каркас.

К сожалению, шарики относятся к классическому способу изготовления цифр, и давно наскучили большинству людей. Рассмотрим 3 известных и интересных метода создания декорации: бумажная, тканная и съедобная цифра.

Также Вы можете посмотреть интересный урок на профильном сайте по созданию поделок или украшений своими руками, к примеру портал рукоделия https://tytpodelki.ru/ — предлагает огромный выбор авторских и эксклюзивных работ.

Каждый из них отличается креативностью и способом подачи. Например, из ткани прекрасно выходят бабочки, цветы, бантики, а из бумаги умельцы способны сотворить любой вид оригами. Совсем новый вид праздничных цифр – торт из печенья, пирожных или бисквита.

Самостоятельное и ручное творение всегда цениться больше заводского, поэтому вы не пожалеете о потраченных финансах и времени. Особенно, если узнаете, что фигурку можно продать по привлекательной цене. Стоимость зависит от формы, размера и материала.

Каркас

Основой такой поделки является внутренняя крепкая конструкция, которая обеспечивает стойкость, позволяя сооружать на себя любую оболочку.

Наилучшим вариантом считается картон, крепящийся за счет клея, лески, скотча или скрепок. Он не будет валиться на бок или разваливаться по частям, если сделать цифры с пошаговой инструкцией.

Совсем мелкую форму можно распечатать самостоятельно, скачав наброски через интернет. Но ведь намного интереснее придать заготовке большой размер, например, метр или 2 от пола.

План по созданию каркаса 1-1.5 метра:

• Существует 2 пути начального этапа: при помощи принтера заготовить выкройку или вручную нарисовать необходимую форму декорации.
• Вырезаем и склеиваем все части между собой, не оставляем просветов, или соединяем скотчем.
• Готовый шаблон прикладываем к картонке и вырезаем 2 одинаковые цифры.
• Для объемной фигуры требуется изготовить еще соединительные части из требуемого материала.
• Логично собираем все части воедино.

Каркас готов, осталось сделать цифры своими руками (если ребенку меньше 10, то 1 фигуру) и придать ей красивую внешность.

Бумажный вид

Данный тип декора требует определенных материалов: готовый каркас, ПВА клей, цветная бумага и активная фантазия.

Цветы

Наиболее простые и, одновременно, прекрасные фигурки из бумаги – это розочки или иные бутоны. Заранее заготавливаем цветные прочные салфетки, складываем 2-4 штуки вместе и формируем гармошку, которую обматываем тонкой ниткой посредине.

Осталось лишь распушить обе стороны салфеток, придавая им округлый вид, и приклеить на устойчивый каркас. Сложно сказать, какое количество бутонов потребуется.

Подключите фантазию или просмотрите видео-уроки по созданию других типов цветочной композиции. Лучшим вариантом служат пышные розы любого цвета.

Бахрома

Гофрированные цифры своими руками делать несложно, требуется лишь купить гофру нужных оттенков.

Очень просто делаем из полоски красивый цветок: аккуратными движениями под наклоном скручиваем розочку вокруг заготовленного угла.

В конечном итоге должен появиться бутон на ножке.  Крепим на каркасную основу розу при помощи клея, и оставляем в укромном месте сохнуть.

Тканый вид

Цифра из салфеток своими руками, конечно, заслуживает почетный пьедестал. Но, если вы умелица, способная сотворить украшение из ткани, то данный способ для вас.

Начинающие рукодельницы также способны сотворить простой вариант декора – бантики.

План:

• Желаемую ткань нарезаем на толстые и длинные прямоугольники.
• Полоски скручиваем в банты или перевязываем ниткой (если ленты вышли короткими).
• Банты крепим на каркас при помощи клеевого пистолета или клей-момента.

Необходимо располагать элементы очень туго, чтобы не просвечивался картон, а лучше окрасить его под нужный цвет. Яркая основа позволит изготовить малое количество бантиков.

Съедобный торт

Довольно новый способ поздравить именинника любого возраста – это подать ему торт с наступившим возрастом. Вам не обязательно уметь печь коржи, ведь за основу можно брать любые из этих ингредиентов:

• Печенье – домашнее или купленное.
• Фрукты, ягоды.
• Маршмеллоу, зефир.
• Вафли.
• Готовые пирожные – будет очень удобно брать в руки.
• Формы из мастики – любимые персонажи или традиционные фигуры.

Все ограничивается лишь полетом вашей фантазии. Популярное украшение стола понравиться не только детям, но и взрослым мужчинам, женщинам.

Сладость подойдет в качестве подарка начальнику, подруге, родителям, детям, коллегам. Торт цифра своими руками прекрасно дополнит картину любого праздничного застолья.

Помимо вышеперечисленных вариантов декораций существует еще масса способов продемонстрировать ваши умения, порадовать близких и неплохо заработать. Главное учитывать увлечения и половую принадлежность именинников.

Фото цифр своими руками

Также рекомендуем просмотреть:

Декор «Цифра 1» из розочек

Автор admin На чтение 2 мин. Просмотров 1 Опубликовано 17.12.2016

Фото: leeleeandb.blogspot.com

Цифры для праздничных декораций, украшенные гофрированной (или папиросной) бумагой выглядят невероятно эффектно и красиво. Предлагаем вам к женскому дню рождения или юбилею сделать цифру-декор из розочек.

«Розочки», украшающие шаблон цифры, могут быть разного типа и от того, какой именно тип выберете вы, будет зависеть ее окончательный вид. Довольно трудоемкая работа, если честно, но результат безусловно стоит того, чтобы сделать этот декор.

Способ скручивания розочек из гофрированной бумаги №1

Фото: www.wedshare.com

Используя этот способ скручивания розочек, вы получите практически такую же цифру, как на первом фото.

Шаг 1

Нарежьте гофрированную бумагу на ленты. Чем шире лента, тем больше получится готовая розочка. Слегка сожмите ленту и начинайте скручивать ее, слегка отгибая края гофрированной бумаги, формируя лепестки.

Фото: www.wedshare.com

Фото: www.wedshare.com

Фото: www.wedshare.com

Фото: www.wedshare.com

Фото: www.wedshare.com

Фото: www.wedshare.com

Шаг 2

Когда дойдете до нужного размера – оборвите ленту и скрутите ее остаток, затем обрежьте его.

Фото: www.wedshare.com

Фото: www.wedshare.com

Фото: www.wedshare.com

Шаг 3

При помощи горячего клея приклейте необходимое количество розочек на шаблон цифры.

Способ скручивания розочек из гофрированной бумаги №2

Фото: www.corduroydreams.com

Не совсем розочки,  скорее небольшие бутончики, которые тем не менее смотрятся очень эффектно на шаблоне цифры.

Шаг 1

Нарежьте гофрированную бумагу на ленты. Чем шире лента, тем больше получится готовая розочка. Начинайте скручивать ленту, слегка скручивая ее. Кончик ленты смажьте клеем и прижмите к уже готовой розочке.

Фото: www.corduroydreams.com

Фото: www.corduroydreams.com

Фото: www.corduroydreams.com

Шаг 2

При помощи горячего клея приклейте необходимое количество розочек на шаблон цифры.

Декор «Цифра 1» из розочек

Как сделать цифры из длинных шаров — MOREREMONTA

Детский День рождения, детские праздники, аниматоры, ростовые куклы, продажа шариков, магазин и мастер-классы Ромашки Клоун

Привет, друзья!

Шары-конструкторы для моделирования ШДМ

Покупайте у нас воздушные шарики и товары для праздника.

Длинные шарики-конструкторы ШДМ (100 шт. ) — 139,00 грн.
При заказе от 3 пачек — 129, 00 грн.
Доставляем шарики по Украине. В Запорожье возможен самовывоз.
Для заказа пишите на почту: [email protected]
Звоните нам: +3 8 050 814 10 10, +3 8 068 349 06 05, +3 8 093 117 79 01
Будем рады!
Оплатить можно через ПриватБанк. Доставка «Новой почтой» и т.п.

Предлагаем Вашему вниманию 23 видео мастер-класса (видео урока) Ромашки Клоун по изготовлению цифр из круглых и длинных воздушных шаров ШДМ своими руками с подробными пошаговыми инструкциями, описанием процесса изготовления и фотографиями фигур.

НАШ КАНАЛ НА YouTube с мастер-классами по изготовлению фигурок из воздушных шаров «Ромашка Клоун»

НАШ КАНАЛ НА YouTube с мастер-классами по вязанию крючком, коллекцией узоров и схемами «HANDMADE TV»

Надеемся, что следуя нашим рекомендациям по изготовлению фигурок из воздушных шаров, Вы без труда сможете украсить воздушными шарами детский праздник, детский День рождения, День рождения взрослого человека и юбилей. И ребёнок, и взрослый будут рады такому сюрпризу.

Наши видео мастер-классы по изготовлению цифр из воздушных шаров своими руками могут представлять интерес для родителей малышей, любителей изготовления подарков своими руками, аэродизайнеров, оформителей воздушными шарами, детских аниматоров.

Пишите нам, дорогие друзья! С удовольствием ответим на все Ваши вопросы. С уважением, Ромашка Клоун.

С цифрами из фольги получаются восхитительные композиции: яркие, праздничные, объёмные. В праздничный букет можно добавить и латексные шары и шары из фольги. Очень красиво смотрятся комплекты из больших ростовых игрушек и цифр на подставках.

Стоимость композиций может быть различной, т.к. изготавливаются по индивидуальным заказам.

Цифра из фольги с гелием — 750 руб

Цифра из фольги с декором «Звёзды» — 750 руб

Цифра из фольги на подставке простая — 650 руб

Цифра из фольги с основанием «Перламутр» — 750 руб

Цифра из фольги на подставке (с цветочным декором) — от 750 руб

Цифра «Морские мотивы» — 850 руб

Композиция с цифрами «30», «60» — индивидуальный заказ, от 1850 руб, в зависимости от декора (без учёта стоимости шаров с гелием)

Композиция с цифрами «10» — от 1350 руб (без учёта стоимости шаров с гелием)

Цифра «4» с тропическим цветком — 850 руб

Цифры из фольги «Юбилей» (2 шт) — 1300 руб (Кукла из шаров «Именинница» — 1100 руб)

Цифры на первый день рождения

Цифра из шаров может быть отдельным подарком или частью оформления. Для самых маленьких — чудесные цифры, вокруг которых можно водить хоровод.

Набор на первый День Рождения «Медвежонок» (игрушка + цифра) — 1750 руб

Цифра «1» из шаров «Бирюза» (с цветочками) — 1350 руб

Цифра «1» из шаров «Цветочный декор» — 1150 руб

Единичка из шаров, на каркасе — 750 руб / с игрушкой из фольги — 950 руб

Цифра «Панно» из шаров — 950 руб

Единичка из шаров «Звёзды» — 1450 руб

Нестандартные модели рассчитываются по индивидуальному заказу.

Цифры из шаров на каркасах

Цифра из шаров может быть декоративной и удачно сочетаться с основным тоном праздничного оформления. Или цифру из шаров можно «оживить»: прикрепить колпачок, глазки, руки — и цифра сама станет весёлым героем праздника.

Цифра из шаров «Вензель» (с декором) — 1850 руб

Цифра «2» из шаров «Горошки» — 950 руб

Цифра «2» из шаров «Джунгли» — 1350 руб

Цифра «3» из шаров «Озорная» — 1100 руб

Цифра «5» из шаров «Солнечный день» — 1250 руб

Сюжетное, тематическое оформление может быть любым, по Вашему выбору.

Цифры на подставках и колоннах

Цифры из латексных шаров на специальных каркасах стоят самостоятельно, не требуют дополнительного монтажа.

Цифра «3» «Цветочные мотивы» — 1650 руб

Цифра «7» из шаров «Горошки» — 1350 руб

Цифра «4» из шаров «Цветочки» — 1450 руб

Цифра «2» из шаров «Машинки» — 1850 руб

Цифра «2» из шаров «Ромашки» — 1450 руб

Цифра «7» из шаров «Холодное сердце» — 1850 руб

Цифра «5» из шаров «Цветочки» — 1650 руб

Цифра «7» из шаров «Солнечный день» — 1450 руб

Цифра «8» из шаров «Подарок» — 1650 руб

Цифры из шаров «Юбилей», на колонне — 3500 руб

Плетёные цифры на металлических каркасах создаются путём переплетения маленьких шариков. Большим плюсом таких цифр являются прочность и бесконечные возможности для декорирования. Для детских дней рождения популярны цифры-картинки с различной тематикой. Для торжественных праздников предпочтительны одноцветные цифры больших размеров. Красиво и торжественно смотрятся цифры и буквы из шаров в виде вензелей.

Цифры из фольги могут быть надуты гелием или воздухом. Обычно такие цифры используют в подарочных композициях или как часть декоративного оформления.

Для подарков детям или девушкам цифры можно сочетать с большими фигурами из воздушных шаров.

Оформление Дня Рождения и Юбилеев

Идея этой темы родилась давно, когда я только начала погружаться в мир аэродизайна. Мне придумалось, что вот сейчас я соберу в копилочке все возможные техники изготовления цифр из воздушных шаров, потом их все сделаю — и выложу в одну тему. И похвастаюсь, и полезное что-то для Клуба сделаю — два зайца, в общем.

Однако время вносит свои коррективы ))) По мере погружения начинаю понимать, что вряд ли когда-либо мне удастся собрать и воплотить полную коллекцию техник. Во-первых, чем дальше, тем больше нахожу; а во-вторых, появляются новые ) А поэтому начну, пожалуй, и буду дополнять. И очень надеюсь пополнить свою копилку новыми техниками с вашей помощью 🙂

1. Цифры из 660 ШДМ. В общем, и описывать нечего: основной элемент — 660 ШДМ, из которого с помощью пинчей и/или лески создаются разные цифры. Как и в большинстве остальных случаев, ценность и цельность композиции придают детали: подбор цвета, подставка, аксессуары. У меня получилось так 🙂

2. Двоечка у меня фольгированная, поэтому ненадолго отвлечемся от латексных шаров, чтобы уделить внимание этому способу. Мое мнение — это быстро, недорого и эффектно, стало быть — подходит для многих случаев. Фольгированные цифры можно надувать гелием, и тогда они требуют (ИМХО) поддержки в виде фонтана, а можно надуть воздухом, поставить на красивую подставку, и тоже получается хорошо )

3. Для тройки я выбрала циферку, которая попалась мне чуть ли не в первые дни знакомства с шариками, очень понравилась и потому была воплощена очень скоро. Поэтому хихикаю, прошу извинить меня за такие ромашки — смысл ясен, а семи- и восьмилепестковые ромашки — дело наживное ) Цифра каркасная.

4. Настало время для классической цифры из шаров: 5″ на каркасе. Здесь, снимая шляпу, даю ссылку на фундаментальную тему Ирины Шароварик http://www.balloons-club.ru/2013/10/16/instruktsii-master-klassy/tsifry-karkasy-i-izgotovlenie Всем новичам читать, добавить в закладки и руководствоваться 🙂

5. В моем портфолио есть пятерочка, которая сделана в технике с чудесным названием «печенюшка». Она бескаркасная. В комментариях к этой теме есть фотографии с мастер-классом: http://www.balloons-club.ru/2013/05/08/instruktsii-master-klassy/podarok-dlya-lyubimoy-devushki-na-18-let-mk-krasivogo-pleteniya#comment_141029 А вот что получилось у меня:

6. Продолжаем разговор ) Шестерка у меня представлена тоже каркасная, но из бюджетных и быстрых вариантов. Некоторые циферки в этой технике, подозреваю, можно сделать и без каркаса — например, единичку и четверку.

на этом мои личные эксперименты с техниками закончились (пока), переходим к работам коллег ) Кого-то знаю, некоторые циферки в моей копилке безымянные — если знаете авторов, помогайте.

7. Следующее плетение называется «корзинка». Скажу сразу, я нечасто встречала действительно хорошо сделанные циферки в этой технике. Обычно страдает форма и пропорции. По этой причине сама немного побаиваюсь браться, но конечно рано или поздно сделаю. Вот ссылка на МК http://www.balloons-club.ru/2015/02/20/instruktsii-i-propisi-dlya-nachinayuschih/kak-sdelat-prostuyu-korzinu-dlya-tsvetov-iz-shdm-chast-3-razmery-i-formy-korzin, цитирую Ольгу Богданову: «Принцип у цифр тот же самый, только продольные пузыри длиннее и стенок всего 4» Для примера — работа, если не ошибаюсь, Сергея Логинова.

8. Пунктом восемь пусть будет плетение, которым удобно делать восьмерку, и, насколько я понимаю, при этом можно обойтись без каркаса. Оно называется «плетение двойками». Вот ссылка на технику http://www.balloons-club.ru/2013/01/06/instruktsii-master-klassy/butylka-shampanskogo-instruktsiya-po-izgotovleniyu А вот пример циферки, это работа нашей одноклубницы Светланы:

9. Девятка в моей копилке есть вот такая. Это плетение цепочкой, шаров может использоваться разное количество, и от этого будеть зависеть толщина цифры. По-моему, бескаркасный вариант, но не исключаю, что для фиксации формы может понадобиться леска. Мастер-класс здесь: http://subscribe.ru/group/igrushki-i-podelki-iz-shdm/1527653/

10. В процессе подготовки этой темы нашла в бесконечной сокровищнице Клуба еще вот такие цифры. Подробнее о них здесь http://www.balloons-club.ru/2013/03/18/instruktsii-master-klassy/simvoly-iz-link-o-loon

. ну и пока, наверное, у меня все. Не забываем предлагать заказчикам цифры на панно, например такие:

. или можно подвесить их на гелиевых шарах, вот так:

обсуждение и комментарии в Тинькофф Пульс

Все для праздника и оформление шарами в Нижнем Новгороде с доставкой

Все для праздника и подарки с доставкой на дом!

Мы возьмем все хлопоты по оформлению праздника на себя!

ПОЗВОНИТЕ НАМ И ЗАКАЖИТЕ ПРАЗДНИК МЕЧТЫ!

«Территория праздника»

Компания «Территория праздника» — настоящая сказочная мастерская, где сотрудники-волшебники воплощают в жизнь мечты людей о незабываемом торжестве. Творческий подход к организации праздника — главный секрет поддержания отличного настроения у гостей на протяжении всего торжества. Неизменным атрибутом веселья считаются воздушные шары. Они ассоциируются с беззаботным детством, сюрпризами, непосредственностью и ожиданием чуда. 

У нас Вы можете заказать не только воздушные шарики с доставкой, но и практически всё для праздника : цветы для любимых женщин, пресс волл и фотозону из шаров для красивых праздничных фотографий, подарки и шарики на выписку из роддома., торты на заказ с индивидуальным дизайном, больших плюшевых медведей, аниматоров в ростовых куклах и многое другое. Также мы предлагаем оформление праздника под ключ. Мы работаем в Нижнем Новгороде и будем рады взяться за оформления Вашего торжества.

• • Праздничные Программы

Уже давно ушла в прошлое традиция однотипно проводить праздники. Сегодня можно сделать каждое торжество незабываемым, ярким, запоминающимся на долгие годы. Некоторые люди считают, что устраивать праздничные шоу можно и нужно только для детей, но это распространенное заблуждение. Взрослые в душе остаются наивными детьми, которые также хотят и умеют удивляться, веселиться, радоваться. И мы готовы доказать вам это!

Попробуйте уже в ближайший праздник устроить для себя и гостей интересное шоу, заранее украсьте помещение фольгированными или гелевыми шарами, пригласите нашего аниматора в ростовой кукле, закажите индивидуальный дизайн торта. Независимо от повода, мы готовы предложить множество вариантов программ для торжества.

Предлагаем зрелищные праздничные программы и услуги:

• Фаер-шоу
• Ростовые куклы
• Бармен-шоу
• Крио-шоу
• Фрик-шоу
• Аниматоры
• Пирамида из бокалов
• Фокусники
• Шоу мыльных пузырей
• Химическое детское шоу
• Бумажное шоу
• Аренда шоколадного фонтана
• Саксофонист
• Аренда аппарата для сахарной ваты
• Печать ярких баннеров на праздник
• Создание детского аквагрима
• Удаленные поздравления Ваших близких
• Создание надписей на шарах, праздничных коробках

Вы можете выбрать любую программу, ориентируясь на вкусы, возраст приглашенных, праздничный повод. Наши сотрудники помогут с организацией торжества любой сложности. 

• • • Детские Праздники

Детские праздники требуют особой самоотверженности при подготовке, создании атмосферы веселья и волшебства. Мы предлагаем вам большой выбор услуг, праздничных программ и украшений. Для детей можно пригласить аниматоров, актеров, которые устроят настоящее представление с ростовыми куклами и будут работать отдельно или в связке с ведущим. Настоящий восторг вызовет химическое шоу или шоу мыльных пузырей.

Ни один детский праздник не обходится без сладостей! Центром внимания и изюминкой торжества станет популярный сейчас сладкий стол или Кенди Бар, оформленный под тематику Вашего праздника. Каждый ребенок будет выбирать сладости на собственный вкус с фуршетного стола. Это капкейки с ягодами и кейкпопсы, зефир ручной работы и безе на палочке, пряники с фотопечатью и трайфлы в стаканчиках, печенье макаронс и конечно же торты на заказ!

У нас Вы можете купить любые воздушные шары в Нижнем Новгороде для создания веселой атмосферы на детском празднике и все для праздника  :

• светящиеся шарики;
• шары цифры и шары буквы;
• шары из фольги персонажи и ходячие фигуры;
• шарики с детскими рисунками и др.

Также мы выполняем оформление шарами детских праздников, свадебных торжеств, юбилеев, корпоративов и различных торжественных мероприятий для взрослой публики. 

• • Подход к созданию праздника для детей и взрослых
    День рождения в Нижнем Новгороде

Не существует стандартных решений подарков для торжественных мероприятий. Каждый праздник уникален и требует комплексного подхода к украшению, выбору подарков, сувениров, цветов. Вам не придется ходить по организациям, торговым центрам, заказывая услуги и товары у разных лиц. Мы устроим самый лучший день рождения в Нижнем Новгороде! Предлагаем ознакомиться с «Праздничными комплектами» для любого бюджета. В них входят множество интересных, полезных и эффектных подарков и все для праздника:

• подарочные корзины;
• торты на заказ;
• съедобные букеты, мужские букеты;
• капкейки и другие сладости для Кэнди Бар;
• воздушные шары для оформления фотозоны;
• оригинальные подарки на выписку ребенка из роддома;
• сладкая вата;
• большие плюшевые медведи.

Доставка товаров по Нижнему Новгороду осуществляется курьером. Возможен также самовывоз. Мы поможем организовать самый лучший день рождение в Нижнем Новгороде!

Мы готовы ответить на любые вопросы. Вы можете связаться с нами по контактным данным на сайте. Также консультанты компании общаются с клиентами по мессенджерам. Задать любой вопрос вы можете через специальную форму обратной связи на сайте.

Ранжированные списки поступающих | СГУ

Формирование паттерна пальцев во время развития конечностей в результате взаимодействия BMP-рецептора

Таймер авторегуляторного клеточного цикла интегрирует рост и спецификацию в развитие пальцев крыла цыплят

Благодарим вас за отправку вашей статьи под названием «Таймер Sonic hedgehog-Bmp2-p27 kip1 контролирует идентификацию и номер цифры в крыле цыпленка» для экспертной оценки по адресу eLife .Ваша статья была оценена Марианн Броннер как старшим редактором и редактором-рецензентом, а также двумя рецензентами.

Ниже приводится краткое изложение необходимых изменений. Кроме того, мы включаем полные обзоры для вашей справки.

Существенные изменения:

1) Введение и обсуждение следует существенно расширить. Упущена возможность обсудить то, что известно о функции Shh по сокращению фазы G1 и ускорению пролиферации клеток не только в конечностях, но и в других тканях за пределами системы культивирования клеток олигодендроцитов, которую они называют вдохновением для этой работы. .Учитывая тот факт, что eLife не имеет ограничений на количество слов, авторы могут поместить эти результаты в гораздо более широкий контекст, который может лучше проиллюстрировать, почему эти результаты представляют собой существенный прогресс.

2) Пожалуйста, воздержитесь от чрезмерного толкования. Например, поскольку ингибитор циклина / cdk блокирует клетки в G1 с циклопамином или без него, пожалуйста, измените последнее предложение этого раздела на более мягкую интерпретацию (например, «Чрезмерная пролиферация в ответ на потерю передачи сигналов Shh зависит от циклина / cdk.Есть аналогичные проблемы с их интерпретацией во многих местах, например, утверждение, что Shh предотвращает циклин-зависимые фенотипы, а не ингибирование циклина обращает вспять эффекты потери Shh?

3) Должен быть статистический анализ цифрового числа. Поскольку они утверждают, что «эти данные демонстрируют, что передача сигналов Shh предотвращает D-циклин-зависимое образование дополнительного пальца», должно быть возможно определить, отличается ли 21/42 с четырьмя пальцами (независимо от идентичности) у обработанных циклопамином эмбрионов от 2 / 23 с четырьмя цифрами с циклопамином и PD0332991.

4) Пожалуйста, представляйте статистику более четко по тексту, а не в подписях к рисункам и методах. Для значений p поясните, как они соотносятся с конкретными временными точками, и уточните воспроизводимость экспериментов. Для всех экспериментальных манипуляций, пожалуйста, сообщайте фактическое количество людей в затронутых и незатронутых группах.

5) Воздействие PD0332991 было системным, поэтому не было возможности сказать, какие из них должны были иметь фенотип циклопамина для «спасения».По этой причине имеет смысл включить категорию «1-2-3». Сравните это с экспериментом по имплантации шариков BMP2, который является очень локальным и односторонним, с противоположной стороной для сравнения, поэтому имеет смысл исключить категорию 1-2-3 из анализа. Однако следует указать количество людей, не затронутых циклопамином.

6) Они предоставляют доказательства того, что Bmp2 достаточен для ингибирования пролиферации после лечения циклопамином и что Bmp2 индуцирует p27 после лечения циклопамином, но аргумент, что p27 ингибирует пролиферацию в этом контексте, является косвенным.Есть ли другой способ остановить пролиферацию в конечности при отсутствии p27? Даже если p27 достаточно, это может не потребоваться. Перепишите рукопись, чтобы представить более осторожные выводы и принять во внимание различные интерпретации, которые не могут быть исключены данными.

Рецензент № 1:

Здесь Пикеринг и его коллеги представляют следующую главу вдумчивой и исчерпывающей серии рукописей, в которых рассматриваются давние вопросы о разрастании конечностей и его интеграции с передне-задней спецификацией пальцев.В частности, они основываются на своей статье Development 2016, в которой они продемонстрировали удивительную роль передачи сигналов Shh в ограничении расширения дистальных конечностей; Позднее воздействие циклопамина вызывает раздвоение пальцев и полидактилию, что парадоксально для ранней потребности Shh в расширении поля конечностей. В этой рукописи, представленной в eLife , они черпают вдохновение в исследованиях in vitro таймера клеточного цикла в культивируемых олигодендроцитах, чтобы проверить гипотезу о том, что ингибитор циклина D, p27kip1, действует ниже Shh, подавляя циклин D-зависимое развитие клеточного цикла.Они заканчиваются моделью, которая связывает несколько работ вместе с этими новыми данными, чтобы предположить, что Shh изначально расширяет поле конечностей, активируя Cyclin D, одновременно вызывая экспрессию Bmp2. Bmp2, в свою очередь, активирует p21Kip, чтобы «притормозить» дистальное расширение ткани, чтобы установить соответствующее количество и идентичность результирующих цифр.

Авт. Сначала подтверждают предыдущее наблюдение, что Cyclin D2 экспрессируется в области поляризации, и показывают, что его экспрессия зависит от передачи сигналов Shh.Затем они показывают, что p21Kip1 также экспрессируется в области поляризации и подавляется циклопамином, хотя и с временной задержкой по сравнению с циклином D2. Затем они проверяют гипотезу о том, что активность CyclinD / cdk необходима для увеличения пролиферации после позднего воздействия циклопамина, показывая, что ингибитора циклина / cdk достаточно для остановки клеток в G1 и уменьшения ширины дистальной конечности почти до контроля в присутствии циклопамина. Затем авторы проводят эти эксперименты дольше, чтобы проверить гипотезу о том, что ингибирование Shh cyclin / cdk предотвращает образование лишних пальцев.Действительно, ингибирование cyclin / cdk вместе с ингибированием shh часто снижает количество цифр с четырех до трех.

Наконец, авторы исследуют механизм, который приводит к замедленной реакции подавления p21Kip1 после воздействия циклопамина. Вдохновленные тем фактом, что известно, что Bmps регулирует экспрессию Cip / Kip и чувствительность Bmp2 к циклопамину, они проверяют гипотезу о том, что восстановление экспрессии Bmp2 путем имплантации шариков после обработки циклопамином предотвратит потерю экспрессии p21Kip1.Я думаю, что этот простой и элегантный эксперимент — самая сильная сторона статьи. Это позволяет авторам представить более полную модель ранней активации cyclin D2 с последующей экспрессией p21Kip1, которая задерживается зависимостью от промежуточной активации Bmp2.

Мои основные опасения минимальны, поскольку я считаю, что эти данные полны и убедительны. Однако необходимо внести несколько исправлений.

1) Последний абзац Введения слишком короткий и должен быть немного расширен, чтобы подготовить почву для остальной части рукописи.Это стилистическая критика.

2) Графические результаты FACS на Рисунке 1, Рисунке 4A и B и Рисунке 6C не имеют стандартных отклонений на момент времени и не указывают, сколько раз эти эксперименты были повторены, чтобы показать воспроизводимость.

3) Рассчитайте и укажите значение p для Cyc + PD по сравнению с DMEM на рисунке 4C, поскольку я подозреваю, что разницы нет.

Рецензент № 2:

Описание данной рукописи:

В этой рукописи Пикеринг и его коллеги сообщают, что Sonic hedgehog (Shh) стимулирует пролиферацию клеток в поляризующей области зачатка крыла цыпленка, контролируя ген клеточного цикла Cyclin D2, а на более поздних стадиях Shh ингибирует избыточную пролиферацию, активируя Bmp2-p27kip1.В серии экспериментальных манипуляций с зачатками крыла цыплят они показали, что блокирование передачи сигналов hedgehog вызывает чрезмерную пролиферацию клеток поляризующей области, что приводит к полидактилии (дополнительные пальцы), и что это влияние можно предотвратить либо применением белка Bmp2, либо ингибированием. циклина D. Ингибирование Shh циклопамином приводит к потере циклина D2 в течение 8 часов и p27kip1 в течение 30 часов. Применение Bmp2 блокирует индуцированную циклопамином избыточную пролиферацию и образование дополнительных пальцев, и это связано с восстановлением экспрессии p27kip1.

Резюме:

В целом, я обнаружил, что это интересное исследование, использующее некоторые уникальные преимущества системы конечностей цыпленка и основанное на предыдущей работе лаборатории Towers. Однако есть несколько серьезных недостатков, в том числе чрезмерная интерпретация результатов в нескольких местах, пробелы в экспериментальной логике, отсутствие статистической поддержки выводов и недостатки в научных исследованиях. Эти проблемы не позволяют мне рекомендовать публикацию в eLife .Есть также некоторые опасения, что это исследование является постепенным продвижением по сравнению с предыдущими работами, и поэтому оно может быть интересно специализированным, но не широким кругам читателей.

Существенные изменения:

1) Предыдущие работы, некоторые из которых были опубликованы более десяти лет назад, показали, что нарушение передачи сигналов Shh вызывает увеличение процента клеток в G1 и что Shh напрямую регулирует вступление клеток в S-фазу клеточного цикла. Удивительно, но авторы цитируют только собственные исследования 2016 года.Если бы авторы признали предыдущие исследования и обсудили, как их результаты вписываются в контекст этой предыдущей работы, это улучшило бы статью и повысило бы стипендию. В некоторых из этих статей рассматриваются вопросы, очень похожие на те, которые рассматриваются в этой рукописи, как в отношении конечностей, так и в других развивающихся системах. Примеры таких публикаций: Zhu et al., 2008; Seifert et al., 2018; Комада и др., 2013; Fink et al., 2018.

2) Они показывают, что применение PD0332991, ингибитора D-циклина / cdk, увеличивает процент клеток G1 в контрольных и обработанных циклопамином конечностях.В разделе «Результаты» они заключают: «Эти данные свидетельствуют о том, что передача сигналов Shh предотвращает D-циклин-зависимую чрезмерную пролиферацию клеток поляризующей области». Это переоценка результатов. Все, что показывает этот эксперимент, — это то, что PD0332991 подавляет развитие клеточного цикла, что является известной функцией препарата.

3) Раздел результатов. Эксперименты, в которых последовательно применялись PD0332991 и циклопамин, привели к получению 1-2-2-значных рисунков на 40% крыльев.Нормальный шаблон цифр — 1-2-3. 5. Обработка одним циклопамином дает либо дополнительную цифру 2 (14%), либо дополнительную цифру 3 (36%), либо нормальный рисунок цифр (50% — рис. 5F). Различные эффекты одного циклопамина и частота изменения рисунка цифр при каждом условии требуют статистического анализа для определения значимости эффекта. В своей интерпретации этих результатов они заявляют: «эти находки демонстрируют, что передача сигналов Shh предотвращает зависимое от D циклин образование дополнительного пальца».Это слишком сильный вывод, основанный на чрезмерной интерпретации некоторых довольно косвенных свидетельств.

4) Раздел результатов. «Процент клеток поляризующей области в G1-фазе клеточного цикла увеличивается до 74,3% в почках крыла, обработанных Bmp2, по сравнению с 64,1% в почках, обработанных контрольным PBS, через 24 часа». Это существенное изменение? На протяжении всей статьи отсутствие статистического анализа подчеркивает результаты.

5) В экспериментах с циклопамином + Bmp2 (раздел «Результаты») утверждается, что «из обработанных циклопамином крыльев с четырьмя пальцами на левом крыле 47% имеют рисунок цифр 1-2-2-2… и 53 % имеют рисунок 1-2-2-3… «Проблема здесь в том, что они сообщают проценты… обработанных крыльев, у которых развились четыре цифры.У скольких из обработанных эмбрионов развилось четыре пальца? Крайне важно знать размер / процент / количество людей в затронутых и незатронутых группах, чтобы интерпретировать распределение цифровых паттернов в затронутой группе.

6) Если p27kip1 является неотъемлемой частью таймера области поляризации конечностей, то можно было бы ожидать, что удаление p27kip1 улучшает формирование паттерна конечностей. Тем не менее, этот эксперимент был проведен в 1996 году Феро и др., Кийокава и др. И Накаяма и др., Но о воздействии на конечности не сообщалось.Как открытие, что p27kip1 незаменим для развития конечностей, влияет на вывод (раздел обсуждения), что «таймер клеточного цикла с участием p27kip1 также действует in vivo, чтобы контролировать рост ткани и формирование паттерна главного сигнального центра во время эмбриогенеза»?

[Примечание редакции: до принятия были запрошены дополнительные исправления, как описано ниже.]

Благодарим вас за отправку вашей статьи «Таймер ауторегуляторного клеточного цикла объединяет рост и спецификацию в развитии пальцев крыла цыпленка» на рассмотрение eLife .Ваша статья была рецензирована Марианн Броннер как старшим редактором и редактором-рецензентом, а также двумя рецензентами. Рецензенты предпочли остаться анонимными.

Хотя рукопись была значительно улучшена, рецензент 2 продолжает беспокоиться о статистическом анализе. Я включил полные обзоры и прошу вас исправить оставшиеся проблемы. Хотя eLife обычно не позволяет проводить несколько раундов проверки, я готов сделать исключение в этом случае, так как я думаю, что вы можете решить эту оставшуюся проблему в относительно короткий период времени без дальнейших экспериментов, но с более точным анализом.Однако дальнейшие раунды пересмотра будут невозможны, поэтому я настоятельно прошу вас подробно рассмотреть каждый из вопросов, поднятых рецензентом ниже.

Рецензент № 1:

Рукопись, повторно представленная Пикерингом и его коллегами, улучшена за счет расширенного раздела «Введение» и «Обсуждение». Я также ценю пересмотренные сводные формулировки выводов, в которых явно изложены результаты без чрезмерной интерпретации данных и более строгое представление данных.

Рецензент № 2:

1) При рассмотрении исходной заявки я отметил, что этот прогресс был постепенным по сравнению с их предыдущими (2014 и 2016) статьями по этой теме, но мой комментарий не был рассмотрен во время периода открытых комментариев или в письме редактора в адрес авторы.Поэтому, честно по отношению к авторам, я посчитал этот момент спорным при рассмотрении пересмотренной версии статьи, и мои комментарии ограничиваются данными и интерпретацией. Никаких дополнительных действий не требуется.

2) Я пересмотрел свои комментарии к рисунку 5. Я критически отнесся к анализу фенотипов переменных пальцев, которые были получены в двух вариантах лечения, и предложил им изучить статистическую значимость вариации. Хотя авторы сообщают о различиях в конкретных рисунках пальцев, их выводы полностью основаны на том, имеют ли конечности 3 или 4 цифры; вариации в образцах цифр игнорировались.Я согласен с тем, что они решили объединить данные таким образом, и влияние обработки PD0332991 на числовое число очевидно. Если диапазон вариаций, производимых циклопамином, не учитывается при интерпретации результатов, то нет причин проводить статистический тест, который я предлагал в своих предыдущих обзорах. Считаю это прерогативой авторов. Никаких дополнительных действий не требуется.

3) На рисунке 7 нет необходимости в использовании 3 графиков для отображения результатов лечения BMP. Количество людей, не затронутых циклопламином (панель C), можно указать в тексте, а график исключить.Чтобы было более ясно, что панель h разбила категории 1223 и 123 панели D, я предлагаю использовать те же цвета.

4) Для экспериментов, которые сравнивают количество клеток в G1 между двумя группами обработки (например, циклопамин + Bmp2 против циклопамина + PBS) на рисунке 1, рисунке 4 и рисунке 6, я предложил использовать t-критерий Стьюдента. , который является подходящим тестом для сравнения количественной единственной зависимой переменной (количества ячеек в G1) между 2 группами. Вместо этого авторы использовали критерий хи-квадрат Пирсона и утверждали, что выполнение t-критерия потребует дополнительных экспериментов.

Мне было трудно понять, как запуск другого статистического теста на одном и том же наборе данных может потребовать дополнительных экспериментов. Однако, прочитав эту статью несколько раз, я теперь подозреваю, что основная проблема связана с несоответствием между описанием данных в результатах и ​​описанием данных в методах. По всему тексту они относятся к изменениям «количества ячеек в фазе G1» или «количества ячеек в G1». Это означает, что они сравнили количество ячеек в G1 между группами.Однако в разделе методов описывается использование содержимого ДНК для присвоения клеток G1, S или G2 / M, и эти категориальные назначения были выражены в процентах от общего числа клеток (раздел «Материалы и методы»). Следовательно, они фактически сравнивают между 2 группами процент клеток в 1 из 3 категорий, что не то же самое, что сравнение количества клеток в G1 в 2 группах лечения. Другими словами, похоже, что они сравнивают категориальные переменные, а не количественную переменную.В этом случае они, вероятно, смогут решить проблему, предоставив более точное описание данных в разделе «Результаты».

5) Наконец, хотя я предложил рекомендации по соответствующим статистическим тестам, я считаю, что рецензенты не должны диктовать авторам, как проводить свои исследования. У авторов есть мои комментарии и аргументы, лежащие в основе моих советов, поэтому я оставляю их на усмотрение авторов действовать так, как они считают нужным.

USDA ERS — Обзор рынка органических продуктов и тенденции

Потребительский спрос на товары органического производства продолжает расти, выражаясь двузначными числами, что создает рыночные стимулы для американских фермеров по широкому спектру товаров. Органические продукты теперь доступны почти в 20 000 магазинах натуральных продуктов и почти в 3 из 4 обычных продуктовых магазинов. Согласно недавней отраслевой статистике, продажи органических продуктов составляют более 4 процентов от общего объема продаж продуктов питания в США.

• Органические продукты питания продаются потребителям через три основных места в Соединенных Штатах: обычные продуктовые магазины, магазины натуральных продуктов и рынки, где продаются продукты напрямую.

• Типичного потребителя органических продуктов сложно определить, но новые исследования продолжают проливать свет на отношение потребителей и покупательское поведение.

• Надбавки к ценам на органические продукты продолжают оставаться высокими на многих рынках по мере роста спроса на органические продукты.

Увеличение продаж органических продуктов по всем категориям продуктов питания

USDA не имеет официальной статистики по розничным продажам органической продукции в США, но информацию можно получить из отраслевых источников.Согласно оценкам журнала Nutrition Business Journal , продажи органических продуктов в США в 2012 году составили 28,4 миллиарда долларов — более 4 процентов от общего объема продаж продуктов питания — и достигнут примерно 35 миллиардов долларов в 2014 году.

Свежие фрукты и овощи были самой продаваемой категорией экологически чистых продуктов питания с тех пор, как индустрия органических продуктов питания начала продавать продукты в розницу более 3 десятилетий назад, и, согласно данным журнала Nutrition Business Journal , они по-прежнему превосходят другие категории продуктов питания.На производство приходилось 43 процента продаж органических продуктов питания в США в 2012 году, за ними следовали молочные продукты (15 процентов), упакованные / готовые продукты (11 процентов), напитки (11 процентов), хлеб / зерно (9 процентов), закуски (5 процентов). , мясо / рыба / птица (3 процента) и приправы (3 процента).

По данным Ассоциации торговли органическими продуктами (OTA), большая часть органических продаж (93 процента) осуществляется через супермаркеты и сети обычных и натуральных продуктов питания. По оценкам OTA, оставшиеся 7% продаж органических продуктов питания в США происходят через фермерские рынки, общественное питание и другие маркетинговые каналы, помимо розничных магазинов.Одним из наиболее разительных различий между традиционным маркетингом и маркетингом органических продуктов питания является использование прямых рынков — по оценкам Корнельского университета, только около 1,6% продаж свежей продукции в США осуществляется за счет прямых продаж. Количество фермерских рынков в Соединенных Штатах неуклонно росло с 1755 рынков в 1994 году, когда Министерство сельского хозяйства США начало их отслеживать, до более чем 8144 в 2013 году. Участвующие фермеры реагируют на повышенный спрос на органические продукты местного производства. Опрос менеджеров рынка, проведенный Министерством сельского хозяйства США.Исследование ERS показало, что спрос на органические продукты был высоким или умеренным на большинстве обследованных фермерских рынков по всей стране, и что менеджеры считали, что для удовлетворения потребительского спроса во многих штатах требуется больше органических фермеров. Дополнительную информацию по этой теме см. В отчете ERS:

Цены на органические продукты остаются высокими

За последнее десятилетие Служба сельскохозяйственного маркетинга (AMS) Министерства сельского хозяйства США расширила отчетность по оптовым ценам на органические фрукты и овощи и добавила новые отчеты о ценах на органическое зерно, птицу и яйца, а также объем продаж молока.Цены на органические продукты по-прежнему выше, чем на их традиционные аналоги.

• AMS Market News публикует органические цены на фрукты и овощи на ряде конечных рынков, где собираются цены, включая Атланту и Сан-Франциско. См. Данные ERS по органическим фермерским ценам и оптовым ценам для сравнения органических и традиционных цен с 1999 по 2013 год.

• В январе 2007 года AMS начала раз в две недели предоставлять региональные отчеты о ценах на органическое зерно и теперь публикует единый национальный отчет о зерне и кормах, доступный на веб-сайте Market News .Исторические таблицы ERS показывают ежемесячные национальные цены на зерно и корма за 2011-13 гг., А также предшествующие региональные цены.

На уровне розничной торговли две основные категории продаж органических продуктов питания получают значительную надбавку к цене по сравнению с продуктами, выращенными традиционным способом. ERS также проанализировала органические цены на 18 фруктов и 19 овощей, используя данные о закупках продуктов за 2005 год, и обнаружила, что надбавка за органические продукты как доля от соответствующей традиционной цены была менее 30 процентов для более чем двух третей товаров.Премия только по одной позиции — чернике — превысила 100%. Напротив, в 2006 году надбавки к цене за полгаллонный контейнер молока варьировались от 60 процентов для органического молока под частной торговой маркой по сравнению с обычным молоком под торговой маркой до 109 процентов за органическое молоко под торговой маркой по сравнению с обычным молоком под собственной торговой маркой. Дополнительную информацию по этой теме см. В отчете ERS:

Потребители органических продуктов становятся все более популярными

Были проведены многочисленные исследования покупательских привычек и демографических характеристик потребителей экологически чистых продуктов.Результаты менялись в зависимости от типа обследования, размера выборки и географического охвата. Однако возникло несколько общих тем.

Потребители предпочитают продукты, произведенные органическим способом, из-за их заботы о здоровье, окружающей среде и благополучии животных, и они демонстрируют готовность платить надбавку к цене, установленную на рынке.

Органические продукты перешли от образа жизни небольшой части потребителей к потреблению хотя бы от случая к случаю большинством американцев.Национальные опросы, проведенные Hartman Group и Институтом маркетинга пищевых продуктов в начале 2000-х годов, показали, что две трети опрошенных покупателей покупали органически выращенные продукты. Обзор литературы по исследованиям потребителей органических продуктов см. В отчете ERS:

Основа развития половых диморфных соотношений пальцев

В человеческих руках относительная длина второго и четвертого пальцев различается у мужчин и женщин. У мужчин второй палец (2D, или указательный палец) обычно короче четвертого пальца (4D, или безымянный палец), тогда как у женщин указательный палец обычно равен или длиннее безымянного пальца (рис.1 А ). Таким образом, отношение длины 2D к длине 4D, известное как отношение 2D: 4D, составляет 2D: 4D <1 для большинства мужчин и 2D: 4D ≥ 1 для большинства женщин. Этот сексуально диморфный характер конечности был описан более 120 лет назад (1), но только в 1998 г. соотношение 2D: 4D было связано с половыми стероидами в результате наблюдения, что мужчины с более низким соотношением 2D: 4D имеют более высокий уровень тестостерона в сыворотке и более низкий уровень эстрогена (2). Открытие того, что сексуально диморфные соотношения пальцев существуют у двухлетних детей, повысило вероятность того, что соотношения 2D: 4D определяются в раннем возрасте (2).Эти исследования привели к гипотезе о том, что низкое соотношение 2D: 4D отражает воздействие на эмбрион высоких уровней тестостерона, тогда как высокое соотношение 2D: 4D отражает пренатальную среду с низким содержанием тестостерона (3). Эта гипотеза экспериментально не проверена.

Все чаще используется соотношение 2D: 4D в качестве показателя пренатального воздействия гормонов, а обширные исследования на людях обнаружили корреляцию между соотношением цифр и различными физиологическими и психологическими состояниями, включая фертильность (4), спортивные способности ( 5), заболевания, связанные с полом (6, 7), социальное поведение (3, 8) и сексуальная ориентация (9).Большинство доказательств, связывающих соотношения цифр с различиями в андрогенах и эстрогенах во время развития, являются косвенными и основаны на корреляционных исследованиях на людях после рождения (10, 11). Остается неизвестным, играют ли пренатальные андрогены и эстрогены причинную роль в половом диморфизме соотношения пальцев и как эти половые стероиды могут влиять на механизмы развития пальцев. В этом исследовании мы показываем, что сексуально диморфные отношения 2D: 4D у мышей аналогичны таковым у людей и контролируются относительными уровнями передачи сигналов андрогена и эстрогена в утробе матери.Эти результаты показывают, что соотношение 2D: 4D определяется (и является его отражением) гормональной средой во время развития пальцевого хряща и обеспечивает экспериментальную проверку использования соотношений пальцев в качестве индекса среды матки, что имеет последствия. для интерпретации основ развития полового диморфизма, поведения и болезней.

Результаты

Развитие полового диморфизма у мышей.

Чтобы определить основу развития отношения полового диморфизма 2D: 4D, мы сначала подтвердили, что половой диморфизм существует у линии мышей CD-1, поскольку предыдущие исследования соотношения пальцев мышей пришли к разным выводам, которые могут отражать различия в деформации (12–12). 15).Передние и задние конечности мышей CD-1 демонстрировали половое диморфное соотношение пальцев, причем пальцы задних конечностей демонстрировали наибольшее сходство с пропорциями человеческих рук (рис. 1). Поэтому все последующие анализы проводились на задних конечностях мышей. Морфометрический анализ скелетов 58 мышей CD-1 (30 самцов и 28 самок) на постнатальный день (P) 21 показал, что соотношения 2D: 4D самцов и самок значительно различаются; в правой задней конечности, например, у самцов среднее отношение 2D: 4D составляет 0,984, а у самок среднее отношение равно 1.006 ( P = 0,034; рис.1 B и C ).

У людей половые различия в соотношении 2D: 4D проявляются уже в возрасте 2 лет, хотя неизвестно, возникает ли эта разница во время пренатального развития конечностей или постнатального роста (2). Чтобы определить, определяется ли длина пальца по-разному у самцов и самок мышей, мы использовали экспрессию Sox9 , самого раннего молекулярного маркера дифференцировки хряща, чтобы пометить зачаток каждого пальца, а затем измерили длину домена Sox9 в второй и четвертый лучи (рис.1 D ). В эмбриональный день (E) 12,5, когда впервые появляются уплотнения хряща, 2D <4D, и соотношение между мужчинами и женщинами существенно не различалось ( P = 0,687; Рис.1 E ), что указывает на возникновение полового диморфизма. после сгущения зачатков пальцев. К E17, однако, в правой задней лапе появилось небольшое, но значительное половое диморфное соотношение 2D: 4D; среднее соотношение 2D: 4D мужчин составляло 0,962, а среднее соотношение женщин — 0,981 ( P = 0.013; Рис.1 F и G ). Интересно, что левая задняя лапа не показала значимой разницы между самцами и самками ( P = 0,068; Рис. 1 G ), что похоже на лево-правую асимметрию, которая существует у взрослых людей; однако у мышей и левая, и правая задние лапы проявляли значительный диморфизм по P21 (фиг. 1 C ). Эти результаты показывают, что половодиморфное соотношение 2D: 4D у мышей развивается во время узкого окна эмбрионального развития — после образования уплотнений пальцев, но до E17 — и не изменяется постнатально (рис.1 B, C, F, и G ).

Дифференциальное распределение рецепторов андрогенов и эстрогенов в цифрах.

Рецепторы андрогенов (AR) и рецепторы эстрогенов (ER) опосредуют активность андрогенов и эстрогенов, соответственно, и активируются, когда связывание лиганда происходит в цитоплазме, что вызывает транслокацию комплексов лиганд-рецептор в ядро, где они функционируют. в первую очередь как факторы транскрипции, которые связывают ДНК и регулируют экспрессию генов (16, 17).Мы спросили, присутствуют ли белки AR и ER в развивающихся пальцах до и во время полового диморфного развития. У самцов и самок E12.5 около 90% клеток в развивающихся пальцах были AR-положительными (рис. 2 A — D ), причем 80% клеток показывали ядерную локализацию и только 10% — цитоплазматическую локализацию. из AR (фиг. 2 D ), предполагая, что AR активен в большинстве клеток во время конденсации хряща. Сравнение 2D и 4D показало, что ядерная локализация AR была значительно выше в 4D у обоих мужчин ( P = 0.027) и самок ( P = 0,039; рис.2 D ).

Распределение AR и ER-α в развивающихся пальцах. ( A — C , E — G , I — K и M — O ) Иммунолокализация AR (красный, A — C и E — G ) и ER-α (зеленый, I — K и M — O ) в цифрах мыши на E12.5 и 14.5. Синий сигнал — DAPI.Стадия указана слева, пол указан вверху, а 2D и 4D пронумерованы. Белые прямоугольники в A , E , J и N показаны при большом увеличении в C, G, K и O соответственно. ( D , H , L и P ) Количественный анализ AR-положительных ( D и H ) и ER-α-положительных ( L и P ) клеток с ядерное (Nu) и цитоплазматическое (Cy) окрашивание.Обратите внимание, что 4D имеет самые высокие уровни активированной (ядерной) AR у мужчин и женщин на E12,5 ( C и D ) и E14,5 ( G и H ), хотя уровни снижаются у женщин. между этими этапами. Окрашивание ER-α также выше в 4D на обеих стадиях ( L, и P) . ER-α в основном цитоплазматический на E12.5 ( K и L ), но на E14.5 большая часть ER-α перешла в ядро ​​( O и P ). Планки погрешностей показывают ± SEM.* P <0,05. (Масштабные линейки: 100 мкм, A, B , I и J ; 30 мкм, E, F, M и N ; 10 мкм, C, G, K и O .)

На ст. E14.5 самцы и самки показали различия в ядерной локализации AR в 4D, причем> 95% клеток имели положительную окраску у 4D самцов по сравнению с 70% клеток у самок. 4D (рис.2 E — H ). Таким образом, между E12.5 и 14.5 активность AR в 4D увеличивалась у мужчин, но снижалась у женщин.У обоих полов ядерный AR оставался более обильным в 4D, чем в 2D ( P = 0,013 для мужчин и 0,022 для женщин), указывая на то, что передача сигналов андрогенов была выше сзади.

Считается, что вариация соотношений 2D: 4D отражает различные пренатальные уровни андрогенов, хотя также сообщалось, что уровни эстрогенов положительно коррелируют с соотношениями 2D: 4D (2, 11, 18). Чтобы определить, может ли передача сигналов эстрогена играть роль в регуляции пропорций пальцев, мы исследовали распределение ER-α во время развития пальцев.Белок ER-α присутствовал в развивающихся пальцах обоих полов на E12.5, 14.5 и 16.5 (фиг. 2 I — P и фиг. S1 D — G ). На ст. E12.5 большинство (85%) клеток в конденсации пальцев были ER-α-положительными (рис. 2 I — L ), и, как и в случае AR, мы обнаружили значительно больше ER-α– положительные клетки в 4D, чем в 2D, у мужчин ( P = 0,022) и женщин ( P = 0,025; рис. 2 L ). Заметный контраст между распределением ER-α и AR состоит в том, что у обоих полов только 10% ER-α-положительных клеток обнаруживают ядерную локализацию белка на E12.5, предполагая, что большая часть ER-α была неактивна на этой стадии, и мы не наблюдали значительной разницы между 2D и 4D ( P = 0,568 для мужчин и 0,186 для женщин; Рис. 2 K и L ). Однако к E14.5 ER-α стал преимущественно ядерным в конденсациях пальцев обоих полов и, как и AR, был более распространен в 4D, чем в 2D ( P = 0,0159 для мужчин и 0,0264 для женщин; Рис. 2 M — P ). Эти шаблоны показывают, что ER-α активен в цифрах между E12.5 и 14.5, и что передача сигналов эстрогена сильнее в 4D у обоих полов.

У мужчин и женщин на ст. E16.5 и AR, и ER-α были слабее в пролиферативных зонах, но ER-α оставались сильными в гипертрофической зоне проксимальной фаланги (Рис. S1 A — F ) . Интересно, что на этой стадии мы не обнаружили существенных различий в количестве ER-α-экспрессирующих клеток в 2D и 4D у обоих полов (Fig. S1 G ). Результаты предполагают, что ER-α может играть роль в гипертрофии и удлинении хондроцитов, но отсутствие разницы между 2D и 4D на этой стадии поддерживает гипотезу, что развитие полового диморфизма пальцев устанавливается до E16.5.

Учитывая, что активированные AR и ER-α были более распространены в 4D самцов и самок на ст. E14.5, мы спросили, различаются ли уровни активированного рецептора в 2D по сравнению с 4D у разных полов. Разница в активности AR между 2D и 4D (ΔAR = AR ^4D — AR ^2D ) была больше у мужчин ( P = 0,025; рис. 2 H ), тогда как 2D: 4D разница в ER- α-активность (ΔER-α = ER-α ^4D — ER-α ^2D ) была выше у женщин ( P = 0.008; Рис.2 P ). Обнаружение того, что у мужчин была более высокая ΔAR, а у женщин была более высокая ΔER, повышает вероятность того, что именно относительная разница в активности андрогена и эстрогена (а не абсолютный уровень того и другого) лежит в основе сексуально диморфных соотношений 2D: 4D.

AR и ER также могут иметь негеномные механизмы действия, при которых они передают сигнал через путь митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK) / ERK (19, 20). Чтобы определить, активируют ли эти рецепторы негеномную передачу сигналов в пальцах, мы отслеживали уровни мРНК Mapk1 и Mapk3 в 2D и 4D.Мы не обнаружили значительных различий в экспрессии Mapk1 и Mapk3 между мужскими, женскими и обработанными флутамидом мужскими пальцами на ст. E14.5, что позволяет предположить, что негеномная передача сигналов играет небольшую (если вообще есть) роль в половом диморфизме пальцев (рис. S2). ).

Модуляция сигналов андрогенов и эстрогенов изменяет соотношения цифр.

Основываясь на наших открытиях, что пальцы ног имитируют половое диморфное соотношение пальцев, обнаруженное в пальцах человека, и что AR и ER-α показывают разные 2D: 4D паттерны у самцов и самок мышей, мы удалили AR и ER-α, чтобы напрямую проверить гипотезу. что пренатальная передача сигналов андрогенов и эстрогенов лежит в основе развития полового диморфизма пальцев.Когда AR был удален в конечности (с использованием Prx1 ^Cre ; ссылка 21), мутантные самцы показали значительно увеличенные отношения 2D: 4D по сравнению с контрольными мышами, которые экспрессировали Cre , но были диким типом для AR ( P = 0,021; рис.3 A ). Затем мы исследовали эффекты удаления ER-α и обнаружили, что гомозиготные мутантные самцы развивали пониженное соотношение 2D: 4D по сравнению с контролем ( P = 0,049; фиг. 3 A ). Таким образом, AR и ER оказывают противоположное влияние на соотношение цифр; AR необходим для развития соотношения мужское / низкое 2D: 4D, тогда как ER-α требуется для развития женского / высокого соотношения 2D: 4D.

Экспериментальные манипуляции с пренатальной передачей сигналов андрогенов и эстрогенов изменяют соотношения 2D: 4D посредством роста пальцев и фаланги. ( A ) 2D: 4D отношения в правых задних конечностях AR ( n = 6) и ER-α ( n = 7) мутантных мышей в точке P0. Контрольные самцы ( n = 12) были получены из тех же пометов, что и мутанты. ( B ) Соотношения 2D: 4D у мышей, получавших флутамид (анти-AR), фулвестрант (анти-ER), DHT или эстрадиол. Цифры были измерены на P21.Все пренатальные процедуры проводились с E12,5 до 15,5, за исключением фулвестранта, который вводили на E12,5 и 14,5, чтобы избежать индукции родов. Постнатальное лечение проводили от Р0 до 3. ( C ) 2D: 4D отношения эмбрионов мышей E17, обработанных пренатально от E12,5 до 15,5. ( D ) Индекс длины пальцев (длина пальцев / длина большеберцовой кости) мышей E17 показывает, что обработка флутамидом или эстрадиолом укорачивает 4D самцов, а обработка фулвестрантом или DHT удлиняет 4D самок. 2D-индекс не показывает значимого ответа.( E и F ) Индекс длины фаланги (длина фаланги / длина большеберцовой кости) для 4D проксимальной ( E ) и средней ( F ) фаланг. ( E ) Индекс проксимальной фаланги мужчины 4D укорачивается при лечении флутамидом или эстрадиолом. Индекс проксимальной фаланги женщины существенно не изменяется при лечении фулвестрантом или DHT. ( F ) Индекс мужской средней фаланги 4D укорачивается при лечении флутамидом, а индекс средней фаланги женщины удлиняется при лечении фулвестрантом или DHT.Планки погрешностей показывают ± SEM. * P <0,05.

Чтобы определить временное окно чувствительности к передаче сигналов андрогенов и эстрогенов, мы вводили антагонисты рецепторов или лиганды беременным женщинам между стадиями E12.5 и 15.5. Лечение беременных самок флутамидом (120 мг / кг), фармацевтическим антиандрогеном, который специфически связывает и инактивирует AR (22), между E12,5 и 15,5 вызывало у потомства мужского пола более высокое / феминизированное соотношение 2D: 4D (2D: 4D = 1,024). против 0,987 в контроле; P = 0.021; Рис.3 B ). Когда беременным самкам давали дигидротестостерон (DHT; 2 мг / кг) в течение того же периода развития, у потомства женского пола было более низкое / маскулинизированное соотношение 2D: 4D (2D: 4D = 0,992 против 1,008 в контроле; P = 0,033; рис. 3 В ). Обработка только носителем кукурузного масла не повлияла на развитие цифр. Таким образом, дородовая среда с высоким содержанием андрогенов вызывает развитие отношения 2D: 4D <1. Чтобы определить, может ли модуляция пренатального эстрогена влиять на половой диморфизм пальцев, беременных женщин лечили эстрадиолом (300 мкг / кг) из E12.От 5 до 15,5, что значительно увеличило / феминизировало отношения 2D: 4D у потомства мужского пола (2D: 4D = 1,016 против 0,987 в контроле; P = 0,019; фиг. 3 B ).

Мы также проверили, влияет ли постнатальная модуляция передачи сигналов андрогенов и эстрогенов на соотношение пальцев. Лечение флутамидом, ДГТ и эстрадиолом при P0–3 не привело к значительным изменениям соотношений 2D: 4D при измерении на P21 (рис. 3 B ), хотя аногенитальное расстояние было значительно сокращено у пациентов, получавших флутамид ( P ). = 0.001) и обработанных эстрадиолом ( P = 0,005) мышей (фиг. S3). Эти результаты демонстрируют, что на соотношение 2D: 4D влияет пренатальная, но не ранняя постнатальная гормональная активность. Таким образом, хотя аногенитальное расстояние отражает как пренатальные, так и постнатальные эффекты половых стероидов, соотношение 2D: 4D является показателем только пренатальной активности половых стероидов.

Затем мы исследовали, как рано на пропорции пальцев могли влиять половые стероиды. Мы противодействовали AR и ER от E12,5 до 15,5, а затем измерили длину хрящей пальцев через 36 часов, на E17.Эмбрионы мужского пола, в которых активность AR была антагонизирована флутамидом, демонстрировали повышенное / феминизированное соотношение 2D: 4D на ст. E17 (2D: 4D = 1,009 по сравнению с 0,963 в контроле; P = 0,009), а самки подвергались действию антагониста ER (фулвестрант, 1). мг / кг) отображали уменьшенные / маскулинизированные отношения 2D: 4D (2D: 4D = 0,944 против 0,981 в контроле; P = 0,008; фиг. 3 C ). Антагонизм к ER также снижает соотношение 2D: 4D у мужчин, эффективно гипермаскулинируя пропорции пальцев (рис. S4). Мы также протестировали эффекты повышения уровня андрогенов или эстрогенов на E12.5–15.5 и обнаружил, что уже на E17 у мужчин, подвергавшихся воздействию эстрадиола, наблюдались повышенные отношения 2D: 4D (2D: 4D = 1,004; P = 0,013), а у женщин, подвергшихся воздействию DHT, наблюдались пониженные отношения 2D: 4D (2D: 4D). = 0,957; P = 0,016; рис.3 C ). Вместе с открытием того, что AR и ER активны на более высоких уровнях в 4D, чем в 2D, у обоих полов на E14.5 (Рис. 2), эти данные указывают на то, что пропорции пальцев с половым диморфизмом вызваны пренатальными различиями в передаче сигналов андрогенов и эстрогенов.Интересно, что предыдущие исследования плодов человека показали, что к 14 неделе пропорции пальцев напоминают пропорции пальцев взрослых (23), что согласуется с результатами независимого исследования, которое показало незначительные изменения диморфизма пальцев в возрасте от 2 до 24 лет (2). Наши исследования показывают, что на ранних стадиях развития пальцев либо высокая активность андрогенов, либо низкая активность эстрогенов могут привести к снижению соотношения 2D: 4D, тогда как низкая активность андрогенов или высокая активность эстрогенов могут привести к увеличению соотношения 2D: 4D.Эти данные свидетельствуют о том, что соотношение цифр отражает баланс активности андрогенов и эстрогенов на этапах формирования пальцев эмбрионального развития.

Цифра 4 определяет соотношение 2D: 4D.

Чтобы определить, можно ли отнести сдвиг в соотношении цифр к определенной цифре, мы рассчитали индекс длины цифры (длина цифры / длина большеберцовой кости, который контролирует системные эффекты на рост скелета) для 2D и 4D после каждого лечения. Удивительно, но индекс длины 2D не показал значимого ответа на увеличение с помощью DHT ( P = 0.066) или эстрадиол ( P = 0,716), или к антагонизму AR ( P = 0,58) или ER ( P = 0,257; рис. 3 D ). Напротив, индекс длины 4D увеличился у женщин, подвергшихся воздействию DHT ( P = 0,03) или фулвестранта ( P = 0,009) и умерших у мужчин, подвергшихся воздействию эстрадиола ( P = 0,017) или флутамида ( P = 0,012; рис.3 D ). Следовательно, дифференциальный рост 4D может объяснить половой диморфизм отношения 2D: 4D.

Для дальнейшего уточнения основы развития отношения 2D: 4D, мы исследовали, может ли модуляция длины 4D половыми гормонами быть сужена до конкретной фаланги (кости пальца). Сравнение индекса длины проксимальной и средней фаланг (длина фаланги / длина большеберцовой кости) в каждой группе лечения показало, что флутамид укорачивает проксимальную и среднюю фаланги ( P, = 0,016 и 0,042, соответственно), тогда как фулвестрант удлиняет среднюю фалангу ( P = 0.008), но не повлиял на проксимальную фалангу ( P = 0,269; рис. 3 E и F ). DHT удлинил среднюю фалангу ( P = 0,015), но не оказал заметного влияния на длину проксимальной фаланги ( P = 0,554; рис. 3 E и F ). Эстрадиол, наоборот, укорачивает проксимальную фалангу ( P = 0,031), но не влияет на среднюю фалангу ( P = 0,094; рис. 3 E и F ). Таким образом, либо снижение активности андрогена, либо повышение активности эстрогена может вызвать уменьшение длины фаланг, тогда как увеличение передачи сигналов андрогена или эстрогена приводит к увеличению длины фаланг.Специфичные для фаланги эффекты половых стероидов предполагают, что соотношение 2D: 4D отражает совокупность изменений длины отдельных фаланг. Эти результаты дополнительно подтверждают гипотезу о том, что соотношение передачи сигналов андрогена и эстрогена определяет длину 4D и, в конечном итоге, влияет на соотношение 2D: 4D.

Половые стероиды регулируют пролиферацию клеток в развивающихся фалангах.

Проведенный нами анализ онтогенеза соотношения 2D: 4D показал, что половой диморфизм проявляется уже на E17 (рис.1 F и G ), вскоре после начала гипертрофии хондроцитов в развивающихся пальцах. Это открытие повысило вероятность того, что пропорции пальцев с половым диморфизмом могут быть результатом дифференциального контроля пролиферации хондроцитов с помощью AR и ER-α. Чтобы идентифицировать клеточный механизм, с помощью которого AR и ER-α регулируют длину пальцев, мы сначала рассчитали митотические индексы развивающихся пальцев, используя маркировку BrdU на E16. Учитывая, что наиболее выраженные изменения длины пальцев наблюдались в 4D, мы сосредоточили наш анализ на этих конкретных фалангах.В проксимальных фалангах контрольных самцов BrdU-положительные клетки были немного (но не значительно) более многочисленными в 4D, чем в 2D ( P = 0,054; фиг. 4 A, B, и E ). Антагонизм AR с флутамидом имел значительно больший эффект на 4D, чем на 2D ( P = 0,006), вызывая снижение пролиферации клеток на 40% в 4D, но только на 20% в 2D (Рис. 4 C и D ). Это уменьшение пролиферации может объяснить заметное снижение роста 4D и, следовательно, увеличение отношения 2D: 4D у мужчин, получавших флутамид.В соответствии с этими результатами, когда активность андрогенов увеличивалась под действием DHT, пролиферация клеток увеличивалась больше в 4D, чем в 2D ( P = 0,021; рис. S5).

AR и ER обладают специфическим для пальцев действием на пролиферацию клеток. ( A — D и F — I ) Иммунолокализация BrdU (красный) и окрашивание DAPI (синий) продольных срезов через проксимальную и среднюю фаланги 2D и 4D правых задних конечностей на E16. Фаланги ориентированы проксимальнее влево.(Масштаб: 50 мкм.) (E и J ) Индексы митоза, рассчитанные по сечениям, представленным в A — D и F — I ( n = 4 эмбриона на группу) показывают, что лечение антиандрогенами (флутамид) снижает пролиферацию клеток в 4D у мужчин ( E ), тогда как лечение антиэстрогенами (фулвестрант) увеличивает пролиферацию клеток в 4D женщин ( J ). Планки погрешностей показывают ± SEM. * P <0,05.

У контрольных самок количество BrdU-положительных клеток существенно не различалось между средними фалангами 2D и 4D ( P = 0.158; Рис.4 F, G и J ). Антагонизм ER с помощью фулвестранта вызывал значительно более высокую пролиферацию клеток в 4D по сравнению с 2D ( P = 0,003; фиг. 4 J ). Фулвестрант привел к увеличению на 35% количества BrdU-положительных клеток в средней фаланге 4D, но только на 0,2% к увеличению в 2D (фиг. 4 H — J ). Сравнение гибели клеток с использованием окрашивания Lysotracker красным не показало различий в апоптозе между контрольными пальцами и пальцами, обработанными флутамидом (рис.S6). Таким образом, пониженное соотношение 2D: 4D у женщин, получавших фулвестрант, связано с повышенной пролиферацией клеток в средней фаланге 4D.

Цифровая регуляция экспрессии генов с помощью AR и ER.

Основываясь на обнаружении того, что передача сигналов андрогена и эстрогена контролирует развитие полового диморфизма пальцев, регулируя пролиферацию клеток в определенных пальцах (и даже определенных фалангах), и наблюдение, что 2D и 4D показывают различия в активности AR и ER, мы проверили гипотезу о том, что сеть хондрогенных генов может регулироваться по-разному в 2D и 4D.Экспрессия 90 генов, которые, как известно, участвуют в развитии скелета, сравнивалась в 2D и 4D после лечения флутамидом и фулвестрантом. Количественная оценка уровней транскриптов в 4D по сравнению с 2D идентифицировала 19 генов со значительными, специфичными для пальцев ответами либо на флутамид, либо на фулвестрант (рис. 5 и таблица S1). У мужчин антагонизм AR с флутамидом значительно снижал относительную экспрессию Ihh, FgfR2, Sox9, Col10a1, Col4a2 и Col12a1 , но увеличивал экспрессию Bmp6, Smad3, Wnt5a, Igfbp2, Igfbp5, Run9x. и Itgam (рис.5 и Таблица S1). У женщин, напротив, антагонизм ER с фулвестрантом значительно увеличивал относительную экспрессию Ihh, Col4a2, Col5a1, Col6a2 и Col14a1 , но уменьшал Fgf3, Msx1, Igfbp2 и Igfbp5 (Fig. и таблица S1). Ни в одном случае флутамид и фулвестрант не вызывали значительных изменений в одном и том же направлении, что позволяет предположить, что андроген и эстроген имеют противоположные эффекты на экспрессию скелетогенных генов во время развития пальцев.Вместе наши исследования показывают, что соотношение 2D: 4D отражает эффекты пренатальных половых стероидов на гены, которые регулируют пролиферацию и дифференцировку клеток-предшественников хондроцитов в 4D.

AR и ER имеют специфичные для пальцев эффекты на экспрессию скелетогенных генов. Показаны результаты количественного анализа экспрессии 90 скелетогенных генов с помощью ОТ-ПЦР в 2D и 4D. Графики показывают относительные уровни транскриптов в зачатках 4D по сравнению с 2D, которому было присвоено значение 0. 19 генов, показывающих статистически значимые различия ( P <0.05)> 40%. См. Таблицу S1 для результатов по всем 90 генам. Планки погрешностей показывают ± SEM, а звездочки обозначают значительные различия.

Обсуждение

Отношение 2D: 4D было предложено для отражения пренатального воздействия тестостерона; однако эта модель была основана на корреляционных исследованиях на людях (3, 11) и до сих пор не тестировалась экспериментально. Наш анализ соотношения пальцев мышей выявил значительную разницу между соотношением 2D: 4D самцов и самок еще на E17, и мы предоставили прямые доказательства того, что половое диморфное соотношение пальцев обусловлено передачей сигналов андрогенов и эстрогенов.Мы обнаружили, что 4D имеет более высокие уровни AR и ER, чем 2D, и что активность этих рецепторов влияет на соотношение 2D: 4D, модулируя уровни экспрессии скелетогенных генов и пролиферацию клеток специфическим для пальцев образом. Мы предполагаем, что поляризованное распределение AR и ER-α в зачатках пальцев, которое сохраняется между полами, вместе с полоспецифическими профилями циркулирующих гормонов приводит к дифференциальной активации рецепторов гормонов в 2D и 4D. В свою очередь, AR и ER-α по-разному регулируют экспрессию хондрогенных генов в D4, что лежит в основе дифференциального роста пальцев у мужчин и женщин (рис.6).

Основа развития сексуально-диморфного отношения 2D: 4D. Показаны модели развития половодиморфных пропорций пальцев. AR (синие кружки) и ER (розовые кружки) присутствуют в сгустках пальцев мужских и женских эмбрионов, с более высокими уровнями, обнаруженными в 4D. ( A ) У мужчин пальцы подвергаются воздействию высоких уровней циркулирующего андрогена и низкого уровня циркулирующего эстрогена, что приводит к преимущественному связыванию и активации AR (AR ^A представляет собой андроген, связанный с AR).Высокая активность AR и низкая активность ER ( Δ AR ^A / Δer) у мужчин приводят к дифференцированным профилям экспрессии генов в 4D по сравнению с 2D (зеленый цвет указывает на гены выше в 4D, а красный указывает на гены выше в 2D). В свою очередь, пролиферация хондроцитов увеличивается в проксимальной фаланге 4D, что приводит к удлинению 4D по сравнению с 2D, что приводит к более низкому соотношению 2D: 4D. ( B ) У женщин пальцы подвергаются воздействию высоких уровней эстрогенов и низких уровней андрогенов, что приводит к преимущественному связыванию и активации ER (ER ^E ).Низкая активность AR и высокая активность ER (Δar / Δ ER ^E ) вызывают противоположный сдвиг в профиле экспрессии скелетогенных генов 4D по сравнению с 2D (обозначены названиями генов зеленым и красным, как указано выше). Более высокие уровни активированного ER вызывают снижение пролиферации хондроцитов в средней фаланге 4D, что снижает его рост по сравнению с 2D и приводит к более высокому соотношению 2D: 4D.

Наше открытие, что отношения 2D: 4D, обнаруженные на E17, существенно не отличаются от соотношений, обнаруженных у 3-недельных отъемышей или у взрослых, предполагает, что развитие полового диморфного пальца происходит в течение короткого временного окна пренатального развития и что эти различия сохраняются. над жизнью животного.Разница в масштабе соотношения пальцев мыши и человека, наряду с различиями между линиями мышей, может объяснить различные результаты предыдущих исследований соотношения пальцев грызунов (12, 14, 24, 25). Диморфизм соотношения 2D: 4D между самцами и самками мышей, исследованных нами (это исследование) и другими (12), значительно менее выражен, чем тот, который сообщается для людей. Более слабый диморфизм соотношения пальцев мышей может отражать перенос гормонов между мужскими и женскими эмбрионами в рогах матки мышей (26).Действительно, исследования людей с дизиготными близнецами показали, что у женщин с близнецами-мужчинами соотношение 2D: 4D ниже, чем у однополых близнецов женского пола (27). Когда мы экспериментально модулировали активность AR или ER на мышах, различия в соотношении цифр стали значительно более выраженными и приблизились к соотношениям, обнаруженным у людей. Эти результаты согласуются с сообщениями о том, что у людей с мутациями AR, влияющими на реакцию на андрогены, включая синдром полной нечувствительности к андрогенам, наблюдались связанные изменения в соотношении 2D: 4D (28, 29).

У взрослых роль ER в гомеостазе скелета хорошо известна (30). Это исследование предполагает участие андрогенов и эстрогенов в развитии раннего хрящевого скелета. Наши данные по экспрессии генов показывают, что половые стероиды контролируют развитие пальцев посредством регуляции по крайней мере 19 членов скелетогенной генной сети. Мы обнаружили количественные различия в уровнях их экспрессии в 2D и 4D, указывая на то, что существует молекулярное различие 2D: 4D во время раннего развития пальцев, до того, как произойдет половой диморфный рост.Интересно, что некоторые из этих генов, как было показано, регулируются стероидами в скелетных и других тканях (31–34), а генетические исследования показали, что Wnt5a , Ihh , Bmp6 , Fgfr2 , lgfbp2 / 5 , Sox9 и Runx2 — все они играют важную роль в развитии цифровых технологий (35–37). Например, Wnt5a , как было показано, регулирует скорость пролиферации и созревания хондроцитов в длинных костях (38).Наши результаты показывают, что AR является негативным регулятором экспрессии Wnt5a в пальцах и что повышающая регуляция Wnt5a в 4D после антагонизма AR может лежать в основе снижения пролиферации клеток и укорочения этого пальца у мужчин, у которых развивается повышенное / феминизированные соотношения 2D: 4D.

Интересно, что стадии, на которых на рост фаланг могут влиять AR и ER, также являются стадиями, когда половые стероиды маскулинизируют и феминизируют мозг (39). Между отношениями 2D: 4D и набором поведенческих фенотипов, фертильности, болезней, атлетизма и сексуальной ориентации существует сильная корреляция (5, 7–9, 11, 40, 41).Эволюционно гормональная регуляция развития полового диморфного мозга, вероятная цель отбора, могла иметь вторичные эффекты на такие структуры, как пальцы. Следовательно, цифровые соотношения могут быть просто показателями активности андрогена и эстрогена в течение этого периода развития. В свете этой гипотезы любопытно, что несколько генов, идентифицированных в нашем исследовании, также играют роль в развитии мозга (42, 43) и других половых диморфных структур, таких как гениталии, молочные железы и волосы (44, 45).Это открытие повышает вероятность того, что одни и те же гены контроля развития могут опосредовать локальные, органоспецифические ответы на системно циркулирующие гормоны. Наконец, примечательно, что у мышей-самцов с пониженной функцией AR и повышенным соотношением пальцев к феминизированным также развилась гипоспадия, дефект уретральной трубки, который может проявляться как феминизация гениталий. Таким образом, анализ соотношения пальцев в популяции пациентов с гипоспадией может быть информативным индикатором нарушенной гормональной передачи сигналов во время эмбрионального развития.

Методы

Животные и измерения длины пальцев.

AR ^flox мыши были любезно предоставлены Guido Verhoeven (Katholieke Universiteit Leuven) через Marvin Maestrich и Connie Wang (Центр рака М. Д. Андерсона Техасского университета). Prx1 ^Cre Мыши с нокаутом и ER -α были приобретены у Jax. Двойные слепые линейные измерения проксимальных и средних фаланг 2D и 4D в препаратах скелета мышей CD-1 были выполнены с использованием калиброванной сетки окуляра на стереодиссекционном микроскопе (46).Стадия копулятивной пробки была обозначена E0.5 (мыши CD1 рождаются на E19–20). Подробности лечения флутамидом, фулвестрантом, DHT и эстрадиолом описаны в SI Methods .

Гибридизация in situ, гибель клеток, пролиферация клеток и подготовка скелета.

РНК in situ, окрашивание Lysotracker red (Molecular Probes) и скелетные препараты были выполнены, как описано (47). Sox9 Плазмида любезно предоставлена ​​Питером Купманом (Университет Квинсленда, Св.Люсия, Австралия). Для анализа пролиферации клеток BrdU (100 мг / кг) вводили через 24 часа после обработки стероидом или ингибитором стероидных рецепторов, а эмбрионы собирали через 2 часа для иммуногистохимии.

Иммуногистохимия AR и ER-α.

Иммуногистохимия выполнялась с использованием кроличьих первичных антител против AR и анти-ER-α (Santa Cruz), разведенных 1: 200 и инкубированных в течение ночи при 4 ° C. Антитела определяли с помощью набора TSA (Invitrogen) в соответствии с протоколом производителя, визуализированного на конфокальном микроскопе Leica TSM Sp5.

Количественная ОТ-ПЦР.

Количественная ОТ-ПЦР была модифицирована по сравнению с опубликованным методом (47). Цифры 2 и 4 вырезали из эмбрионов мышей, находящихся на стадии CD1, и объединяли по количеству цифр и обработке. Экспрессию скелетогенных генов определяли с использованием массива ПЦР Osteogenesis (PAMM-026; SABiosciences) и системы ПЦР в реальном времени 7900 HT Fast (Applied Biosystems) в соответствии с протоколом производителя. Для получения дополнительной информации см. SI Методы и Таблицу S2.

Оценка положительных номеров клеток AR, ER-α и BrdU.

Для иммуномечения AR и ER-α продольные срезы были разрезаны на 12 мкм, и пять срезов от середины каждого образца ( n = 4) были выбраны, чтобы гарантировать, что мы захватили палец. Начиная от границы мезенхимы / эпителия, пять счетных квадратов (100 × 50 мкм ² ) размещали на расстоянии 10 мкм как на 2D, так и на 4D в конечностях E12.5. Для конечности E14.5 шесть счетных квадратов (100 × 50 мкм, ² ) были размещены на расстоянии 20 мкм друг от друга как на 2D, так и на 4D каждого образца ( n = 4).Для анализа BrdU BrdU-положительные клетки и общее количество клеток (визуализированных с помощью DAPI) подсчитывали по сечениям через каждую фалангу, и для измерений выбирали пять срезов от средней точки каждого образца ( n = 3).

Статистический анализ.

Все групповые различия в наших зависимых переменных были выявлены с помощью двусторонних тестов Стьюдента t с α-уровнем, установленным на 0,05, и все величины эффекта (d Коэна) были> 0,8.

11 Акции для роста дивидендов, обеспечивающие двузначное увеличение

Одна из распространенных ловушек, в которую могут попасть инвесторы в дивиденды, — это погоня за акциями с высокой доходностью, когда им следует покупать акции для роста дивидендов, которые могут обещать годы устойчивого роста доходов.

Благодаря магии начисления процентов дивидендные акции с низкой доходностью, но увеличивающиеся годовые выплаты могут обеспечить превосходную доходность высокодоходным акциям, где выплаты остаются неизменными. По словам Argus Research, высокая текущая доходность также увеличивает процентный риск по акциям, в то время как необычно высокая доходность также может быть признаком того, что компания испытывает трудности и дивиденды находятся под угрозой.

«Хотя доход кажется привлекательным, цены на высокодоходные акции могут оказаться под угрозой», — пишут Джон Ийд из Argus Research, директор портфельных стратегий, и Джим Келлехер, директор по исследованиям.«Действительно, если процентные ставки дрейфуют выше, не склонные к риску инвесторы в акции могут быть привлечены к относительной безопасности облигаций и могут продать свои высокодоходные акции».

Акции, ориентированные на рост дивидендов, которые обычно нравятся Argus Research, имеют более низкую доходность, часто в диапазоне от 1,0% до 2,5% (за некоторыми исключениями, конечно). Хотя доходность не особенно высока, управленческие команды могут с большей вероятностью увеличивать выплаты с течением времени по мере роста доходов. Цель состоит в том, чтобы найти компании, дивиденды которых со временем растут быстрее, чем в среднем по рынку.По словам Ид и Келлехер, такие фирмы готовы к успеху.

«Мы ожидаем, что избранные высококачественные, хорошо управляемые компании продолжат увеличивать свои дивиденды агрессивными (читай: двузначными) ставками, как часть их ценностного предложения для инвесторов», — пишет дуэт.

Argus Research привлекает десятки компаний для реализации своего портфеля моделей роста дивидендов. Мы углубились в 11 имен, которые представляют собой основные моменты группы. Взгляните на одни из лучших акций для роста дивидендов, которые вы можете купить.

Данные по состоянию на 29 октября. Дивидендная доходность рассчитывается путем пересчета в год самой последней выплаты и деления на цену акции. Акции перечислены в порядке, обратном темпам роста дивидендов.

1 из 11

American Water Works

• Рыночная стоимость: 27,6 млрд долларов
• Дивидендная доходность: 1,4%
• Темп роста дивидендов за 5 лет: 10%

«Дивиденды выплачиваются большинством коммунальных предприятий. , — сообщает Argus Research, — но немногие, кроме American Water Works (AWK, 152 доллара.16) поднимайте их двузначными темпами »- среднегодовые темпы в размере 10% за пять лет, которые более чем компенсируют его скромную текущую доходность.

Дженни недавно понизила рейтинг акций American Water Works, но не потому, что с ними что-то не так. Во всяком случае, акции AWK стали жертвой собственного успеха.

«В этом году акции AWK выросли на 30%, — говорит Дженни. — Показатели были исключительными. Чрезмерный рост AWK, вероятно, отражает то, что, по нашему мнению, было «бегством к безопасности», учитывая долгую динамику прибылей компании и уверенное выполнение стратегических планов.Поскольку акции AWK сейчас торгуются выше нашей оценки справедливой стоимости, мы понизили наш рейтинг с «Покупать» до «нейтрального» («Держать») на основе оценки ».

Повышенная цена акций побудила некоторых профи с Уолл-стрит умерить свои оптимистичные настроения в отношении названия. Таким образом, новые инвесторы, возможно, захотят дождаться лучшей точки входа.

Однако у AWK по-прежнему много поклонников. Из 16 аналитиков, освещающих акции, отслеживаемых S&P Global Market Intelligence, пять называют это сильной покупкой, двое говорят «Покупать» и семь оценили это в Hold.Один аналитик говорит «Продавать», а один оценивает его как «Сильную продажу». В совокупности их средняя рекомендация 2,44 соответствует консенсус-оценке «Покупать».

2 из 11

Apple

• Рыночная стоимость: 1,97 триллиона долларов
• Дивидендная доходность: 0,7%
• Темп роста дивидендов за 5 лет: 10%

Некоторые акции отлично подходят для роста дивидендов Рост прибыли на и . Возьмем, к примеру, Apple (AAPL, 115,32 доллара).

Argus Research аплодирует производителю iPhone за участие в «параде технологических дивидендов», отмечая, что темпы роста дивидендов за пять лет составляют 10%.

В то же время аналитики, включая Argus Research, оценивают, что прибыль Apple будет расти в среднем более чем на 11% в течение следующих трех-пяти лет. Это замечательно для компании с рыночной стоимостью, которая регулярно балуется 2 триллионами долларов.

Ожидается, что выпуск нового iPhone 12 побудит пользователей обновить свои iPhone, как никогда раньше.

«С нашей оценкой, что 350 миллионов из 950 миллионов iPhone по всему миру в настоящее время находятся в окне возможности обновления, мы полагаем, что это приведет к беспрецедентному циклу обновления для Apple», — пишет Wedbush, который оценивает AAPL как лучше (покупать).

В последний раз Apple увеличивала дивиденды с выплатой в мае, увеличив их на 6,5%, а ее легендарная денежная позиция дает ей достаточно возможностей для дальнейшего повышения.

3 из 11

Clorox

• Рыночная стоимость: 26 долларов США.3 миллиарда
• Дивидендная доходность: 2,1%
• Темп роста дивидендов за 5 лет: 10%

Clorox (CLX, $ 208,73) — это новое дополнение к портфелю роста дивидендов Argus, и оно идеально подходит дюйм. Argus отмечает, что производитель чистящих средств увеличивал выплаты в течение 42 лет подряд.

Хотя нет никаких сомнений в том, что Clorox имеет превосходный послужной список по росту дивидендов, значительное повышение цены акций заставило ряд аналитиков отойти в сторону.CLX вырос примерно на 40% с начала года, чему способствовал пандемический спрос, и это сделало акции слишком дорогими для некоторых инвесторов.

Действительно, акции переходят из рук в руки в 28 раз больше, чем прибыль в следующем году, в то время как аналитики ожидают, что эта прибыль будет расти в среднем менее чем на 5% в течение следующего пятидесятилетия.

Из 15 аналитиков, освещающих акции, отслеживаемых S&P Global Market Intelligence, трое оценивают их как «сильную покупку», восемь — «удерживать», двое — как «продавать» и двое — как «сильную продажу».

Новые инвесторы, возможно, захотят подождать лучшей точки входа, но нет никаких сомнений в том, что они получают такого же надежного плательщика дивидендов, как и пришли. Clorox увеличивал свои выплаты каждый год с 1977 года, последний раз в мае 2020 года, когда они поднялись на 5% до 1,11 доллара на акцию. Темп роста дивидендов за пять лет составляет 10%.

4 из 11

Microsoft

• Рыночная стоимость: 1,55 трлн долларов США
• Дивидендная доходность: 1,1%
• Темп роста дивидендов за 5 лет: 10%

Microsoft .72) был таким безоговорочным победителем, когда дело доходит до динамики цены акций, что легко упустить из виду то, что он сделал для инвесторов, работающих с доходами. Но компания Argus Research обратила на это внимание, отметив, что софтверный гигант непрерывно наращивал дивиденды на протяжении последних 16 лет.

Еще лучше то, что у MSFT более чем достаточно финансовых средств, чтобы поддерживать рост. Apple может привлечь все внимание из-за того, что в ее бухгалтерских книгах огромные суммы денег, но Microsoft далеко не сутулится.Компания генерировала более 30 миллиардов долларов свободного денежного потока после выплаты процентов по долгу в течение каждого из последних двух лет. MSFT также имеет 138 миллиардов долларов денежных средств и их эквивалентов.

Большая часть улицы находится под контролем компании и ее перспектив получения прибыли. Аналитики ожидают, что Microsoft обеспечит рост среднегодовой прибыли почти на 13% в течение следующих трех-пяти лет.

Их консенсус-призыв к названию — редкая Сильная покупка.

5 из 11

Costco

• Рыночная стоимость: 161 доллар.0 млрд
• Дивидендная доходность: 0,8%
• Темпы роста дивидендов за 5 лет: 12%

Costco (СТОИМОСТЬ, 364,86 долларов США) никого не поразит своими дивидендами, но Argus Research призывает инвесторов взглянуть на более широкую картину доходов.

«Эта доходность для этой розничной компании может быть низкой — 0,9%, но пятилетний послужной список менеджмента роста дивидендов составляет 12%, а средняя годовая доходность за последние пять лет составляла 21%», — пишут аналитики Argus.

Имейте в виду, что за последние пять лет, с учетом дивидендов, общая прибыль COST составила 158%. Без учета дивидендов рост по акциям составил бы всего 133%. Конечно, доходность может показаться ничтожной, но за последние полвека она обеспечила 25 процентных пунктов доходности инвесторов. В последний раз руководство повышало дивиденды в апреле на 7,7% до 70 центов на акцию.

Бычьи аналитики также указывают на то, что, хотя акции не дешевы, они также вряд ли полностью оценены.

«Хотя долгосрочные неопределенности, такие как количество продлений из-за недавнего повышения стоимости членских взносов и угроза со стороны Amazon, остаются контрольными точками, мы сохраняем наш рейтинг« Покупать », поскольку считаем, что текущая оценка обеспечивает умеренную защиту от убытков», — пишут аналитики Stifel.

The Street видит, что Costco обеспечит рост среднегодовой прибыли почти на 10% в течение следующих трех-пяти лет. Средняя рекомендация аналитиков — «Покупать» с 14 решительными призывами к покупке, семью покупками, 10 удержанием и двумя продажами.

6 из 11

Kroger

• Рыночная стоимость: 25,0 млрд долларов США
• Дивидендная доходность: 2,2%
• Скорость роста дивидендов за 5 лет: 12%

Kroger ) является надежным и надежным средством роста дивидендов, отмечает Argus Research.

«Доходность 2,1% для этой компании, производящей основные продукты питания, является оптимальным вариантом для портфеля; руководство увеличивало годовые выплаты в течение 11 лет подряд», — отмечает Argus.

И если вам нужна печать одобрения, учтите, что у крупнейшего в стране оператора супермаркета появился довольно новый поклонник в лице Уоррена Баффета, известного приверженца дивидендов.

Генеральный директор Berkshire Hathaway (BRK.B) впервые инвестировал в КР в четвертом квартале 2019 года и с тех пор увеличил свою долю. В настоящее время холдинговая компания является шестым по величине акционером Kroger с 21,9 млн акций, или 2,8% акций в обращении.

Благодаря 11-летнему опыту непрерывного повышения выплат и темпам роста дивидендов на 12% становится ясно, почему инвесторы, работающие с доходами, обращаются к этому имени.Чистая прибыль также рассчитана на стабильный рост прибыли.

Аналитики отмечают, что Kroger получает выгоду от того, что все больше людей ест дома, и что ему не хватает кредита для своего оживленного онлайн-бизнеса.

«Мы по-прежнему считаем, что акции KR недооценены, и полагаем, что рынок недооценивает потенциал KR в области электронной коммерции», — заявляет CFRA, оценивая акции «Покупать». «Платформа электронной коммерции KR уже сильнее, чем ее ближайший аналог, и в следующем году она должна стать еще сильнее».

7 из 11

Abbott Laboratories

• Рыночная стоимость: 185 долларов.9 миллиардов
• Дивидендная доходность: 1,4%
• Темпы роста дивидендов за 5 лет: 13%

Abbott Laboratories (ABT, 105,00 долл. США) разрабатывает и производит фирменные генерические препараты, медицинские устройства, продукты питания и диагностические продукты . В ее портфолио входят детские смеси Similac, продукты для лечения диабета Glucerna и диагностические устройства i-Stat.

«Доходность 1,5% этой медицинской компании является оптимальным вариантом для портфеля», — отмечает Argus Research.Но, пожалуй, самой сильной стороной этого имени является его легендарный послужной список роста дивидендов. Руководство ABT увеличивало годовые выплаты в течение 48 лет подряд, а его пятилетние темпы роста дивидендов составляют 13%.

Сказать, что менеджмент занимается возвратом денежных средств акционерам, — значит ничего не сказать. Abbott Labs впервые выплатила дивиденды в 1924 году. Последнее повышение выплат произошло в декабре — на 12,5% до 36 центов на акцию.

Argus не одинок в своей любви к компании.В общей сложности 12 аналитиков оценивают акции как «Активная покупка», а четверо — «Покупать». Три аналитика называют это «удержанием», а двое — «продажей».

8 из 11

Sherwin-Williams

• Рыночная стоимость: 62,9 миллиарда долларов
• Дивидендная доходность: 0,8%
• Темп роста дивидендов за 5 лет: 15%

23

-912ams (SHW, $ 692,09) — это новое дополнение к портфелю Argus Dividend Growth. Тот факт, что он увеличивал дивиденды в течение 42 лет подряд, несомненно, играет роль в этом решении.

SHW, которая три года назад приобрела Valspar за 11 миллиардов долларов, является одной из крупнейших в мире компаний по производству красок, покрытий и товаров для дома. Масштаб компании — одна из причин, по которой Baird Equity Research оценивает ее акции как лучше. Фирма отмечает, что SHW извлекает выгоду из роста движения «сделай сам» в условиях пандемии, а также благодаря макроэкономической силе.

«Шервин-Уильямс явно выиграл от улучшения фундаментальных показателей жилищного строительства в США за последние пять лет», — говорят аналитики Baird.«Компания Sherwin должна и дальше опережать рост рынка в 1,5-2 раза, основываясь на своем огромном сотрудничестве с профессиональными подрядчиками по покраске».

Инвесторам, работающим с доходами, определенно не нужно беспокоиться о стабильном и растущем потоке дивидендов Шервин-Вильямс. С 1979 года SHW увеличивала объем своего распределения каждый год, в том числе почти на 19% в феврале 2020 года, и выплачивает всего 27% своей прибыли в виде дивидендов.

9 из 11

Illinois Tool Works

• Рыночная стоимость: 62 доллара.2 миллиарда
• Дивидендная доходность: 2,3%
• Темпы роста дивидендов за 5 лет: 18%

Illinois Tool Works (ITW, 196,81 долл. США) — недавнее добавление к списку акций Argus для роста дивидендов, спасибо частично из-за 56-летней серии увеличения дивидендов.

Не повредит и долгосрочный рост выплат на 18%.

ITW, которая производит строительные изделия, запчасти для автомобилей, ресторанное оборудование и многое другое, также управляет предприятиями, включая Foster Холодильники, ACME Packaging Systems и Wolf Range Company.

Профи прогнозируют, что Illinois Tool Works обеспечит стабильный рост прибыли в предстоящие годы. Действительно, они ожидают ежегодного роста доходов на 11% в течение следующих трех-пяти лет. Тем не менее, для большинства инвесторов он выглядит дорогим, торгуясь на уровне 26,5 от прибыли в следующем году.

Оценка отчасти является причиной того, что средняя рекомендация аналитиков — «Держать». Они также обеспокоены глобальным экономическим ростом.

«ITW должна быть ключевым холдингом в любом промышленном портфеле», — пишет Стифель (Держать).«В настоящее время мы считаем, что акции ITW полностью оценены, учитывая неопределенную макросреду и ее влияние на глобальную промышленную экономику».

10 из 11

AbbVie

• Рыночная стоимость: 142,4 миллиарда долларов
• Дивидендная доходность: 6,4% *
• Скорость роста дивидендов за 5 лет: 20%

AbVie ABBV, $ 80,67) была выделена из Abbott Laboratories в 2013 году. Как и ее материнская компания, она имеет давнюю полосу роста дивидендов.Что, возможно, даже лучше, так это то, что у ABBV есть несколько блокбастеров на руках.

Включая время в составе Abbott, AbbVie увеличивала годовое распределение в течение 49 лет подряд, последнее повышение было объявлено в конце октября. ABBV заявила, что одобрила увеличение дивидендов на 2021 год на 10,2%, начиная с выплаты дивидендов в феврале.

Argus Research отмечает, что фирма увеличивала дивиденды в среднем на 20% за последние пять лет (до этого увеличения).А с доходностью, значительно превышающей 6%, исходя из новых выплат, ABBV, безусловно, выделяется как исключение из предпочтений Argus в отношении низкой доходности.

Два самых продаваемых продукта AbbVie включают Humira, лекарство от ревматоидного артрита, которое было одобрено для лечения многих других заболеваний, и лекарство от рака Imbruvica. Хумира идет по пути к тому, чтобы превзойти липитор как самый продаваемый препарат всех времен.

* Доходность основана на недавно объявленном увеличении дивидендов.

11 из 11

Home Depot

• Рыночная стоимость: 290 долларов.2 миллиарда
• Дивидендная доходность: 2,2%
• Темпы роста дивидендов за 5 лет: 22%

Home Depot (HD, 269,63 долл. США) недавно увеличила выплаты «всего» на 10% в феврале, Argus Исследования отмечают, но не позволяйте этому отвлекать вас от того факта, что у розничного продавца долгосрочные темпы роста дивидендов составляют 22%.

Крупнейшая в стране сеть по благоустройству дома — одно из немногих предприятий, которым пандемия вынуждает людей оставаться ближе к дому.И он максимально использует это.

«Доказательства довольно очевидны: люди едят дома, играют дома и заказывают вещи из дома, и, поскольку« дом »так важен, американцы вкладывают средства в свои дома и дворы», — говорит Аргус. «Укрытие дома дало потребителям время и желание заняться небольшими проектами по благоустройству дома. HD является потенциальным бенефициаром, если потребители перераспределяют часть своих расходов с путешествий и еды вне дома на работу, отдых и учебу в безопасном комфортабельном доме. и двор.

Более широкое аналитическое сообщество также настроено оптимистично в отношении HD, компонента промышленного индекса Dow Jones. Их средняя рекомендация — «Покупать», согласно S&P Global Market Research, с долгосрочным прогнозом роста на уровне 8,1%.

Double -Цифровой рост продаж новых автомобилей ожидается в сентябре 2015 года, согласно синей книге Келли

Двухзначный рост продаж новых автомобилей ожидается в сентябре 2015 года, согласно синей книге Келли

Volkswagen Group отстает от отрасли после кризиса; октябрь и последующие годы могут Доказать хуже

ИРВИН, Калифорния., 25 сентября 2015 г. / PRNewswire / — Ожидается, что продажи новых автомобилей вырастут на 12 процентов по сравнению с аналогичным периодом прошлого года до 1,39 миллиона единиц в сентябре 2015 года, в результате чего, по оценкам, будет 17,5 миллиона автомобилей с учетом сезонных колебаний в год (SAAR). , согласно Kelley Blue Book www.kbb.com, единственному источнику информации и оценке транспортных средств, которому доверяют и на который полагаются как потребители, так и автомобильная промышленность. 1,39 миллиона единиц — это самый высокий объем продаж в сентябре с 2006 года.

Ожидайте значительного роста продаж в отрасли в сентябре, при этом средняя прибыль производителей выражается двузначными числами.Включение продаж ко Дню труда с итогами сентября этого года — одна из причин большого скачка, но основной спрос на новые автомобили остается высоким. Учитывая, что средний возраст автомобилей на дорогах растет, цены на подержанные автомобили растут, а финансирование остается недорогим, похоже, что в ближайшем будущем продажи новых автомобилей продолжат расти.

«Хотя скандал с Volkswagen окажет негативное влияние на продажи, затронутые модели составляют менее четверти их портфеля, и некоторые дилеры уже исчерпали свои запасы этих единиц», — сказал Алек Гутьеррес, старший аналитик Kelley Blue Book.«Более серьезная проблема — это удар по имиджу бренда автопроизводителя и его предполагаемая надежность, что может повлиять на продажи других их моделей. Мы думаем, что влияние на сентябрьские продажи не будет слишком плохим для совокупных продаж Volkswagen Group, но октябрь и последующие годы могут стать еще одной проблемой. история.»

Ключевые показатели ориентировочного прогноза продаж на сентябрь 2015 года:

• Ожидается, что в сентябре продажи новых легковых автомобилей, включая автопарк, достигнут 1 390 000 единиц, что на 11,9 процента больше, чем в сентябре 2014 года, и на 11 процентов меньше.7 процентов с августа 2015 года.
• Годовой показатель с учетом сезонных колебаний на сентябрь 2015 года оценивается в 17,5 миллионов, по сравнению с 16,4 миллиона в сентябре 2014 года и ниже 17,7 миллиона в августе 2015 года.
• Ожидается, что на розничные продажи в сентябре 2015 года будет приходиться 86,7 процента объема по сравнению с 85,5 процента в сентябре 2014 года.

Ford Motor Company продолжает увеличивать продажи грузовых автомобилей и фургонов; Сила корейского бренда связана с продажами автопарка

Ford Motor Company ожидает еще один стабильный месяц роста, при этом прибыль будет приходиться на сегменты грузовых автомобилей и фургонов.Фургон Ford Transit пользуется успехом в США, в этом году объем продаж фургонов бренда вырос на 27 процентов.

Кроме того, Hyundai и Kia могут увидеть некоторые значительные улучшения в продажах с прогнозируемым ростом на 18 процентов по сравнению с этим периодом прошлого года, несмотря на то, что портфели продуктов сильно тяготеют к сокращающемуся автомобильному сегменту. Тем не менее, отчасти это объясняется ростом продаж автопарка, который вырос на 24 процента за год.

	Объем продаж 1			Доля рынка 2
Производитель	Сен-15	сен-14	ГОД%	Сен-15	сен-14	ГОД%
General Motors (Buick, Cadillac, Chevrolet, GMC)	246 000	223 437	10.1%	17,7%	18,0%	-0,3%
Ford Motor Company (Форд, Линкольн)	205 000	179 518	14,2%	14.7%	14,4%	0,3%
Toyota Motor Company (Lexus, Scion, Toyota)	190 000	167 279	13,6%	13,7%	13.5%	0,2%
Fiat Chrysler (Крайслер, Додж, ФИАТ, Джип, RAM)	188 000	169 890	10,7%	13,5%	13,7%	-0.1%
Американская Honda (Акура, Хонда)	135 000	118 223	14,2%	9,7%	9,5%	0,2%
Nissan Северная Америка (Infiniti, Nissan)	116 000	102,955	12.7%	8,3%	8,3%	0,1%
Hyundai-Kia	114 000	96 638	18,0%	8,2%	7.8%	0,4%
Volkswagen Group (Audi, Volkswagen, Porsche)	48 000	44 520	7,8%	3,5%	3,6%	-0.1%
Итого 3	1,390,000	1,242,506	11,9%	–	–	–
1 Исторические данные из объявлений о продажах OEM
2 Kelley Blue Book Automotive Insights
3 Включает не показанные марки

Compact Utility продолжает оставаться самым популярным сегментом; Грузовики поднимаются на F-150 Наличие
Второй месяц подряд наиболее популярным будет сегмент компактных коммунальных услуг.В сентябре продажи в этом сегменте процветали, поскольку цены на газ в США приблизились к низкому уровню в 2 доллара на национальном уровне, а продажи с начала года до настоящего времени выросли на 14 процентов.

«Сентябрь также должен стать сильным месяцем для продаж грузовиков, чему способствуют низкие цены на бензин и возросшая доступность F-150 с алюминиевым кузовом», — сказал Гутьеррес. «Впервые в этом году серия F достигла 70 000 единиц в августе, и в этом месяце она должна показать дальнейшее улучшение».

	Объем продаж 1			Доля рынка
Сегмент	Сен-15	сен-14	ГОД%	Сен-15	сен-14	ГОД%
Компактный внедорожник / Кроссовер	203 000	155 285	30.7%	14,6%	12,5%	2,1%
Полноразмерный пикап	199 000	173 127	14,9%	14.3%	13,9%	0,4%
Среднеразмерный легковой автомобиль	197 000	176,256	11,8%	14,2%	14.2%	0,0%
Компактный автомобиль	183 000	165 880	10,3%	13,2%	13,4%	-0.2%
Среднеразмерный внедорожник / кроссовер	153 000	135 188	13,2%	11,0%	10,9%	0,1%
Итого 2	1,390,000	1,242,506	11.9%	–	–	–
1 Kelley Blue Book Automotive Insights
2 Включает не показанные сегменты

В сентябре 2015 года 25 дней продаж по сравнению с 24 днями продаж в сентябре 2014 года.Все проценты основаны на чистом объеме, а не на дневной цене продажи.

Чтобы обсудить эту тему или любую другую информацию, относящуюся к автомобилестроению, с аналитиком Kelley Blue Book в прямом эфире через студию компании, пожалуйста, свяжитесь с членом группы по связям с общественностью, чтобы записаться на интервью.

Для получения дополнительной информации и новостей с сайта KBB.com Kelley Blue Book посетите www.kbb.com/media/, подпишитесь на нас в Twitter по адресу www.twitter.com/kelleybluebook (или @kelleybluebook), как и на нашу страницу в Facebook по адресу www.facebook.com/kbb и узнавайте новости в Google+ по адресу https://plus.google.com/+kbb.

О Синей книге Келли (www.kbb.com)
Основанная в 1926 году компания Kelley Blue Book, The Trusted Resource® , является единственным источником информации и оценки транспортных средств, которому доверяют и на который полагаются как потребители, так и автомобильная промышленность. Каждую неделю компания предоставляет на своем веб-сайте KBB.com с самым высоким рейтингом рыночные показатели в отрасли, в том числе свои знаменитые значения Blue Book® Trade-In и Fair Purchase Price, в которых сообщается, сколько другие платят за новые и подержанные автомобили. На этой неделе.Компания также предоставляет цены на автомобили и их стоимость с помощью различных продуктов и услуг, доступных автосалонам, производителям автомобилей, финансовым и страховым компаниям, а также государственным учреждениям. Согласно исследованию Harris Poll EquiTrend ^® за 2015 год сайт KBB.com компании Kelley Blue Book занял наивысшее место в своей категории по капиталу бренда и четыре года подряд был назван брендом года для онлайн-шоппинга. Kelley Blue Book Co., Inc. — это автомобильная компания Cox.

Логотип

— http: // photos.prnewswire.com/prnh/20121108/LA08161LOGO

ИСТОЧНИК Kelley Blue Book

Для получения дополнительной информации: Контакты для СМИ: Чинтан Талати, 949-267-4855, [email protected], или Джоанна Пинкхэм, 404-568-7135, [email protected], или Бренна Робинсон, 949-267 -4781, [email protected], или Мишель Бехар, 949-268-4259, [email protected]

TrialCard сообщает о двузначном росте за третий год подряд

MORRISVILLE, NC— TrialCard Incorporated объявила сегодня, что в 2020 году снова достигла двузначного роста выручки в годовом исчислении, несмотря на проблемы, связанные с пандемией COVID-19 .Этот рост произошел после того, как поставщик биофармацевтических решений сообщил о последовательном органическом росте на 44% в годовом исчислении как в 2018, так и в 2019 году.

«2020 год был трудным годом для всех на самых разных уровнях», — сказал президент и главный исполнительный директор TrialCard Марк Бук. «Несмотря на препятствия, связанные с COVID-19, с которыми мы столкнулись, реализация нашего многоуровневого плана обеспечения непрерывности бизнеса была завершена на 100% к концу первого квартала. Этот быстрый ответ задал тон на оставшуюся часть года, и для нас было честью быть выбранным в качестве поставщика услуг по маркетинговой поддержке хорошо известной терапии COVID-19.В течение 2020 года наша команда оставалась сосредоточенной на стоящих перед нами задачах для наших биофармацевтических клиентов и их пациентов ».

Успех TrialCard основан на ее стремлении улучшить качество обслуживания пациентов биофармацевтических компаний. TrialCard предоставляет интегрированный набор решений для доступа пациентов, доступности и соблюдения режима лечения, которые оптимизируют качество лечения пациентов и поставщиков услуг, что приводит к увеличению вовлеченности и превосходным результатам. В ноябре Triangle Business Journal признал TrialCard второй наиболее быстрорастущей частной компанией в области Triangle.

«TrialCard оказалась эффективным средством сочетания лучших в своем классе решений по доступности и доступу для пациентов с информацией о плательщиках в режиме реального времени и передовыми технологиями взаимодействия с пациентами и приверженности лечению», — отметил Скотт Дулитц, директор по стратегии TrialCard. «Только в прошлом году экосистема комплексной поддержки пациентов TrialCard помогла более 2,3 миллионам человек получить доступ к лекарствам, меняющим жизнь, при одновременной экономии почти 3,1 миллиарда долларов на совместных расходах с пациентами. Ставя пациента в центр всего, что мы делаем, TrialCard имеет все возможности для дальнейшего успеха.

TrialCard, которая завершила пять ключевых приобретений за последние два года, также опережает график интеграции этих дополнений. Canary Insights, лидер в области медицинского оборудования и услуг диагностики, была приобретена в октябре и была объединена с Policy Reporter и ее запатентованной технологией мониторинга политик. Естественная синергия между двумя компаниями ускорила рост обоих предприятий. Недавние усовершенствования в Mango Health версии 2.0, мобильной технологической платформе TrialCard, привели к появлению дополнительных новых направлений деятельности.

«Наши недавние приобретения выгодно отличают TrialCard от конкурентов и делают ее комплексной интегрированной биофармацевтической компанией, предоставляющей непревзойденный опыт работы с пациентами и поставщиками услуг. Это позволяет людям получать и продолжать принимать жизненно важные лекарства », — добавил Бук.