Фабрициус ян: Ян Фабрициус (26 июня 1877

Содержание

ФАБРИЦИУС ЯН ФРИЦЕВИЧ — информация на портале Энциклопедия Всемирная история

лат. Jānis Fabriciuss.

Советский военачальник, участник Гражданской войны.

Биография и карьера

Родился в семье батрака. С отличием окончил Виндавское городское училище. В 1894 г. получил образование в Александровской гимназии в г. Рига. В 1898–1899 гг. проходил военную службу в Литовском полку третьей гвардейской дивизии, в чине прапорщика был уволен в запас. Затем работал слесарем на машиностроительном заводе в Риге, но после ареста в 1901 г. был уволен. В 1903 г. вступил в РСДРП, распространял газету «Искра» и марксистскую литературу, через год суд приговорил его к 4 годам колонии за революционную деятельность. Находился в ссылке в Якутской области и на Сахалине. После начала Первой мировой войны ушел на фронт в качестве добровольца и воевал в составе первого Латышского стрелкового полка, получил несколько боевых ранений и заслужил военные награды, войну окончил в звании штабс-капитана. После Февральской революции стал председателем полкового комитета. С января 1918 г. член ВЦИК, принимал непосредственное участие в организации частей Красной Армии, командовал Гдовским отрядом, был председателем Военно-революционного комитета Псковского уезда. Командовал различными подразделениями, участвовавшими в боях на территории Латвии и Эстонии. 13 февраля 1919 г. его наградили орденом Красного знамени. В одном из боев получил тяжелое ранение, но после выздоровления с августа 1919 г. организовал оборону Ливно-Елецкого района против прорвавшихся в тыл отрядов К.К. Мамонтова, в Ельце организовал командные курсы и подготовил оборону города, ему удалось разбить отряд белых, захвативших город. Затем в качестве начальника и военкома сводного Первого отряда внутреннего фронта принял участие в боях с войсками генерала А.И. Деникина. В октябре получил именные часы из рук М.И. Калинина. Командовал 48-й стрелковой бригадой, принявшей участие в боях советско-польской войны. В 1921–1923 гг. начальник и комиссар Объединённых курсов комсостава РККА в Полоцке. Во время мятежа в Кронштадте 1921 г. по предложению К.Е. Ворошилова возглавил 501-й стрелковый полк, боровшийся против восставших, и лично повел в атаку солдат по льду Финского залива. С 1923 г. начальник второй Белорусской дивизии, затем 17-го Приморского стрелкового корпуса на Украине и 4-го стрелкового корпуса в Витебске. 17 мая 1928 г. был назначен помощником командующего Отдельной Кавказской Краснознамённой армией. Первый 4-кратный кавалер ордена Красного Знамени (1919, 1920, 24.03.1921, 31.12.1921). Погиб около г. Сочи в авиакатастрофе. Похоронен в Тифлисе (ныне Тбилиси).

Смежные статьи Литература
  • Кондратьев Н.Д. Ян Фабрициус: Командир Красной Армии. 1877-1929. Рига, 1954.
  • Латышские стрелки в борьбе за Советскую власть в 1917-1920 годах: Воспоминания и документы. Рига, 1962.
  • Легендарный комбриг: Воспоминания о Я.Ф. Фабрициусе. Рига, 1971.

Странная гибель Железного Мартына | Газета "Премьер"

Последний подвиг

До сих пор неясно, зачем находившегося в отпуске Фабрициуса вдруг срочно «дёрнули» на военные манёвры. Чтобы поспеть к сроку, заместитель командующего вынужден был полететь самолётом.
Тогда-то, 24 августа 1929 года, всё и произошло.

...Самолёт упал в море в шестидесяти метрах от берега, но некоторое время ещё держался на воде. На помощь поспешили несколько лодок. Находившийся в кабине самолёта мужчина (это был Ян Фабрициус) крикнул: «Здесь женщина с ребенком, спасайте их!» Он же подал в окно маленькую девочку и вытолкнул женщину. Сам же Фабрициус спастись не успел — самолёт перевернулся.

Уже потом стало известно, что вместе с Яном Фабрициусом летела Александра Васильевна Андреева с мужем и четырехлетней дочкой Инной (они добирались на перекладных из Москвы в Сухуми, а Фабрициус присо­единился к ним в Сочи). Именно их спас красный командир перед тем, как найти свою смерть в водах Чёрного моря.

Из воспоминаний Александры Андреевой: 

«Я села на свое место, взяла дочку на руки, Фабрициус сел позади меня. Завели мотор. Самолёт покатился, пробежал несколько метров и вдруг остановился. «Что-то у них не ладится», — озабоченно сказал мне Фабрициус. Мотор снова завели, мы взлетели. Но самолёт никак не мог набрать высоту. Над морем он странно покачнулся и через несколько секунд упал. От резкого толчка дочка выскочила у меня из рук и отлетела в дальний угол кабины, где были сложены чемоданы. В кабину хлынули потоки воды. Я кинулась к мужу. Но он и сидевший рядом с ним пассажир — инженер Гартье — были без сознания. Ко мне обернулся Фабрициус. Лицо его было очень бледно, но спокойно. «Не волнуйтесь, — проговорил он. — Надо спасти ребенка». Он бросился к вещам, откуда-то из-под чемоданов вытащил Инну. Одно окно было ещё над водой. Фабрициус поднёс Инну к этому окну, открыл его и передал девочку кому-то. Потом он пробрался ко мне. Вода была уже нам по грудь. «Лезьте в окно». Вода ударила меня в лицо, я захлебнулась... И очнулась уже в лодке».

А после распада СССР получила распространение лживая версия, будто бы Фабрициус, дабы поразить свою подругу (!), сел с ней в самолёт и приказал пилоту пройти бреющим полётом над Сочи. Невдалеке от пляжа самолёт воткнулся в воду. Объявили, что герой Гражданской войны погиб в подстроенной троцкистами авиакатастрофе, спасая своих спутников...

Мотая на ус

Официальная трактовка событий была вовсе не такая. По предположению заведующего авиабазой, откуда взлетел Фабрициус, самолёт упал в воду, потому что «попал в сильную струю двух воздушных течений — холодного и тёплого». В пользу несчастного случая говорит и тот факт, что за гибель командира никого не наказали.

Однако это не объясняет проблем с двигателем, о которых рассказала Александра Андреева. Скорее всего, имела место всё же некая техническая неисправность, а толкового расследования тогда провести не сумели.
Или всё-таки это было подстроено — и внезапный вызов из отпуска, и неполадки самолёта?

...Похороны красного командира организовали в Тифлисе. Гибель Фабрициуса, да ещё при таких обстоятельствах, способствовала тому, что он попал в пантеон советских героев вместе с Михаилом Фрунзе, Феликсом Дзержинским. Память Фабрициуса увековечили: в его честь было названо много улиц в советских городах, воздвигнуты памятники в латвийском Вентспилсе и Гдове. К сожалению, усы — «визитную карточку» Фабрициуса — у этих монументов отбивают вандалы.

Вологда же ограничилась лишь некрологами в «Красном Севере».

И только для ставшей гидротехнологом девочки Инны, которую Ян Фабрициус спас в последний день своей жизни, он навсегда остался не памятником, не красным командиром с неоднозначной репутацией, а просто большим и сильным человеком с усами — лица своего спасителя она в силу возраста не запомнила...

Фабри́циус, Ян / люди / Латышские стрелки

****************************************************************

Материал из Википедии — свободной энциклопедии

Ян Фабрициус на открытке ИЗОГИЗ, СССР

Ян Фри́цевич Фабри́циус (латыш. Jānis Fabriciuss, 14 (26) июня1877 Злекас, ныне Вентспилсского района Латвии — 24 августа 1929, около Сочи) — командир и комиссар Красной Армии во время гражданской войны.

Биография

Родился в семье латышского батрака. В 1894 году окончил гимназию.

Работал на рижском машиностроительном заводе. Член РСДРП с 1903 года. В революционном движении с 1891. В 1904 году был осуждён рижским окружным судом на четыре года каторжной тюрьмы с последующей высылкой в Якутию. С 1916 года в армии, участник 1-й мировой войны, старший унтер-офицер в 1-м Латышском стрелковом полку.

С октября 1917 года председатель полкового комитета. С января 1918 член ВЦИК. В 1918 командир Гдовского отряда, военком Гдовско-Торошинского района, председатель ВРК Псковского уезда, отличился в боях против немецких интервентов и партизанских формирований под командованием С. Н. Булак-Балаховича. В конце 1918 — начале 1919 комиссар 2-й и 10-й стрелковой дивизий при освобождении Латвии. С августа 1919 командир отряда по борьбе с конницей К. К. Мамонтова во время её рейда в тыл советских войск. С октября 1919 командир 48-й бригады 16-й стрелковой дивизии при разгроме войск генерала А. И. Деникина и в советско-польской войне. Участник подавления Кронштадтского мятежа 1921 года.

В 1922—1923 годах — начальник Объединённой белорусской военной школы имени ЦИК БССР (Минск)[2].

После войны командир дивизии, командир 4-го стрелкового корпуса в Витебске (1927—1928)[3], с 1928 помощник командующего Кавказской армией. С 1927 член ЦК ВКП(б).

24 августа 1929 года утонул, спасая пассажиров самолёта, упавшего в море вблизи города Сочи.

Награды

Память

  • В его честь названа улица в муниципальном районе Южное Тушино Северо-Западного округа Москвы; улицы в Минске, в Полоцке, Пскове, Липецке, Ельце, Сочи, Виннице, Невельске, Харькове, Лугах, Донецке, Маккеевке.
  • Санаторий Министерства обороны РФ в Сочи.
  • Также его имя носило Даугавпилсское высшее военное авиационное инженерное училище (расформировано в 1993 году), колесный пароход Днепровского речного пароходства.
  • В городе Вентспилс воздвигнут памятник Фабрициусу. Также памятник Фабрициусу расположен в г. Гдов Псковской области.
  • Транспорт «Фабрициус» (бывший грузовой пароход «Саида»).
  • В СССР издательством «ИЗОГИЗ» была выпущена открытка с изображением Я. Фабрициуса.

Примечания

Литература

  • Елина Н. Железный Мартын // Филателия СССР. — 1977. — № 8. — С. 54.
  • Кондратьев Н. Д. Ян Фабрициус, М., 1957.

**************************

На сайте также документальный фильм и книга Кондратьева "Ян Фабрициус"

****************************************

Фабрициус Ян Фрицевич (1877, имение Шлясков Курляндской губ. - 1929, ок. Сочи) - сов. военный и парт. деятель. Род. в семье батрака. Окончил гимназию. Участвовал в рев. движении и в 1903 вступил в латышскую социал-демократическую организацию. За участие в первомайской демонстрации был осужден на 4 года каторги, а после ее отбытия был сослан на Дальний Восток, где продолжил рев. деятельность. После неудачной попытки бежать в США Фабрициус вел рев. работу во Владивостоке и Николаевске-на-Амуре. С 1916 участвовал в первой мировой войне, дослужившись до звания штабс-капитана. Находясь на Сев. фронте, Фабрициус принял участие в создании армейских комитетов. В окт. 1917 командовал батальоном в 1 -м латышском стрелковом полку. Во время гражданской войны в должности комбрига воевал против К.К. Мамонтова, А.И. Деникина, Польши. В 1921 - участник подавления мятежа в Кронштадте. Был 7 раз ранен. За исключительные боевые заслуги был награжден 4 орденами Красного Знамени и Почетным рев. оружием. В мирное время командовал дивизией, корпусом; с 1928 стал помощником командующего Кавказской армией. На XV съезде партии Фабрициус был избран в члены ЦКК ВКП(б). Погиб в авиационной катастрофе.

Использованы материалы кн.: Шикман А.П. Деятели отечественной истории. Биографический справочник. Москва, 1997 г.

********************************

Фабрициус Ян Фрицевич [14(26).6.1877, ныне ок. Злекас Вентспилсского р-на Латвии — 24.8.1929, ок. Сочи], герой Гражданской войны. Чл. КПСС с 1903. В Сов. Армии с 1918. Окончил академия, курсы высшего комсостава РККА (1925). В революц. движении с 1891. В 1898 призван в лейб-гвардии Литовский полк. Уволившись из армии в 1899, работал слесарем на маш.-строит. з-де в Риге, вёл революц. пропаганду среди рижского пролетариата. В февр. 1904 за революционную деятельность арестован и осуждён на 4 года каторжной тюрьмы с последующей высылкой на поселение в Якутскую обл., затем был в ссылке на Сахалине (1913-1916). С 1916 в армии, участник 1-й мировой войны на Сев.-Зап. фронте, где проводил активную революционную работу среди солдат 1-го Латышского стрелк. полка. С окт, 1917 пред, полкового к-та. С янв. 1918 чл. ВЦИК, работал в воен. секции по формированию частей Красной Армии. В 1918 ком-р Гдовского отряда, к-рый освободил от белогвардейцев г. Гдов; военком Гдовско-Торошинского р-на, пред. ВРК Псковского уезда, отличился в боях против герм, интервентов (под Псковом) и банд Булак-Балаховича. В кон. 1918 — нач. 1919 комиссар 2-й и 10-й стрелк. дивизий, участвовавших в освобождении Латвии; за отличия в боях и самоотверженную работу на фронте награждён орденом Красного Знамени. Летом 1919 нач-к обороны Ливно-Елецкого р-на, командовал отрядом, к-рый вёл боевые действия против конницы ген. Мамонтова. С окт. 1919 ком-р 48-й бригады 16-й стрелк. дивизии, сражавшейся с деникинцами, а затем и с белополяками. За умелое руководство бригадой в бою под Сморгонью во время войны с буржуазно-помещичьей Польшей 1920 и проявл. отвагу награждён вторым орденом Красного Знамени, а за стойкость, мужество и воинское мастерство, проявл. в наступат. и арьергардных боях в этой же войне, награждён третьим орденрм Красного Знамени. В янв. 1921 нач-к и комиссар Объединённых курсов командного состава РККА. За отличия при разгроме Кронштадтского мятежа 1921 награждён четвёртым орденом Красного Знамени. С марта 1923 Ф.— ком-р 2-й Белорусской дивизии, затем командовал 17-м стрелковым корпусом. С мая 1928 пом. командующего Кавк. Краснознам. армией. Чл. ЦКК ВКП(б) с 1927. Погиб при аварии самолёта, пожертвовав жизнью ради спасения своих спутников. В г. Вентспилс воздвигнут памятник Ф. Его имя носят воен. санаторий, колхозы, предприятия, улицы, школы и пароходы, оно было присвоено Винницкой стрелк. дивизии.

Использованы материалы Советской военной энциклопедии.

***********************************************************

Фабрициус Ян Фрицевич [14(26).6.1877, ныне около Злекас Вентспилсского района Латвийской ССР, – 24.8.1929, около Сочи], герой Гражданской войны. Член Коммунистической партии с 1903. Родился в семье латышского батрака. Окончил гимназию (1894). В революционном движении с 1891. В 1904–07 на каторге, затем в ссылке. С 1916 в армии, участник 1-й мировой войны 1914–18, старший унтер-офицер в 1-м Латышском стрелковом полку. С октября 1917 председатель полкового комитета. С января 1918 член ВЦИК. В 1918 командир Гдовского отряда, военком Гдовско-Торошинского района, председатель ВРК Псковского у., отличился в боях против нем. интервентов и банд С. Н. Булак-Балаховича. В конце 1918 – начале 1919 комиссар 2-й и 10-й стрелковой дивизий при освобождении Латвии. С августа 1919 командир отряда по борьбе с конницей К. К. Мамонтова во время её рейда в тыл советских войск. С октября 1919 командир 48-й бригады 16-й стрелковой дивизии при разгроме войск генерала А. И. Деникина и в сов.-польск. войне. Участник подавления Кронштадтского антисоветского мятежа 1921. После войны командир дивизии, корпуса, с 1928 помощник командующего Кавказской армией. С 1927 член ЦКК ВКП (б). Погиб при авиационной катастрофе. Награжден 4 орденами Красного Знамени.

Лит.: Кондратьев Н. Д., Ян Фабрициус, М., 1957: [Чудов И. С.], Ян Фабрициус, М., 1960.

Большая советская энциклопедия

*****************************************************

Барельеф Яна Фабрициуса

Имя его было присвоено в 1968 году в честь 20-летия училища и 50-летия ВС СССР (Постановление СМ Латв. ССР и приказ МО СССР) Даугавпилсскому Высшему Военному Авиационному Инженерному Училищу ПВО, находящемуся на территории Даугавпилсской крепости.
Барельеф расположен на вертикально установленной плоскости самолета-разведчика (наиболее вероятно это плоскость с ЯК-28Р). Плоскость вмонтирована в трибуну на центральном плацу крепости.

Вентспилс, здесь находится созданный скульптором Янисом Зариньшем (1954) памятник Янису Фабрициусу (1877-1929), легендарному командиру дивизии латышских стрелков Красной армии, нашему земляку, который родился в волости Злекас Вентспилсского края.

Фабрициус Ян Фрицевич

(1877–1929)

Латыш, революционер, полководец Красной армии времен Гражданской войны. Родился 14 (26) июня 1877 года недалеко от села Злекас в Виндавском уезде Курляндской губернии Российской империи. Современная территория Латвийской республики в районе города Венспилс.

Ян Фрицевич Фабрициус родился в семье батрака и увлекся революционными идеями еще в гимназии. После ее окончания, в возрасте 14 лет, вступил в подпольную организацию. В 1898 был призван в Российскую Императорскую гвардию и год служил в лейб-гвардии прославленном Литовском полку.

Уволившись из армии в 1899 году, работал слесарем на машиностроительном заводе в Риге, где вёл активную пропаганду среди рабочих. Первый раз был осужден за революционную деятельность в феврале 1904 года. Приговор - четыре года каторжной тюрьмы с последующей высылкой на поселение в Якутскую область, часть ссылки он провел на острове Сахалин.

В 1915 году подал прошение о добровольном вступлении в ряды действующей армии и был зачислен в 1-й Латышский стрелковый полк, позднее знаменитые «Латышские стрелки». С 1916 года – на Северо-Западном фронте Первой мировой войны. Во время боевых действий Ян Фрицевич получил четыре нетяжелых раны и был несколько раз награжден. В числе наград Георгиевский крест и орден Святого Владимира.

Фабрициус проводил активную революционную работу среди солдат и в 1917 году был избран председателем полкового комитета. Железный нрав и прямолинейность создали ему авторитет, и в январе 1918 года его избирают членом ВЦИК (Всероссийского Центрального исполнительного комитета (ВЦИК).

В 1918 году Ян Фабрициус был назначен командиром Гдовского отряда, который освободил от белогвардейцев Гдов, после чего стал военкомом Гдовско-Торошинского района и председателем ВРК (Военно-революционного комитета) Псковского уезда.

Ян Фрицевич Фабрициус принимал участие в боях за освобождение Пскова от немецкой оккупации 1918 года и добровольческих войск Булак-Балаховича.  Принимал участие в осовобождении Выру, Валки, Валмиеры, Тарту и Риги. 

В конце 1918 года - начале 1919 года дослужился до комиссара 2-й и 10-й стрелковых дивизий, участвовавших в освобождении Латвии. За отличия в боях и самоотверженную работу на фронте награждён первым орденом Красного Знамени. Фабрициус был первым четырехкратным кавалером этого ордена. Один из них он получил за действия при подавлении Кронштадтского мятежа в 1921 году.

Кронштадтские события дали причины считать историческую фигуру Фабрициуса неоднозначной. Ян Фабрициус прославился жесткостью, если не жестокостью, которую он проявлял не только в боях с белыми, но и в подавлении любых выступлений против советской власти

Восстание в Кронштадте подняли идейно близкие представители левых течений, которые были недовольны авторитарной политикой большевиков. В Кронштадте был создан Временный революционный комитет, руководство которым осуществляли матросы и рабочие кронштадтских предприятий. Не всякий командир мог расправиться с вчерашними товарищами. Фабрициус не дрогнув взялся командовать полком, направленным на подавление восставших. Организовал расстрел кронштадтских моряков и морских летчиков из Ораниенбаума. 

С марта 1923 года Фабрициус служил командиром 2-й Белорусской дивизии, был начальником Объединённой белорусской военной школы имени Центрального комитета БССР, преподавал военное дело. Затем командовал 17-ым стрелковым корпусом. С мая 1928 года стал помощником командующего Кавказкой Краснознаменной армией.

Погиб при авиакатастрофе 24 августа 1929 года возле Сочи в возрасте 52 двух лет.

В Латвии, в городе Вентспилс воздвигнут памятник Яну Фабрициусу. В Пскове в 1950-х годах году имя Яна Фабрициуса было присвоено обновляющейся улице. В современном городе широкая улица ведет от вокзала к площади Победы и ее облик сформировался после Великой Отечественной войны. Жилые дома выросли буквально за три года и в них отпраздновали новоселье семьи железнодорожников.

Сейчас на улице Фабрициуса расположены не только жилые дома, но и детский сад, строительный колледж, торговые центры. До переименования улица носила имя революционера и сподвижника Сталина Лазаря Кагановича и представляла собой одноэтажную жилую застройку.

Фотография: с сайта ГАНИПО. Ф.9961. Оп.1. Д.5. Л.3.


 О событиях 1918-1919 годов на Псковской земле читать в ЭБ:

Корнатовский Н. А.
     Борьба за красный Петроград / Корнатовский Н. А. - М. : АСТ, 2004. - 232 с. - Представлены первые шесть глав, в которых содержится материал о Пскове и губернии. - Цифровая копия с разрешением 300 dpi. - Читать полный текст>>>

Крах германской оккупации на Псковщине : сб. док. / сост. А. Л. Фрайман ; ред. Н. А. Корнатовский. - Л. : Лениздат, 1939. - 269 с. - Цифровая копия с разрешением 300 dpi. - Читать полный текст>>>



Паялин Николай Петрович

Комиссар и полководец Ян Фабрициус / Паялин Николай Петрович / Ленингр. ин-т истории ВКП(б), филиал Ин-та Маркса - Энгельса - Ленина при ЦК ВКП(б). - Ленинград : Лениздат, 1941. - 27, [1] с. - На тит л.: Пролетарии всех стран, соединяйтесь!. - ФОНД РК: Велик. Отеч. война (Кол.).

Н. Кондратьев ЯН ФАБРИЦИУС. Полководцы гражданской войны

Н. Кондратьев

ЯН ФАБРИЦИУС

…В ночь с 21 на 22 февраля 1918 года радио и телеграфные станции разнесли по всей стране слова: «Социалистическое отечество в опасности». В нем Ленин говорил суровую правду народу и призывал всех, кому дорога советская власть, встать на защиту великих завоеваний Октября, «…священным долгом рабочих и крестьян России является беззаветная защита республики Советов против полчищ буржуазно-империалистской Германии».

Ночью над Петроградом разнесся будоражащий, протяжный рев гудков. Рабочие направились на заводы. Там их ждали грузовики с оружием. Получив винтовки, красногвардейцы шли к Смольному, где формировались боевые отряды.

В штабе обороны — Смольном — Ленин провел одно за другим три совещания. В них участвовал и член военной секции ВЦИКа Ян Фрицевич Фабрициус.

Ленин попросил военных специалистов изложить свои планы обороны Петрограда, рассчитывая на единственно реальную военную силу — отряды рабочих и матросов, и внимательно выслушал их соображения.

23 февраля в комнате № 40 Таврического дворца состоялось совещание большевистской фракции ВЦИКа. С резкой, суровой, предельно ясной речью в защиту мира выступил Ленин. Большевики — члены правительства одобрили ленинские предложения о принятии немецких условий мира.

Проголосовав за мир, член ВЦИКа Фабрициус из Таврического дворца направился на бывший Путиловский завод. Собрав крошечный отряд — 43 красногвардейца, Фабрициус выехал на Гдовский фронт. В кармане гимнастерки лежал мандат, подписанный В. И. Лениным и Я. М. Свердловым, удостоверявший назначение Я. Ф. Фабрициуса военным комиссаром Гдовского пограничного района.

В пути Фабрициус встретил батальон 4-го Капорского полка под командованием Блинова. На митинге военному комиссару удалось убедить капорцев вступить в ряды 1-го Гдовского революционного отряда. К горсточке красногвардейцев присоединилось 585 бывалых солдат.

Отряд освободил Гдов, разбив белогвардейскую банду прапорщика Белова, и восстановил в городе советскую власть.

Через два дня 1-й Гдовский революционный отряд разгромил конный немецкий полк у деревни Са-молвы. Вскоре после этой знаменательной победы отряд был преобразован в 49-й Гдовский полк.

Командовал полком Нил Блинов, а первым комиссаром был один из организаторов ленинского комсомола — Петр Смородин.

Летом и осенью 1918 года по Гдовскому, Лужскому и Псковскому уездам прокатилась волна кулацких восстаний, организованных белогвардейским «Крестьянским союзом». Для подавления мятежей Петроградским окружным комиссариатом был образован Военно-революционный полевой штаб в составе комиссаров Даумана, Фабрициуса и военрука Васильева.

Восстания были повсеместно подавлены, мятежникам не удалось соединиться с белогвардейским корпусом генерала Драгомирова, сформированным под крылышком у немцев в оккупированном Пскове.

Боевая задача — освобождение Пскова — была возложена на 3-ю стрелковую бригаду 6-й дивизии, командиром которой назначили М. Н. Васильева, а комиссаром — Я. Ф. Фабрициуса. Бригада только формировалась, и штаб мог располагать одним 49-м Гдовским полком, охранявшим побережье Чудского озера.

Комбриг и комиссар до поздней ночи сидели над картой, прикидывали, какие посты и заставы можно снять, откуда вести наступление, чтобы победить опытного, сильного врага. Решили основные силы сосредоточить на двух участках — Торошинском и Талабском. 24 ноября 1918 года отряды этих участков перешли в наступление на Псков. Два дня шёл тяжелый, ожесточенный бой. Белогвардейцы не выдержали яростного удара и оставили город.

…В полночь Фабрициус телеграфировал:

«Москва. Кремль. Председателю Совета Народных Комиссаров В. И. Ленину.

Вчера вечером, 25 ноября с. г., в 16 часов 30 минут доблестными красноармейскими частями Торошинского участка с бою взят город Псков. Белогвардейские банды при дружном натиске наших частей разбежались.

В городе приступлено к восстановлению советской власти».

Рабочие красного Питера вручили героическому 49-му Гдовскому полку Красное знамя. Комиссар Фабрициус получил от питерцев памятную награду — шашку в серебряной оправе.

После освобождения Пскова Ян Фабрициус был назначен комиссаром среднего Псковского боевого участка. В его состав вошли части Новгородской дивизии и 2-й латышской бригады. Они должны были освободить оккупированную немцами Латвию.

Под имением Нейгаузен немецкая Железная дивизия решила задержать продвижение латышских стрелков. Завязалось упорное сражение.

Васильев и Фабрициус на бронепоезде «Красный финляндец» немедленно выехали на боевую позицию. В решающую минуту боя они бросили на помощь латышским стрелкам бронепоезд «Атаман Чуркин» и бронепоезд «Коммунар». Части Железной дивизии были выбиты из Нейгаузена и стали отходить на Верро и Валк. Но и на этих рубежах им не удалось удержаться. Части Среднего Псковского боевого участка, сломив сопротивление противника, пробились к Зеговольдским укрепленным позициям.

29 декабря 1918 года красные полки 24 часа непрерывно атаковали укрепленные высоты Зеговольда. Не перевес сил, а храбрость и верность долгу принесли латышским стрелкам новую победу. Железная дивизия немцев и отряды ландсвера откатились на Хинценбергские позиции.

Эти высоты Фабрициус и его товарищи по оружию знали по оборонительным боям осени 1917 года. Теперь немцы поставили здесь бетонные и железные колпаки на всех буграх, просеках, перекрестках дорог. Они прикрыли глубокие траншеи семирядным проволочным забором, вырубили кусты и деревья, мешавшие вести фланговый пулеметный огонь.

По просьбе председателя Советского, правительства Латвии Петра Ивановича Стучки комиссар Фабрициус выехал в Венден для личного руководства боевыми операциями. Вместо бесплодных кровопролитных лобовых атак он решил нанести фланговые удары по вражеским укреплениям. В ударные отряды были отобраны лучшие бойцы-коммунисты.

…В новогоднюю ночь на правом и левом флангах Хинценбергского укрепленного района началась сильная ружейная и пулеметная стрельба. И сразу же по приказанию Фабрициуса открыли огонь орудия, подвезенные к самым высотам. Они прорубили проходы для пехоты в проволочных заграждениях, разрушили заранее разведанные пулеметные гнезда врага.

Неожиданная частая пулеметная дробь на флангах, а затем и в тылу привела в смятение германских солдат, оборонявших твердыни Хинценберга. В панике они бежали в лес…

К утру командир немецкой Железной дивизии ввел в бой резервы. Навстречу наступавшим латышским стрелкам вышел бронепоезд. За ним развернутыми цепями двигались солдаты.

Красноармейцы остановились, залегли. Вражеский бронепоезд неотвратимо приближался.

Из березовой рощи гулко грянул орудийный выстрел. Все видели: снаряд ударил в дверь бронепоезда и со скрежетом выдрал ее. Второй снаряд разбил бортовое орудие. Стрелки поняли: у прицельного прибора стоит бывалый наводчик.

Бронепоезд обрушил ответный огонь на березовую рощу. Густое облако дыма и снега окутало деревья. Но вот новый выстрел грянул из черной рощи, и у самого паровоза взметнулось неистовое алое пламя.

Когда упали комья земли и улеглась пыль от взрыва, бойцы закричали радостно и громко: бронепоезд пятился назад.

А в березовой роще наводчик смахнул рукавом шинели пот и крикнул:

— Живей подавай, живей, уходит!

Ему не ответили. Наводчик оглянулся и увидел у разбитого осколками снарядов ящика заряжающего. Он лежал на боку, цепко сжав мертвыми пальцами снаряд. Раненый командир орудия подполз к щиту, встал на колени, крикнул:

— С какого полка будешь, товарищ? Возьму в расчет.

Наводчик расправил длиннейшие усы и сказал, хитро щуря глаза:

— Спасибо за честь. Видно, вы из новеньких. Будем знакомы. Военный комиссар Фабрициус.

— Вот вы какой, товарищ комиссар, — засмеялся командир орудия. — Лучшего наводчика мне не найти.

— Подберем, — сказал Фабрициус и торопливо зашагал к цепи стрелков.

Цепи немецких гренадеров отбили залповым огнем.

— Даешь Ригу! — пронеслось по всему фронту, и латышские стрелки пошли по глубокому снегу к притихшему темно-синему лесу.

Враг бежал. Красные бойцы захватили артиллерийскую батарею, 30 пулеметов, вагон снарядов.

Утром 3 января в Ригу вступили полки 2-й латышской бригады и 10-й Новгородский полк. Фабрициус прибыл в город вместе с Петром Стучкой на бронепоезде, отбитом у врага.

Вот и пришла пора желанных встреч с друзьями-подпольщиками, пора ликования и радости. Еще дымились стены подожженных немцами старинных зданий, еще вели огонь уходящие в Либаву корабли, а уже на улицах взбудораженной Риги из рук в руки переходили пахнущие типографской краской газеты «Наша правда» и «Циня», рассказывающие о великой победе восставших рабочих и красных латышских стрелков, о становлении советской власти в Латвии.

В тот же день чрезвычайный военный комиссар Фабрициус передал телеграмму:

«Москва. Председателю Совета Народных Комиссаров товарищу В. И. Ленину.

Председателю ВЦИК товарищу Я. М. Свердлову.

Во время боев 31 и 1 января под натиском доблестных латышских стрелков пала передовая твердыня Риги, укрепленная немцами еще в прошлом году, мыза Хинценберг. Белые были разбиты наголову, вся их артиллерия и пулеметы были захвачены героями-латышами. Этот бой предрешил падение Риги. Сегодня, 3 января, наши доблестные латышские стрелки принесли в подарок пролетариату Латвии Ригу.

Да здравствует отныне и навсегда Красная Рига. Поздравляем Вас, наших передовых пролетарских вождей, с этой крупной победой красных войск».

Отправив телеграмму, Фабрициус вышел на улицу и долго смотрел на алые флаги, развевающиеся на заснеженных зданиях. Невольно вспомнил юные годы, пролетевшие в этом чудесном городе. Здесь он работал на заводе Минута. Здесь в марте 1903 года вступил в ряды латышской социал-демократической партии, стал профессиональным революционером. Отсюда в феврале 1904 года ушел, звеня кандалами, в далекий Якутский край. Пережил каторгу, ссылку и по указанию родной партии вернулся из Сахалина на Рижский фронт в начале 1916 года. Вместе с товарищами по оружию защищал Ригу в знаменитых августовских боях 1917 года. Тяжело было оставлять ее немцам. И вот наконец-то свободна родная Рига.

…Самоотверженная боевая работа военного комиссара Фабрициуса была высоко оценена молодой Советской республикой. 13 февраля 1919 года приказом Революционного Военного Совета «Ян Фрицевич Фабрициус за непрерывную самоотверженную работу на фронте в огне» был награжден орденом Красного Знамени.

Всю зиму и весну 1919 года комиссар Фабрициус находился на самом ответственном участке Петроградского фронта, под Псковом. Даже раненный, он оставался в строю, воодушевляя красных бойцов на подвиги. Товарищи считали Фабрициуса богатырем, но даже его железный организм не выдержал нечеловеческого напряжения. Тяжело. заболевшего комиссара направили в госпиталь…

В конце июля 1919 года Фабрициус по вызову Реввоенсовета Республики выехал в Москву. Прежде чем получить назначение, решил повидаться с В. И. Лениным, к которому неоднократно обращался с докладами о тяжелом положении на Петроградском фронте.

Все получилось не так, как думал Фабрициус. Когда он вошел в кабинет, Ленин разговаривал с кем-то по телефону. По тону и выражению лица нетрудно было догадаться: Владимир Ильич недоволен собеседником. Фабрициус невольно подумал: «Вот не вовремя подвернулся».

Ленин положил трубку, увидел у двери оробевшего Фабрициуса, лукаво улыбнулся:

— Что, испугались? Приходится, батенька, иногда ругаться. Проходите, проходите.

Ленин вышел навстречу, порывисто, двумя руками потряс огромную ладонь Фабрициуса, с теплотой и легкой укоризной произнес:

— Постарели. Заметно постарели. Это от излишней нервозности, Ян Фрицевич. Военные люди должны быть предельно хладнокровными, выдержанными, стойкими.

— Обстановка на фронте была тяжелой, Владимир Ильич, — виновато сказал Фабрициус. — Отступление, потери. Столкнулся с дубовым равнодушием военных специалистов. Вот и пришлось писать вам. И жаловаться, и просить, и даже требовать.

— Преданных специалистов у нас больше, чем предателей, — взволнованно произнес Ленин. — За письма — спасибо. Вы больше нас видите, больше знаете. Первейший долг работников на местах — информировать центральные организации не только и не столько о победах, а главным образом о неудачах, о причинах наших поражений. Петроградскому фронту мы уделяли мало внимания — все силы были брошены на восток, против Колчака. В июне мы получили возможность снять часть дивизий с Восточного фронта и двинуть их на помощь Питеру. Сейчас положение на Петроградском фронте, как вы знаете, несколько улучшилось. Теперь главная задача — разбить Деникина. На Южный фронт мы направляем преданнейших товарищей, лучшие наши силы. Скажите, товарищ Фабрициус, какие у вас планы, чем вы намерены сейчас заняться?

Фабрициус смутился, посмотрел на бледное, усталое лицо Председателя Совнаркома, попросил:

— Если можно, пошлите на Южный фронт… Желательно на строевую должность.

— Очень хорошо! — улыбнулся Владимир Ильич. — На командной должности вы принесете больше пользы. Однако не забывайте свою хорошую комиссарскую традицию: по-прежнему пишите о всех замеченных существенных недостатках и промахах. Пишите лично мне, так же прямо и честно, как делали, до сих пор. Желаю вам удачи, Железный Мартын. Так называл вас изумительный человек — Яков Михайлович Свердлов. Сейчас я позвоню Склянскому, чтобы он принял вас и незамедлительно направил на работу. Счастливого пути, — и Ленин крепко пожал руку Фабрициуса.

3 августа 1919 года Реввоенсовет Республики направил Я. Ф. Фабрициуса на Южный фронт.

В штабе фронта Фабрициус получил задание: немедленно выехать в город Елец, организовать на месте сводный отряд и любой ценой задержать продвижение рейдирующей конницы генерала Мамонтова.

Для борьбы с казачьим корпусом было брошено несколько дивизий Красной Армии. Пока подходили эти части, отряд Фабрициуса вел непрерывные ожесточенные бои с мамонтовцами.

После упорной, жестокой схватки отряд занял станции Измаилково и Казаки на линии Елец — Орел. В тот же день поступило распоряжение от командующего Внутренним фронтом Лашевича наступать через станцию Тербуны к станциям Латная и Курбатово и прикрыть Воронеж с запада. Шли под проливным дождем по разбитым, грязным дорогам и днем и ночью. 10 августа отряд выбил противника из Латной и Курбатова и двинулся к Воронежу.

11 августа дивизия генерала Постовского ворвалась в Воронеж. Это был последний успех рейдирующей конницы. На следующий день частями Красной Армии мамонтовцы были выбиты из города. Одним из первых вступил в Воронеж отряд Яна Фабрициуса.

Потеряв за время рейда около 5 тысяч всадников, Мамонтов, преследуемый по пятам частями Внутреннего фронта, переправился через Дон и 19 сентября в районе села Осадчего соединился с конным корпусом Шкуро, выступившим в рейд по тылам Красной Армии.

Не успел Фабрициус привести в боевой порядок отряд, измученный непрерывными схватками с врагами, как поступил новый приказ — выступить к Нижнедевицку и любой ценой задержать продвижение 3-го конного корпуса Шкуро. Совершив трудный стремительный переход, отряд подошел к Нижнедевицку.

Впереди, в Ясенках, должен был находиться 373-й стрелковый полк красных. Поэтому Фабрициус решил устроить короткую остановку, чтобы дать отдых бойцам, разработать план дальнейших действий. Однако только лишь Фабрициус у себя в штабе развернул карту, достал лупу и цветные карандаши, как у самого уха тонко запел телефон.

Фабрициус снял трубку.

— Слушаю!

— С вами говорит адъютант генерала Шкуро, — услышал он вызывающий басок. — Мы заняли Ясенки. Ваши силы нам известны. Нас впятеро больше. Сдавайтесь. Генерал Шкуро щадит храбрецов. Кто захочет перейти к нам — милости просим.

— Все?

— А что вам еще надо?..

— Слушайте вы, генеральский холуй! Красная Армия выступила на фронт для защиты крестьян и рабочих. С палачами нам не по пути. — И Фабрициус положил трубку.

…На рассвете шкуровцы, развернув знамена с изображением оскаленной волчьей пасти на черном бархате, под марш оркестра двинулись на Нижнедевицк. Двенадцать конных полков широкой дугой охватывали город.

В окопах, замаскированных дерном, залегли красноармейцы. На высотах распластались пулеметчики. Застыли у своих орудий артиллеристы. Все посматривали в сторону шоссейной дороги и ждали, когда высокий, широкоплечий, длинноусый командир подаст сигнал: огонь! А командир не торопился. Он стоял неподвижно и спокойно смотрел в бинокль на неудержимо несущихся всадников.

Неожиданно кони налетели на поставленное в высокой траве проволочное заграждение, стали спотыкаться, падать на землю, и безукоризненно четкие ряды шкуровцев расстроились.

— Молодцы саперы, — сказал Фабрициус. — Вот теперь пора…

Алая ракета взметнулась в голубое небо. И сразу же задрожали стволы пулеметов, гулко и широко разнеслись дружные залпы стрелков.

Волна шкуровцев откатилась назад.

— Прекратить огонь! — приказал Фабрициус и не торопясь провел тыльной стороной ладони по горячему лбу. Связных послал к командирам батальонов с приказом: «Стрелять экономно, беречь патроны».

Но как беречь патроны, если вновь гудит земля и глаза слепят сотни белых клинков над вспененными лошадиными мордами! Теперь терцы и кубанцы мчатся вперед рассыпанным, редким строем. Но поле открытое, а стрелки, пулеметчики, артиллеристы Фабрициуса ведут только прицельный огонь. Да, по всему видно, и у самих конников нет прежней удали.

…К вечеру сводный отряд отбил одиннадцатую атаку.

С левого фланга приполз раненый связной, прохрипел: «У нас кончились патроны», — и упал, густая кровь хлынула горлом.

Шкуровцы почувствовали, что на левом фланге красных ослабел огонь, и узким клином прорубили оборону.

Пришлось ввести в дело 1-й Симбирский полк красных коммунаров. Коротким, яростным ударом прорыв был ликвидирован.

Белые отошли в Ясенки…

После ликвидации рейда генерала Шкуро Яну Фабрициусу были вручены золотые часы — награда ВЦИКа за храбрость, мужество и высокое воинское мастерство.

Штаб Южного фронта выдвинул Фабрициуса на должность командира бригады в 16-ю стрелковую дивизию имени Киквидзе.

С этой легендарной дивизией Фабрициус прошел славный боевой путь: брал крупный железнодорожный узел — станцию Лихую, участвовал в неравных ожесточенных боях под станицей Ольгинской, очищал от врагов Таманский полуостров и громил белогвардейский десант под станцией Фанталовской.

В период разгрома деникинской армии 16-я дивизия была переброшена на Западный фронт, в район Полоцка.

…После ожесточенного боя 12 июля польские части оставили старые русские окопы времен первой мировой войны и отошли на заранее подготовленные позиции под Сморгонью.

Комбриг Фабрициус вместе с начальником штаба Ершовым провел тщательную рекогносцировку местности. Перед ними вдоль реки Оксна тянулась широкая полоса багровой, словно политой кровью, колючей проволоки.

— Старую Сморгонь американские и французские инженеры перестроили на свой лад. Создали новый Верден. И все-таки мы вышибем панов из железобетонных нор, — сказал Фабрициус и отнял бинокль от усталых глаз.

К Фабрициусу подбежал помощник начальника штаба по оперативной части Лебедев и протянул только что полученный приказ командующего XV армией Корка. В нем предлагалось с рассветом 13 июля продолжать наступление, выбить противника из бывших германских окопов и занять их.

Фабрициус отдал необходимые указания командирам частей и специальных подразделений о подготовке к наступлению. Стремясь раздобыть необходимые сведения о противнике, Фабрициус, лично допросил пленных, побеседовал с местными жителями — белорусами. Один из крестьян после некоторого раздумья сказал:

— Ты вот, начальник, всех про колючку допытываешь: где она, проклятая, гуще, где жиже. Так вот, намотай себе на усы, благо они у тебя длинные, от деревни Перевозы к паровой мельнице мы наездили дорогу, а проволоку растащили. Может, эти воротца тебе и пригодятся… Они еще их не залатали.

Наутро 143-й полк, используя проселочную, дорогу, указанную крестьянином, внезапным ударом вышиб белополяков с высоты 72,9, но удержать ее в своих руках не сумел. Противник бросил в обход высоты значительные силы пехоты и, открыв по красноармейцам, не успевшим окопаться, перекрестный огонь, заставил бойцов отступить в старые русские траншеи.

Многочисленные атаки 142-го и 144-го полков также не увенчались успехом. Трехдюймовые орудия не смогли разбить многорядный проволочный забор и толстостенные железобетонные огневые точки противника. Красноармейцы доходили до противопехотных препятствий и, встреченные фланговым и кинжальным пулеметным огнем, откатывались на исходные позиции.

Части соседней 47-й стрелковой бригады 16-й дивизии имени Киквидзе несколько раз поднимались в лобовые атаки, но, оставив у проволоки убитых и раненых, возвращались в окопы.

После долгого, пристального изучения местности Фабрициус решил обходным маневром занять лес у деревень Перелесье и Перевозы и оттуда вести дальнейшие боевые операции.

К вечеру 13 июля к реке Вилия. подошли части 54-й стрелковой дивизии и прикрыли правый фланг 48-й бригады.

С наступлением темноты Фабрициус отобрал группу из самых отважных и умелых бойцов и провел разведку. У деревни Перевозы в роще наткнулись на группу крестьян. Фабрициус побеседовал с ними и выяснил, что лес, как и передовые окопы у города, Сморгонь, заняты слабыми цепями пехоты. Очевидно, белополяки испугались артиллерийской подготовки и отошли в траншеи у деревень Свеляны, Корень, Минки и Лычинки. По проходам, сделанным крестьянами в проволочных заборах, Фабрициус с разведчиками пробрались в лес.

Комбриг разделил разведчиков на пары и приказал им проделать несколько проходов в проволочных заграждениях. Сам лег у пулемета, готовый прикрыть огнем боевых друзей.

…В три часа ночи Фабрициус взял первый батальон 143-го полка и повел его на штурм высоты 72,9. Красноармейцы безмолвно подошли и внезапно атаковали окопы противника. Заставы белополяков перекололи штыками!

Разведчики, приданные стрелковым подразделениям, провели бойцов по проходам в проволочных препятствиях в рощу. Рота противника, занимавшая окопы вдоль опушки леса, бежала. Части 144-го полка прижали белополяков к реке Оксна. В это время батальон 143-го полка из леса ударил во фланг и тыл противника.

Как только послышались возгласы «ура» и взрывы гранат на опушке леса, Фабрициус ввел в бой по заранее проделанным проходам батальон с высоты 72,9.

Белополяки не ожидали удара с трех сторон и в панике бросились назад по окопам и ходам сообщения. Красноармейцы, преследуя отступающих, прорвались за реку Оксна. Командир бригадной конной разведки серб Георгий Вукмирович ворвался в огромный бетонированный блиндаж и захватил 64 пленных во главе с командиром батальона.

Цепи частей вышли на линию дороги Сморгонь — Рыбаки. Противник открыл сильный огонь из дальнобойных орудий, но не учел продвижения атакующих: снаряды рвались далеко позади цепей. Контратакующая группа врага по приказанию Фабрициуса была рассеяна артиллерийским огнем.

Противник стал поспешно отходить по всему укрепленному району. В прорыв вошли части 33-й Кубанской и 54-й стрелковых дивизий устремились к Неману.

Неприступная Сморгонь пала! В этом ночном бою бригада Фабрициуса потеряла всего 9 человек убитыми. Противник же оставил в траншеях сотни убитых и раненых. Около 200 белополяков сдались в плен. Бойцы бригады захватили 10 пулеметов американских и французских систем.

Польское командование рассчитывало задержать на долгое время наступление частей XV красной армии на сильно укрепленной глубокой оборонительной полосе Сморгонь — Шиловичи — Молодечно. Отвага и воинское мастерство комбрига Фабрициуса и его бойцов, пробивших широкие ворота в стене противопехотных препятствий врага, сорвали замыслы белополяков.

Советская Родина отметила ратные подвиги своего верного сына Яна Фрицевича Фабрициуса вторым орденом Красного Знамени. Многие бойцы и командиры бригады были также удостоены высших боевых наград.

…Через месяц после прорыва под Сморгонью 48-я стрелковая бригада совместно с другими частями 16-й стрелковой дивизии имени Киквидзе вышла к местечку Ново-Място — к берегу реки Вкра. Позади остались города Белосток, Остров, Пултуск и сотни других населенных пунктов, освобожденных в тяжелых и ожесточенных сражениях. Бригада прошла с боями более 600 верст и выдвинулась на линию Варшавы. Каждый шаг вперед давался ценой огромных, нечеловеческих усилий. Не хватало снарядов, фуража, продовольствия, обмундирования. Где-то далеко позади остались дивизионные обозы, армейские и фронтовые склады.

Обескровленные, малочисленные части дивизии вынуждены были отступить от Варшавы. Отходить куда труднее, чем наступать. 48-й бригаде часто приходилось прикрывать отступление не только частей дивизии, но и всей XV армии. Так и 20 августа 1920 года начдив Медведовскин приказал комбригу-48 Фабрициусу:

«Командарм приказал во что бы то ни стало задержаться на этом берегу р. Нарева ввиду тяжелого положения армии. Приказываю вам с бригадой задержаться на линии Иержаново — Червонки, загнув свой левый фланг на Залунье, где находится правый фланг 46-й бригады…»

Фабрициус выполнил приказ. Бригада заняла круговую оборону и отбила бесчисленные атаки противника.

Конец августа, весь сентябрь и первую половину октября 48-я бригада, так же как и другие части прославленной дивизии имени Киквидзе, вела тяжелые оборонительные бои в Белоруссии. Только после заключения мирного договора с Польшей киквидзевцы были отведены на отдых.

Полки 48-й бригады, сохранившие полностью свою материальную часть, честно и самоотверженно служившие щитом отходящей XV армии, Революционным Военным Советом Республики были награждены почетными революционными Красными знаменами за отличия в боях с врагами социалистического Отечества.

За выдающуюся стойкость, мужество, воинское мастерство командир 48-й бригады Ян Фрицевич Фабрициус был награжден третьим орденом Красного Знамени.

Накануне заключения мира с Польшей Фабрициус в одном из сражений был контужен. К тому же непрерывные тяжелые бои, бессонные ночи и голодный паек расшатали здоровье, расстроили нервную систему комбрига. Врачебная комиссия направила Фабрициуса в госпиталь.

После лечения, в начале января 1921 года, Фабрициуса. назначают начальником и комиссаром 43-х Объединенных курсов командного состава Рабоче-Крестьянской Армии в городе Полоцке.

В конце февраля на полоцкой городской партийной конференции герой гражданской войны Ян Фрицевич Фабрициус был единодушно избран делегатом на X съезд РКП (б).

Фабрициус радовался и гордился высокой честью, выпавшей на его долю. Он думал, что на съезде, ему удастся поговорить с Владимиром Ильичем Лениным, побывать у военных друзей. Фабрициус, конечно, не предполагал, что придется срочно выехать на новый фронт. В Кронштадте вспыхнул контрреволюционный мятеж. И в самом начале съезда вождь партии В. И. Ленин предложил послать военных специалистов — делегатов съезда — на подавление кронштадтского мятежа. Фабрициус немедленно направил К. Е. Ворошилову заявление, в котором просил включить его и военного комиссара 51-й отдельной стрелковой бригады, боевого друга Яна Биезайса в список едущих в Петроград. Вместе с Ворошиловым, Бубновым, Кировым и многими другими делегатами съезда он выехал в Петроград.

По предложению военного комиссара южной группы войск К. Е. Ворошилова Ян Фабрициус был направлен командиром в 501-й Рогожский стрелковый полк. В штабе бригады Фабрициусу сообщили, что этот полк в пути совершенно разложился и «тает не по дням, а по часам».

Прибыв в штаб полка, Фабрициус побеседовал с временно исполнявшим обязанности командира полка Коршуновым и комиссаром Шатиловым, которые также разделяли мнение, что полк небоеспособен и участие его в предстоящей операции нежелательно.

— Соберите всех коммунистов, — сказал Фабрициус комиссару полка. — Не будем терять времени на разговоры. Надо готовить полк к штурму Кронштадта.

На партийном собрании Фабрициус записал все существенные замечания коммунистов, поблагодарил их за помощь и предложил немедленно обезоружить и арестовать всех замеченных в антисоветской агитации.

Небольшой отряд коммунистов, возглавляемый комиссаром Шатиловым, арестовал и отправил в особый отдел 16 антисоветских агитаторов.

В полдень полк собрался на митинг. Фабрициус зачитал правительственное сообщение о контрреволюционном мятеже в Кронштадте, обращение президиума X партсъезда к петроградским рабочим, подписанное В. И. Лениным, и призвал бойцов с честью выполнить свой долг перед Советской республикой.

Весь день командиры рот и батальонов проводили инструкционные занятия. В 7 часов вечера бойцы легли спать: нужно было отдохнуть перед тревожной штурмовой ночью.

По приказу командира бригады в 12 часов ночи полк был поднят командой «в ружье» и к 2 часам прибыл к месту сбора — в Ораниенбаум.

Только в 4 часа комбриг отдал приказ спуститься на лед, двигаться за 32-й стрелковой бригадой.

Фабрициус подошел к бойцам, громко сказал:

— Товарищи! Идем на штурм мятежной банды. Желаю всем вам доброй славы, боевых успехов, друзья! Вперед, на Кронштадт!

Завывая, над строем пронеслись снаряды. Тяжелые разрывы потрясли землю. Злое высокое пламя поднялось над спасательной станцией.

Фабрициус круто повернулся, твердо ступая по хрустящим лужицам, шагнул на лед. Шел, не оглядываясь, и засмеялся от радости, услышав за спиной гулкую поступь полка…

На льду воды не было, и это сразу же ободрило бойцов.

Шли молча, колонной. Не курили. Радовались туману: поможет скрытно подойти к Петроградским воротам.

Глаза постепенно привыкли к темноте. На льду четко выделялись полыньи, словно черные заплаты на белом холсте. Фабрициус посмотрел на компас, затем на светящиеся стрелки часов и сказал начальнику штаба:

— Медленно идем. Передайте по цепи: шире шаг.

Ответа начальника штаба командир полка не расслышал. С левой стороны на льду неожиданно вспыхнуло пламя взрыва и высоко взметнуло тяжелый столб льда и воды. Взрывная волна хлестнула по ногам.

На участке 499-го полка, наступавшего слева, разорвалось еще несколько снарядов. Фабрициус понял: соседний полк накрыт огнем линейных кораблей «Петропавловск» и «Севастополь».

В наступившей короткой тишине услышал тревожный шум — это бежали назад красноармейцы 499-го полка. Фабрициус до боли стиснул зубы. Вот сейчас волна охваченных страхом людей ударит по цепи его полка и увлечет за собой. Надо как-то задержать бегущих. И Фабрициус нашел выход. Твердо и громко он скомандовал:

— Ложись!

— Ложись! Ложись! — пронеслось по цепи, и люди стали опускаться на лед.

— Ложись! Ложись!

Бегущий 499-й Лефортовский полк как бы споткнулся о цепь 501-го Рогожского.

Фабрициус обошел полк, приказал командирам рот:

— Передайте всем: вперед, из огня только вперед. Броском вперед, слышите? Бегущие назад погибнут. Возглас «ура» — сигнал атаки. Дружно поднимайте людей. Прицела на нас навести не успеют.

Широкий желтый луч прожектора опустился на залив и рассек темноту. Фабрициус различил за цепью лежавших красноармейцев знакомую серую папаху Климента Ефремовича Ворошилова. Он шел спокойно и уверенно, словно не по ломающемуся от разрывов снарядов льду, а по ровной шоссейной дороге. В руках у него был карабин. Рядом с Ворошиловым переваливался с ноги на ногу высокий и грузный Затонский.

И сразу стало легче дышать, пропала усталость, и, набрав полные легкие воздуха, Фабрициус громко, нараспев прокричал:

— Вперед, товарищи, ур-а-а!

Возглас «ура» подхватили тысячи голосов, и нарастающий широкий могучий гул заглушил грохот тяжелых орудий.

Красноармейцы видели в оранжевом слепящем свете прожектора высокого человека в черной бурке. Он бежал, не сгибаясь и не оглядываясь. Верил, что они последуют за ним. Вместе с 501-м Рогожским полком поддержали знаменитый русский клич победы, неудержимое, грозное, ликующее «ура» бойцы 499-го Лефортовского полка.

Снаряды дробят лед позади атакующих, осыпают ледовым крошевом. Пули летят густым роем, но выше цепи бойцов.

«Видно, с испугу забыли переставить прицелы», — подумал Фабрициус, перепрыгивая широкую полынью. С трудом удержался на скользкой кромке и, почувствовав боль в правой ноге, вспомнил, что уже вторую неделю не массажировал ее синеватые рубцы. А может быть, это не раны ноют, а ревматизм, старый таежный ревматизм дает о себе знать. «Не вовремя, вот не вовремя», — подумал Фабрициус, припадая на левую ногу.

Стрелковая цепь, как волна, ударилась о берег и отхлынула назад. Из трехэтажного длинного дома пристани по атакующим хлестнули станковые пулеметы.

«Пушечку бы сейчас иметь, хотя бы одну трехдюймовку», — подумал Фабрициус и передал лежавшему рядом с ним красноармейцу:

— Коммунисты, к командиру полка!

Подползло шесть человек. Он отобрал четырех старых солдат. Сказал лаконично:

— Надо захватить пушку и разбить пулеметы.

И пополз, раздирая о мерзлые камни колени и локти, к сараям, стоявшим на берегу. И он не ошибся. За сараем чернел ствол. На месте наводчика стоял высокий детина и, кого-то подзывая, говорил:

— Да нет здесь красных. Драпанули в Ораниенбаум.

Фабрициус молча взял из рук бойца винтовку и спокойно, как на стрельбище, первой же пулей свалил наводчика. Торопливо загнал второй патрон, но красноармеец сказал:

— Удрали, товарищ командир. Ну и лихо же вы бьете из винтовки! А кто у нас из пушки будет стрелять? Артиллеристов-то не захватили.

— Ничего, — улыбнулся Фабрициус, — я сам артиллерист.

Пушку повернули к дому. Фабрициус навел ствол на мерцающий алый огонек в черном зеве рамы. Первый снаряд врезался в стену. Второй снаряд — в окно. Пулемет заглох. Погасив огонь еще двух пулеметов, сказал устало:

— Пушку катите следом. Снаряды собрать, все до одного. Пригодятся! — и побежал на пристань, к полку.

К вечеру зажатых в кольцо мятежников оттеснили на корабли. Фабрициус взглянул на небо. Какая широкая, какая яркая заря сегодня, словно огромный алый флаг поднят над дымящимся Кронштадтом!

…В 2 часа ночи 18 марта стрельба прекратилась.

501-й Рогожский стрелковый полк, в большинстве своем укомплектованный из бывших дезертиров и считавшийся небоеспособной частью, в штурме Кронштадта завоевал добрую ратную славу. Благодаря умелому руководству временного командира полка потери были незначительными. По ходатайству Фабрициуса заместитель командира полка А. Н. Коршунов, комиссар Н. Н. Шатилов, командир 2-го батальона М. Ф. Кузьмович и 14 бойцов-героев были награждены орденами Красного Знамени. Многие бойцы были отмечены ВЦИКом ценными подарками.

Командование 167-й стрелковой бригады, представляя временного командира 501-го Рогожского полка Яна Фрицевича Фабрициуса к награде, отмечало:

«Товарищ Фабрициус 17 марта 1921 года в бою под Кронштадтом личным примером храбрости и неустрашимости несколько раз приводил в порядок расстроенные неприятельским огнем цепи и бросался вперед с криком «ура», пока не ворвался в крепость. Несмотря на отчаянное сопротивление мятежников, продолжал продвигаться вперед, увлекая своим примером мужества красноармейцев».

…Сдав полк вновь назначенному командиру, Фабрициус вместе с другими делегатами съезда выехал в Москву.

24 марта 1921 года Я. Ф. Фабрициусу была вручена грамота Реввоенсовета Республики о награждении орденом Красного Знамени. Старый коммунист

Ян Фрицевич Фабрициус стал первым кавалером четырех орденов Красного Знамени в Советской Армии, первым Почетным краснознаменцем.

…В годы мирного строительства Ян Фабрициус работал на ответственных должностях командира дивизии и корпуса. В мае 1928 года Я. Ф. Фабрициуса назначили помощником командующего Кавказской Краснознаменной армией. Опытный полководец-большевик, Фабрициус провел огромную работу по повышению боеспособности и дисциплины в национальных формированиях армии.

Ян Фабрициус был членом ВЦИКа СССР нескольких созывов. Начиная с X партийного съезда, Фабрициус — делегат всех последующих съездов партии. На XV партийном съезде старый большевик Ян Фрицевич Фабрициус был избран членом Центральной Контрольной Комиссии ВКП(б). Стойко и мужественно проводя указания ЦК, председатель комиссии по чистке партии в Закавказье Ян Фрицевич Фабрициус беспощадно разоблачал и изгонял из рядов партии изменников и предателей.

Фабрициус считал своим первейшим долгом воспитывать бойцов в духе беспредельной преданности великому делу Коммунистической партии. В приказе № 24 от 22 февраля 1928 года он писал:

«…Без партии, железной и закаленной в боях с царизмом и буржуазией, ‘без партии, тесно связанной с массами, создать классовую армию пролетариата было бы невозможно.

Несокрушимая классовая сплоченность, политическая стойкость и военно-техническая выучка Красной Армии есть результат руководства партии, влияния и повседневного участия и укрепления партийнополитических организаций Красной Армии».

Приказ заканчивается призывом: «Дело обороноспособности нашей страны сделаем достоянием всех трудящихся масс СССР. Еще больше сплотимся вокруг испытанного вождя ВКП (б) — партии Ленина.

В случае, если нам навяжут войну, Красная Армия вместе с трудящимися массами, сплоченными вокруг Коммунистической партии и советской власти, даст такой могучий отпор, который потрясет основы всего капиталистического мира».

Слова эти звучат и сейчас пламенным призывом к советским людям, больше всего на свете любящим мать Родину.

Фабрициус погиб на боевом посту в возрасте 52 лет. 24 августа 1929 года самолет, на котором он летел из Сочи в Тифлис, упал в море. На следующий день в газетах появилось обрамленное траурной рамкой сообщение:

«ЦК и ЦКК ВКП (б) извещают о безвременной трагической смерти члена ЦКК ВКП (б) тов. Я. Ф. Фабрициуса, одного из старейших и преданных делу рабочего класса коммунистов, героя гражданской войны».

Имя Яна Фабрициуса бессмертно. В траурные дни трудящиеся Советского Союза провели сбор средств на постройку эскадрильи самолетов имени Яна Фабрициуса. Его именем названы улицы, колхозы, пароходы, заводы. Постановлением Реввоенсовета СССР 96-я стрелковая дивизия стала носить имя Фабрициуса.

Сбылись светлые мечты Яна Фабрициуса! Его родина Латвия стала свободной советской социалистической республикой. Земля, на которой когда-то батрачил его отец, принадлежит колхозу имени Фабрициуса. На одной из главных улиц Вентспилса, тоже названной именем славного героя гражданской войны, возвышается величественный памятник. В походной шинели, буденовке, тяжелых солдатских сапогах стоит и смотрит на ровное Балтийское море Ян Фабрициус. Бессмертным полководцем вернулся он на родину и стал на страже границы…

Ян Фабрициус – ТН (НТ, ТР) type, 866 design — FleetPhoto

Information about the vessel is given on the basis of publicly available sources and observations of users of this site. Site Administration has no associations with these sources and not responsible for this data. The information here may be invalid or outdated.

DateRegistryPortOwnerManager

01.2001

РСУ  KhersonUkrRechFlot 

12.1992

 

11.1989

РР УССР  KhersonМежотраслевое государственное объединение УкрречфлотГлавное управление речного флота при Совете министров УССР - Херсонский речной порт

1988

Главречфлот
 Главное управление речного флота при Совете Министров УССР


Река Кошевая
Херсонская область, Херсон
Херсонский ССРЗ им. Коминтерна

June 3, 2013
Author: ПТУ-3 г.Херсон

2013

2012

БП-29  ·  775, 775А (баржа) design, Kherson
ПЛК-1  ·  ПЛК-1 type, Kherson
КПЛ-65  ·  КПЛ-5-30 type, 528А/К23, 528А1/К23, 528Б1/К23, 528Р/К23 design, Kherson

Река Кошевая
Херсонская область, Херсон

June 20, 2012
Author: ПТУ-3 г.Херсон

2012

2011

Река Кошевая
Херсонская область, Херсон
Херсонский ССРЗ им. Коминтерна

June 13, 2011
Received from moreman1313


No photos during this period

No photos during this period

No photos during this period

Pictures displayed: 4 from 4

Please do not discuss political topics or you will be banned for 1 month!

You need to log in to write comments.

Ян Фабрициус – краснознаменный каратель

Год издания: 1963

Страна: СССР

Сын латышского батрака Ян Фабрициус занялся подпольной революционной деятельностью еще до окончания гимназии. В 1904 году он сначала загремел на четыре года в каторжную тюрьму, а затем был выслан в холодную Якутию и на Сахалин. Дальний Восток показался ссыльному революционеру настолько негостеприимным, что в конце 1915 года он написал прошение отправить его в действующую армию. Ходатайство было одобрено, и в 1916 году Ян оказался в окопах Северного фронта. Воевал он хорошо, несмотря на экстремистское прошлое, дослужился до штабс-капитана.

Ян Фабрициус. (wikipedia.org)

Вскоре после Октябрьского переворота Фабрициус уже заседал в Петрограде в чине члена ВЦИК, затем начал быстро продвигаться по военной линии. Правда, отряды, которыми он командовал, были в основном карательными: они расстреливали заложников и недовольных новой властью, а также пулемётным огнём преграждали путь отступавшим под напором немцев красным частям. За эти подвиги Фабрициус в 1919 году был награжден только что учрежденным орденом Красного Знамени под № 4. Документов об этом награждении не сохранилось, и злые языки в Красной армии поговаривали, что присвоение ордена состоялось уже в двадцатых годах задним числом благодаря латышскому лобби в руководстве РККА. Зато еще три таких же ордена вопросов не вызывают: Фабрициус получил два из них за участие в провальной польской кампании, а ещё один — за беспощадное подавление кронштадтского мятежа.

После гражданской войны комкор Фабрициус командовал крупными воинскими соединениями. 24 августа 1929 года помощник командующего Кавказской армией Фабрициус, чтобы поразить свою подругу, сел с ней в самолёт и приказал пилоту пройти бреющим полётом над Сочи. Невдалеке от пляжа самолет воткнулся в воду. Объявили, что герой гражданской войны погиб в авиакатастрофе, подстроенной троцкистами, спасая своих спутников.

Как водится, в честь героя назвали десятки улиц и установили ему три памятника — в Латвии, Гдове и Сочи. Все три монумента хоть и сохранились до наших дней, но не полностью: периодически каждому из них кто-то отбивает геройские усы, прославившие Яна Фабрициуса.

(PDF) Эксперименты на клеточных культурах показывают, что высокие уровни S100B и кластерина могут передавать толерантность к гипоксии для мозга тюленя с капюшоном (Cystophora cristata)

Lee H, Hammond D, Large T, Roback J, Sim J, Brown D, Otten U ,

Wainer B (1990) Нейронные свойства и трофическая активность

иммортализованных клеток гиппокампа от эмбриональных и молодых взрослых мышей

. J Neurosci 10: 1779–1787.

Лесков К.С., Араки С., Лавик Дж. П., Гомес Дж. А., Гама В., Гонос Е. С.,

Тругакос И. П., Мацуяма С., Бутман Д. А. (2011) CRM1

Опосредованная белком регуляция ядерного кластерина (nCLU),

стимулированный ионизирующим излучением, Bax-зависимый фактор смерти.J

Biol Chem 286: 40083–40090.

Лесков К.С., Клоков Д.Ю., Ли Дж., Кинселла Т.Дж., Бутман Д.А. (2003)

Синтез и функциональные анализы ядерного кластерина, белка смерти клетки

. J Biol Chem 278: 11590–11600.

Людвин С., Косек Дж., Энг Л. (1976) Топографическое распределение белков S-

100 и GFA в мозге взрослых крыс: иммуногистохимическое исследование

с использованием антител, меченных пероксидазой хрена-

. Журнал сравнительной неврологии

165: 197–207.

Lutz PL, Nilsson GE, Prentice HM (2003) Мозг без кислорода:

причины отказов - физиологические и молекулярные механизмы выживания

. Springer Science & Business Media.

Marenholz I, Heizmann CW, Fritz G (2004) Белки S100 у мышей

и человека: от эволюции к функции и патологии (включая обновление номенклатуры

). Biochem Biophys Res Commun

322: 1111–1122.

Meir JU, Champagne CD, Costa DP, Williams CL, Ponganis PJ

(2009) Крайняя толерантность к гипоксемии и истощение запасов кислорода в крови

у ныряющих морских слонов.Американский журнал физиологии -

Регуляторная, интегративная и сравнительная физиология 297:

R927 – R939.

Meyer M, Schreck R, Baeuerle PA (1993) h3O2 и антиоксиданты

оказывают противоположное влияние на активацию NF-каппа B и AP-1 в

интактных клетках

: AP-1 как вторичный антиоксидант-чувствительный фактор. Журнал

EMBO 12: 2005–2015.

Michetti F, Dambrosi N, Toesca A, Puglisi MA, Serrano A, Marchese

E, Corvino V, Geloso MC (2019) История S100B: от

биомаркера

до активного фактора нервного повреждения.Дж. Neurochem

148: 168–187.

Mitz S, Reuss S, Folkow L, Blix A, Ramirez J-M, Hankeln T,

Burmester T (2009) Когда мозг погружается в воду: глиальный окислительный

метаболизм может придать головному мозгу тюленя толерантность к гипоксии.

Неврология 163: 552–560.

Mothet J-P, Pollegioni L, Ouanounou G, Martineau M, Fossier P,

Baux G (2005) Активация глутаматного рецептора запускает кальций-

-зависимый и зависимый от белка SNARE высвобождение глиотрансмиттера D-серина

.Proc Natl Acad Sci 102: 5606–5611.

Murrell B, Weaver S, Smith MD, Wertheim JO, Murrell S, Aylward A,

Eren K, Pollner T, Martin DP, Smith DM (2015) Общегеновая

идентификация эпизодического отбора. Mol Biol Evol 32: 1365–1371.

Noah JW, Severson W., Noah DL, Rasmussen L, White EL, Jonsson

CB (2007) Клеточный люминесцентный анализ эффективен для высокопроизводительного скрининга потенциальных противовирусных препаратов против гриппа. Противовирусный

Res 73: 50–59.

Ниландер Дж. (2013) Catfasta2phyml. Программа распространяется

автором: Центр эволюционной биологии, Университет Упсалы,

Упсала, Швеция. https://github.com/nylander/catfasta2phyml.

Огуншола О., Антониу X (2009) Вклад гипоксии в болезнь Альцгеймера

: является ли HIF-1aa медиатором нейродегенерации

? Cell Mol Life Sci 66: 3555–3563.

Park S, Mathis K, Lee I (2014) Физиологические роли

аполипопротеина J / кластерина в метаболических и сердечно-сосудистых

заболеваниях.Обзоры в журнале Endocrine and Metabolic Disorders

15: 45–53.

Pasinetti GM, Johnson SA, Oda T, Rozovsky I, Finch CE (1994)

Кластерин (SGP-2): многофункциональный гликопротеин с региональной экспрессией

в астроцитах и ​​нейронах головного мозга взрослых крыс.

Журнал сравнительной неврологии 339: 387–400.

Pond SLK, Frost SD (2005) Datamonkey: быстрое обнаружение выборочного давления

на отдельные участки выравнивания кодонов. Биоинформатика

21: 2531–2533.

Poon S, Treweek TM, Wilson MR, Easterbrook-Smith SB, Carver JA

(2002) Кластерин представляет собой внеклеточный шаперон, который, в частности,

взаимодействует с медленно агрегирующимися белками на их складывающемся пути

. FEBS Lett 513: 259–266.

Qvist J, Hill RD, Schneider RC, Falke KJ, Liggins GC, Guppy M, Elliot

RL, Hochachka PW, Zapol WM (1986) Концентрации гемоглобина

и напряжения газов крови у свободно ныряющих тюленей Уэдделла

.J Appl Physiol 61: 1560–1569.

Reali C, Scintu F, Pillai R, Donato R, Michetti F, Sogos V (2005)

S100b противодействует воздействию нейротоксиканта триметилтина на

астроцитов и микроглии. J Neurosci Res 81: 677–686.

Reddy KB, Jin G, Karode MC, Harmony JA, Howe PH (1996)

Ядерная локализация, индуцированная трансформирующим фактором роста b (TGFb)

аполипопротеина J / кластерина в эпителиальных клетках. Биохимия

35: 6157–6163.

Rickmann M, Wol ff J (1995) Экспрессия белка S100 в субпопуляциях

нейронов головного мозга крысы.Неврология 67: 977–991.

Розенберг М.Е., Силкенсен Дж. (1995) Кластерин: физиологические и

патофизиологические соображения. Международный журнал

биохимии и клеточной биологии 27: 633–645.

Sarang SS, Yoshida T, Cadet R, Valeras AS, Jensen RV, Gullans SR

(2002) Открытие молекулярных механизмов нейрозащиты

с использованием клеточных биотестов и массивов олигонуклеотидов. Physiol

Genomics 11: 45–52.

Schneuer M, Flachsbarth S, Czech-Damal N, Folkow L, Siebert U,

Burmester T (2012) Нейроглобин тюленей и китов: свидетельства

в пользу дивергентной роли в головном мозге ныряльщиков.Неврология 223: 35–44.

R Core Team 2013 R: язык и среда для статистических вычислений

. Вена, Австрия: R Foundation for Statistical

Computing.

Trougakos IP (2013) Молекулярный шаперон аполипопротеин

J / кластерин как сенсор окислительного стресса: значение

терапевтических подходов - мини-обзор. Геронтология 59: 514–523.

Trougakos IP, Gonos ES (2009) Окислительный стресс в злокачественном прогрессировании

: роль кластерина, чувствительного клеточного биосенсора

свободных радикалов.Adv Cancer Res 104: 171–210.

Vacquie-Garcia J, Lydersen C, Biuw M, Haug T., Fedak MA, Kovacs

KM (2017) Районы кормления тюленя Cystophora cristata в северо-восточной части Атлантического океана

- Исследовано с использованием трех дополнительных методов

. PLoS ONE 12 e0187889.

Van Beek J, Chan P, Bernaudin M, Petit E, MacKenzie ET, Fontaine

M (2000) Глиальные реакции, кластерин и комплемент в

перманентной фокальной церебральной ишемии у мышей.Глия 31: 39–50.

Va

´zquez-Medina JP, Zenteno-Savı

´n T, Tift MS, Forman HJ, Crocker

DE, Ortiz RM (2011) Апноэ стимулирует адаптивную реакцию на окислительный стресс

у детенышей морского слона . J Exp Biol 214: 4193–4200.

Viard I, Wehrli P, Jornot L, Bullani R, Vechietti JL, French LE,

Schi erli JA, Tschopp J (1999) Экспрессия гена кластерина

опосредует устойчивость к апоптотической гибели клеток, вызванной жарой

шок и окислительный стресс .J Invest Dermatol 112: 290–296.

Vives V, Alonso G, Solal AC, Joubert D, Legraverend C (2003)

Визуализация S100B-положительных нейронов и глии в центральной нервной системе

EGFP трансгенных мышей. J Compar Neurol

457: 404–419.

Ван Х., Джозеф Дж. А. (1999) Количественная оценка клеточного окислительного стресса с помощью анализа дихлорфлуоресцеина

с использованием микропланшетного ридера. Свободные радикалы

Biol Med 27: 612–616.

Wicher GK, Aldskogius H (2005) Взрослые мотонейроны демонстрируют

повышенной восприимчивости к смерти, вызванной аксотомией, у мышей

, лишенных кластерина.Eur J Neurosci 21: 2024–2028.

Wiggins AK, Shen PJ, Gundlach AL (2003) Отложенное, но продолжительное

увеличение экспрессии мРНК астроцитарного кластерина (ApoJ)

после острой корковой распространяющейся депрессии у крыс:

доказательств роли кластерина в ишемической толерантности . Mol Brain

Res 114: 20–30.

Wong P, Pineault J, Lakins J, Taillefer D, Leger J, Wang C,

Tenniswood M (1993) Геномная организация и экспрессия

крысиного гена TRPM-2 (кластерина), гена, участвующего в апоптозе.J

Biol Chem 268: 5021-5031.

238 C. Geßner et al. / Neuroscience 451 (2020) 226–239

Дебра Фабрициус жертвует 75 долларов комитету кампании президента Трампа с июля по декабрь

. По данным Федеральной избирательной комиссии (FEC), Дебра Фабрициус пожертвовала 75 долларов Дональду Трампу с июля по декабрь.

Можно делать пожертвования политическим кандидатам в различных размерах. FEC регулирует эти пожертвования, и отдельные группы, за исключением PAC, должны раскрывать информацию о пожертвованиях на сумму более 250 долларов в год.

В следующей таблице перечислены 100 самых крупных пожертвований, сделанных на кампанию Дональда Трампа в 2019 году.

09 McLaren -07-21 -08 19 Младший 9030le Александр 58 14 400 долл. США 9030 5 2019-09-29
Рейтинг Дата Сумма Участник
1 2019-12-17
Ченг Гао
2 2019-07-01 $ 33,600 Джерри Дауд
3 2019-07-01 $ 25,200 9030 07-19 25 200 долл. США Кейт Томпсон
3 2019-08-01 25 200 долл. США Сьюзан Э.Йорк
3 2019-08-07 $ 25,200 Роберт Мэйхолл
3 2019-08-08 $ 25,200 Синди Герхарт 3
25 200 долл. США Эдвард Рэчинс
3 2019-08-09 25 200 долл. США Raymon A. York VI
3 2019-08-20
3 2019-09-18 $ 25,200 Натан Линн
3 2019-09-25 $ 25,200 Джо Крейл
3 $ 25 200 Дебора Рот
14 2019-09-24 $ 22 400 Дэниел МакКларан
15 2019-09-27 903 600 9030 05 Шон Салливан
16 2019-08-02 $ 20,600 Ричард М.Бейкер III
16 2019-08-06 $ 20,600 Дэвид Л. Бейтс
18 2019-07-01 $ 19,200 Том Уоллес 19 $ 16,800 Кевин Ван Экерен
19 2019-07-25 $ 16,800 Эндрю З. Шарф
19 2019-07-28 168305 Мэрилин Федак
19 2019-07-28 $ 16,800 Майкл Федак
19 2019-07-29 $ 16,800 Джонатан Тратт 19305 -31 16800 долл. США Майкл Дж.Батлер
19 2019-08-10 $ 16,800 Тони Йи
19 2019-08-20 $ 16,800 Питер Хесс
19305 31 $ 16,800 Thomas Geraghty
19 2019-09-11 $ 16,800 Neil Felver
19 2019-09-15 16,800 2019-10-02 $ 16,800 Дженнифер К.Буковски
19 2019-10-30 $ 16,800 Дэниел Г. Девос
19 2019-10-30 $ 16,800 Дуглас Л. 2019-10-30 $ 16,800 Мария Девос
19 2019-10-30 $ 16,800 Pamella Devos
19 2019-10-30 90 16,800
19 2019-10-30 16800 долл. США Сюзанна К. Девос
19 2019-10-31 16800 долл. США Барксдейл Хортенстайн -11 $ 16,800 Грег Томас
19 2019-11-14 $ 16,800 Бенджамин Перкинс
19 2019-11-18 $ 16,800 Уильям С.Оглесби
19 2019-11-26 $ 16,800 Джеймс Хау
19 2019-12-02 $ 16,800 Джерри Лентц 1990-1290 06 $ 16,800 Норман Ленц
19 2019-12-15 $ 16,800 Дэн Муди III
19 2019-12-18
19 2019-12-19 $ 16,800 Александр Гольдштейн
19 2019-12-19 $ 16,800 Эд Свадиш
19 168305-2019-2019 Кэролайн Грейс
19 2019-12-20 $ 16,800 Оливер Грейс
19 31.12.2019 16800 долл. США Брайан Дж.Sims
51 2019-08-08 $ 16,500 Майкл Харви
51 2019-09-12 $ 16,500 Роберт Вудингс 53-09 02 06 $ 15,600 Карлос Рейносо
53 2019-09-17 $ 15,600 Джонатан П. Ровира-младший
53 15,69 2019-10-29
53 2019-11-29 $ 15,600 Томас Мигель
53 2019-12-19 $ 15,600 Майкл Джек Уикс
07 $ 15,156 Билл Хэдли
59 2019-07-25 $ 15,000 Рональд Х.Блум
60 2019-09-28 $ 14,475 Аарон Петерсон
61 2019-07-31 $ 14,400 Даун Таффурелли 16 14400 долларов Кэтрин Шнайдер
61 2019-11-26 14400 долларов Джозеф С. Депапе
61 2019-12-11
Хорошо
61 2019-12-18 $ 14,400 Эдвард Воган
61 2019-12-19 $ 14,400 Джозеф Уэлен
61 Нельда Яу Бакман
68 2019-08-06 14100 долл. США Седрик Риз
69 2019-09-24 $ 13,800 Тереза ​​Фелан
70 2019-08-06 $ 13,650 Мишель Дэвис
71 2019-09-28 90igott2 Вирджиния 2019-07-18 $ 12,600 Деннис Маллинс
72 2019-09-18 $ 12,600 Бетти Дж.Lingle
74 2019-12-23 $ 11,500 Cheng Gao
75 2019-07-11 $ 11,400 Филип Скробарчик 2019 17 $ 11400 Меган Джордан
77 2019-09-26 $ 11,361 Аллан Вольповиц
78 2019-08-19 78 2019-09-14 $ 11,200 Jz Knight
78 2019-10-01 $ 11,200 Allen W.Паттон
78 2019-10-01 $ 11,200 Принц Зан
78 2019-10-06 $ 11,200 Уильям Марш
15 $ 11 200 Дэвид М. Савиц
78 2019-10-15 $ 11 200 Нараяна Белламконда
78 2019-12-19 9030,26
78 2019-12-19 $ 11,200 Марк Квятковски
78 2019-12-19 $ 11,200 Стивен Паркер
78306
$ 11 200 Лолиза Коллинз
78 2019-12-26 $ 11200 Адриан Оверстрит
78 2019-12-30 903 06 11 200 долл. США Сьюзан Бриджес
78 2019-12-31 11 200 долл. США Ray Barrette
78 2019-12-31 9029 9030 2019-09-26 $ 11100 Эйприл Уоррен
94 2019-09-28 $ 11,097 Марк Майнарс
95 Шэрон Крейл
95 2019-10-31 $ 11,000 Сэм Рашид
95 2019-12-03 $ 11,000 Дуглас Поттер -18 11000 долларов США Майкл Фрайлингер
95 2019-12-30 11000 долларов США Шон Гофф
100 $ 10,650 Роберт Робинсон
Анализ транскриптома

определяет ключевые метаболические изменения в мозге тюленя с капюшоном (Cystophora cristata) в ответ на гипоксию и реоксигенацию

Abstract

Мозг ныряющих млекопитающих лучше переносит условия с низким содержанием кислорода, чем мозг большинства наземных млекопитающих.Ранее было продемонстрировано, что нейроны в срезах мозга тюленя с капюшоном ( Cystophora cristata ) выдерживают гипоксию дольше, чем нейроны мыши, а также переносят пониженное поступление глюкозы и высокие концентрации лактата. Эта толерантность, по-видимому, сопровождается сдвигом в метаболизме окислительной энергии к астроцитам в тюленях, тогда как у наземных млекопитающих производство аэробной энергии в основном происходит в нейронах. Здесь мы использовали RNA-Seq для сравнения эффекта гипоксии и реоксигенации in vitro на срезах мозга из зрительной коры тюленей с капюшоном.Мы не наблюдали общего снижения экспрессии генов, что позволяет предположить, что реакция на гипоксию и реоксигенацию является активно регулируемым процессом. Лечение вызывало преимущественную активацию генов, связанных с воспалением, как было обнаружено до и . г . в исследованиях инсульта на моделях млекопитающих. Онтология генов и анализ пути KEGG показали подавление генов, участвующих в транспорте ионов и других нейрональных процессах, что указывает на отключение нейронов в ответ на нехватку поступления O 2 .Эти различия можно интерпретировать с точки зрения стратегии энергосбережения в мозгу тюленя. Мы специально проанализировали регуляцию генов, участвующих в энергетическом обмене. Гипоксия и реоксигенация вызывали аналогичный ответ с активацией генов, участвующих в метаболизме глюкозы, и подавлением компонентов комплекса пируватдегидрогеназы. Мы также наблюдали повышенную регуляцию транспортера монокарбоксилата Mct4, что свидетельствует об увеличении оттока лактата. Вместе эти данные показывают, что мозг тюленя реагирует на гипоксическую нагрузку относительным увеличением анаэробного энергетического метаболизма.

Образец цитирования: Hoff MLM, Fabrizius A, Czech-Damal NU, Folkow LP, Burmester T (2017) Анализ транскриптома определяет ключевые метаболические изменения в мозге тюленя с капюшоном ( Cystophora cristata ) в ответ на гипоксию и реоксигенацию. PLoS ONE 12 (1): e0169366. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366

Редактор: Винченцо Лионетти, Scuola Superiore Sant'Anna, ИТАЛИЯ

Поступила: 16 июня 2016 г .; Принято: 15 декабря 2016 г .; Опубликовано: 3 января 2017 г.

Авторские права: © 2017 Hoff et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Необработанные файлы Illumina доступны в базе данных NCBI SRA под номерами доступа от SRX1567547 до SRX1567555 (Bioproject PRJNA278355). Все остальные соответствующие данные находятся в документе и его файлах с вспомогательной информацией.

Финансирование: Это исследование было поддержано Deutsche Forschungsgemeinschaft (Bu956 / 12). MLMH поддерживается стипендиями для докторов философии. Немецкой службой академических обменов (DAAD) и Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Бразилия (5125 / 11-1). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Из-за энергоемких нейронных процессов мозг млекопитающих потребляет большую часть вдыхаемого кислорода. Его сильная кислородная зависимость делает этот орган особенно чувствительным к гипоксии. У людей и большинства других млекопитающих снижение поступления кислорода серьезно ухудшает функцию мозга, а продолжительная гипоксия обычно вызывает необратимые повреждения мозга, например, после ишемического инсульта, но также и при других заболеваниях нейронов [1–6].Нейроны особенно чувствительны к нехватке кислорода из-за их зависимости от непрерывного производства метаболической энергии. Снижение уровня АТФ в конечном итоге вызывает деполяризацию клетки и высвобождение возбуждающих нейромедиаторов, которые усиливают приток Ca 2+ , опосредованный рецептором NMDA [1, 7]. Повышенный уровень Ca 2+ в клетках вызывает среди прочего процессы, ведущие к запрограммированной гибели клеток, и усиливает воспалительную реакцию, в конечном итоге вызывая необратимое повреждение мозга.Когда поступление кислорода восстанавливается, дополнительное повреждение головного мозга вызывается усиленным образованием вредных активных форм кислорода (АФК) [8].

В то время как мозг наземных млекопитающих обычно очень восприимчив к гипоксии и реоксигенации, мозг ныряющих млекопитающих ( i . e . Киты и тюлени) выживает даже в длительные периоды гипоксии без заметных повреждений [5, 9–12]. Хотя приток крови к тканям, чувствительным к гипоксии, таким как мозг, по существу сохраняется во время погружений [13, 14], парциальное давление кислорода в крови резко падает [9, 13, 15, 16] до такой степени, что может привести к потере крови. сознания у человека [17].Парадоксально, но многие ныряющие млекопитающие - активные охотники, которым требуется активный мозг при низких условиях O 2 . У тюленей и китов развились разнообразные поведенческие, анатомические и физиологические адаптации, которые поддерживают мозг, чтобы пережить многократные погружения с задержкой дыхания без заметных повреждений [5, 10–12, 18–22].

Тем не менее, мало что известно о молекулярных механизмах, которые способствуют адаптации мозга к дайвингу. Наиболее изученным примером является тюлень с капюшоном ( Cystophora cristata ), который демонстрирует замечательную способность нырять: их максимальная продолжительность погружения приближается к 1 часу, а максимальная глубина превышает 1000 м [23]. Электрофизиологические исследования in vitro с использованием срезов головного мозга тюленей с капюшонами продемонстрировали, что их нейроны оставались гораздо более активными при тяжелой гипоксии, чем нейроны мышей, в том смысле, что они сохранялись до 1 часа, в то время как нейроны мыши гибли через несколько минут [24, 25] . Кроме того, исследования in vitro показали, что нейроны головного мозга тюленя с капюшоном также более толерантны к низким уровням глюкозы и высокому уровню лактата как в условиях нормоксии, так и в условиях гипоксии [26]. Толерантность нейронов головного мозга тюленя к гипоксии сопровождается необычной локализацией нейроглобина, цитохрома с и лактатдегидрогеназы b в астроцитах, а не в нейронах [27–29], что указывает на более высокую аэробную способность глиальных клеток и, следовательно, меньшая зависимость нейронов от О 2 .Недавний сравнительный транскриптомный подход показал более низкий аэробный энергетический метаболизм в мозге тюленя по сравнению с таковым у хорька ( Mustela putorius furo ) и показал, что стресс-белки кластерин и S100B могут способствовать устойчивости мозга ныряющих млекопитающих к гипоксии. [30].

Однако все еще существуют пробелы в наших знаниях о том, как энергетический метаболизм в мозгу ныряющих млекопитающих справляется с дисбалансом между потреблением и поставкой кислорода. У ныряющего тюленя с капюшоном наблюдается снижение температуры головного мозга до 3 ° C, что, вероятно, способствует гипометаболизму и снижению потребления метаболической энергии [31, 32].На клеточном уровне снижение активности нейронов, которое наблюдалось в срезах неокортекса тюленя в ответ на гипоксию, может представлять дополнительную функциональную стратегию для экономии энергии [12, 26]. В условиях низкого содержания кислорода мозг тюленя с капюшоном может получить дополнительную выгоду от более высокого относительного вклада анаэробного гликолиза в продукцию АТФ [9, 33]. Это предположение было подтверждено наблюдениями, что мозг тюленя с капюшоном имеет более высокие запасы гликогена и толерантность нейронов к лактату, чем мозг мышей [26].Однако и, очевидно, в противоположность этому, предыдущие исследования экспрессии гликогенфосфатазы b ( Pygb ) и лактатдегидрогеназы a и b ( Ldha и Ldhb ) не подтвердили более высокую анаэробную способность тюленя. мозг [26, 29].

Здесь мы использовали RNA-Seq для изучения реакции транскриптома срезов зрительной коры тюленя с капюшоном на гипоксию и реоксигенацию. Электрофизиологические реакции срезов мозга исследовались ранее [24, 26].Чтобы лучше понять молекулярные механизмы, лежащие в основе удивительной устойчивости мозга тюленя к гипоксии [24, 26], мы проанализировали пути и генную онтологию значительно регулируемых генов и дифференциальную экспрессию транскриптов, кодирующих ферменты (изоферменты и субъединицы) выбранных пути энергетического обмена.

Материалы и методы

Заявление об этике

тюленя с капюшоном (N = 3; самки, 1,5–2,5 года) были отловлены в паковых льдах Гренландского моря при наличии соответствующих разрешений от властей Дании и Гренландии, а также Национального управления исследования животных Норвегии (NARA;5399 и 7247). С животными обращались в соответствии с Директивой ЕС 63 (см. Директиву 2010/63 / EU Приложение IV, пункт 1a) с использованием процедуры, одобренной NARA (разрешения № 5399 и 7247) и властями Университета Тромсё. (номера разрешений: AAB / 06). Чтобы свести к минимуму использование животных, ткани использовали в нескольких исследованиях [26, 29, 30, 34].

Пробоподготовка

Тюленей подвергали эвтаназии под глубокой газовой анестезией (вентиляция с использованием 1,5–3% изофлурана [Forene, Abbott, Германия] в воздухе) после первоначальной седации (внутримышечной или внутривенной инъекции 1.5–3,0 мг золазепама / тилетамина [Zoletil Forte Vet, Virbac S.A., Франция] на кг массы тела) с последующей интубацией. После кровотечения и последующего обезглавливания мозг тюленей удаляли и немедленно помещали в охлажденную (4 ° C) искусственную спинномозговую жидкость (aCSF; 128 мМ NaCl, 3 мМ KCl, 1,5 мМ CaCl 2 , 1 мМ MgCl 2 , 24 мМ NaHCO 3 , 0,5 мМ NaH 2 PO 4 , 20 мМ сахароза, 10 мМ D-глюкоза), насыщенный 95% O2-5% CO 2 (нормоксия).

Подготовка срезов головного мозга и лечение гипоксии

Образцы зрительной коры фиксировали поддерживающим агаровым блоком к столику виброслайсера Leica (VT1000s или VT1200s). Срезы (толщиной 400 мкм) из неокортекса были вырезаны и перенесены в насыщенный кислородом aCSF при комнатной температуре не менее чем на 30 мин для восстановления. Срезы доводили до температуры 34 ± 0,5 ° C в течение не менее 20 минут. Гипоксия сохранялась 60 мин после переключения подачи газа на 95% N2-5% CO 2 .Затем срезы, которые служат образцами «гипоксии», сохраняли в RNAlater, тогда как образцам «реоксигенации» давали возможность восстановиться в течение дополнительных 20 минут в нормоксии перед сохранением RNAlater. Схема лечения представлена ​​на рис. S1. Срезы, которые хранились при нормоксии в ACSF в течение 80 мин, использовали в качестве контроля. Все образцы хранили замороженными при -20 ° C в RNAlater до последующего использования.

Подготовка РНК и секвенирование Illumina

Суммарная РНК была выделена из двух срезов на индивидуума для каждого экспериментального условия с использованием peqGOLD Trifast (PEQLAB, Эрланген, Германия) и колонки Crystal RNA Mini Kit (Biolab Products, Bebensee, Германия), связанной с расщеплением ДНК на колонке без РНКазы. ДНКаза (Qiagen, Hilden, Германия).Количество и целостность РНК проверяли с помощью спектрофотометрии и денатурирующего гель-электрофореза, и образцы РНК использовали для секвенирования Illumina.

Дальнейшая оценка РНК, создание библиотеки кДНК и секвенирование были выполнены GENterprise Genomics (Майнц, Германия). Секвенирование выполняли на Illumina NextSeq 500 с химическим составом среднего выхода и расчетным выходом 50 миллионов считываний на образец. Библиотеки секвенирования с парными концами были созданы с использованием 1,5 мкг РНК из каждого образца.Были отобраны библиотеки кДНК со вставками размером ~ 200-800 п.н., и было выполнено секвенирование парных концов 150 нуклеотидов.

Необработанные данные Illumina доступны в базе данных NCBI SRA под номерами доступа от SRX1567547 до SRX1567555 (Bioproject PRJNA278355). Контроль качества исходной последовательности выполнялся с помощью FastQC и CLC-Genomics Workbench (версия 7.5.1). Для качественной обрезки применялись следующие параметры: удалялись все последовательности, содержащие более 2-х неоднозначных символов. Последовательности со средним качеством ниже значения phred 15 также были исключены из дальнейшего анализа.Кроме того, были обрезаны первые 14 нуклеотидов с 5'-конца.

De novo сборка транскриптома

Для сборки de novo транскриптома головного мозга тюленя с капюшоном применяли две стратегии. Первая сборка была сгенерирована с использованием только отсеченных парных считываний длиной 300 нт (12 473 522 считывания) из зрительной коры головного мозга [30]. Вторую сборку генерировали с использованием, кроме того, всех считываний парных концов из 150 нуклеотидов из образцов, обработанных гипоксией (312 047 506 считываний).В обеих стратегиях выполнялось обратное отображение считываний после сборки de novo . Принимались только контиги с минимальной длиной 300 п.н. Сборка и обратное отображение были выполнены с помощью CLC-Genomics Workbench (версия 7.5.1).

Функциональная аннотация и сравнение транскриптомов

Аннотации контигов транскриптома головного мозга тюленя-тюленя были выполнены с помощью инструмента BLAST CLC-Genomics Workbench с использованием баз данных белков SwissProt (дата выпуска: февраль 2015 г.) и человека RefSeq (выпуск 66, июль 2014 г.).Только совпадения BLAST с E <10 -5 считались значимыми и использовались для дальнейшего анализа. Контиги тюленей предпочтительно аннотировали с использованием лучших совпадений BLAST, полученных из генов моржа ( Odobenus rosmarus ) [35] и хорька ( Mustela putorius furo ) [36].

Аннотацию в онтологии генов (GO)

значимых дифференциально экспрессируемых (DE) генов выполняли с помощью онлайн-инструмента PANTHER (Protein ANalysis Through Evolutionary Relationships; http: // go.pantherdb.org), Версия 10.0 от 15 мая 2015 г. [37]. Сообщалось о GO-терминах в доменах «молекулярная функция», «биологический процесс» и «класс белков». Чрезмерная представленность GO-терминов в определенном наборе данных была определена с помощью теста избыточного представления PANTHER (выпуск 2015.04.30) с использованием терминов PANTHER GO-Slim в качестве списка аннотаций. Homo sapiens использовался в качестве справочного списка для статистических расчетов чрезмерной представленности GO-терминов. GO-термы с p-значением ≤ 0.05 после коррекции Бонферрони были признаны значимыми.

Для анализа главных компонентов (PCA) преобразованные log2 значения RPKM (число чтений на модель экзона на килобазу на миллион отображенных считываний) либо всех выраженных транскриптов (9321 признак с RPKM> 1), либо статистически DE-транскриптов, общих для всех образцов (109 признаков) были использованы. График рассеяния проекции был создан с использованием CLC Genomics Workbench (версия 7.5.1).

Иерархическая кластеризация была рассчитана с использованием преобразованных в log2 значений RPKM либо для всех статистически дифференциально экспрессируемых транскриптов, общих для всех образцов (109 признаков), либо только для 40 лучших дифференциально экспрессируемых транскриптов (например.грамм. верхняя 20 с повышенной регуляцией и верхняя 20 с пониженной регуляцией разделяют нормоксию, гипоксию и реоксигенацию). Для кластеризации признаков для расчета средней связи использовалось «Манхэттенское расстояние». Тепловая карта кластеризации функций была рассчитана с использованием CLC Genomics Workbench (версия 7.5.1).

Анализ экспрессии (RNA-Seq)

Отображение считываний было выполнено с использованием алгоритма RNA-Seq программы CLC-Genomics Workbench (версия 7.5.1). Геном хорька ( Mustela putorius furo ), сборка 1.0,75, использовалась в качестве ссылки. Обрезанные чтения были картированы с использованием следующих параметров: 75% чтения и 75% всех нуклеотидов должны были соответствовать эталону для чтения, которое должно быть включено в отображение. Парное расстояние считывания рассчитывалось автоматически. Для устранения систематической ошибки повторяющихся последовательностей при количественной оценке считываются только те уникальные карты в геноме, которые использовались для расчета значения RPKM. Статистически значимые изменения экспрессии в дифференцированно обработанных срезах рассчитывали путем эмпирического анализа цифровой экспрессии генов с использованием CLC-Genomics Workbench.Инструмент реализовал «Точный тест» [38] и использовался с уникальными считываниями гена в качестве значений счетчика с пороговым значением 5 считываний. Для корректировки множественного тестирования применялась поправка Бонферрони к p-значениям. Только гены с кратностью изменения ≥2 и скорректированным по Бонферрони p-значением ≤ 0,01 считались значимыми.

Для анализа экспрессии генов, кодирующих ферменты энергетического метаболизма (изоферменты и субъединицы ферментов перечислены в таблице S3) при нормоксии, гипоксии и гипоксии / реоксигенации, обрезанные считывания дополнительно отображали на митохондриальную хромосому хорька (RefSeqID: NC_020638.1) с такими же настройками, как описано выше. Различия в значениях RPKM ядерных и митохондриально кодируемых генов в образцах с нормоксией, гипоксией и гипоксией / реоксигенацией статистически сравнивались с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) и тестов множественного сравнения LSD Тьюки или Фишера, доступных в GraphPad Prism 6 (La Джолла, Калифорния, США). Обратите внимание, что значения RPKM ядерных и митохондриально кодируемых генов были получены из двух разных карт, и поэтому числа нельзя напрямую сравнивать.

Количественная цепная реакция обратной транскриптазы-полимеразы в реальном времени (qRT-PCR)

Уровни экспрессии выбранных генов проверяли с помощью qRT-PCR. Очистку тотальной РНК и синтез кДНК проводили, как описано ранее [29]. qRT-PCR выполняли на системе ПЦР в реальном времени ABI 7500 с мастер-миксом Power SYBR Green (Applied Biosystems, Дармштадт, Германия), используя следующий протокол: 15 секунд 95 ° C, 15 секунд 60 ° C, 30 секунд 72 ° С, 40 циклов. Число копий мРНК в образце кДНК, эквивалентное 25 нг общей РНК, определяли с использованием кривой концентрации рекомбинантной плазмиды в качестве стандарта, а затем нормализовали до 1 мкг общей РНК.

Результаты

Транскриптомы мозга тюленя-тюленя и срезы головного мозга

В предыдущем исследовании [30] мы сгенерировали 37 108 070 считываний Illumina из необработанной зрительной коры тюленя с капюшоном ( C . cristata ) (Таблица 1). Чтобы выяснить молекулярную адаптацию мозга тюленя к гипоксической нагрузке, которая происходит, по крайней мере, во время длительных погружений, мы исследовали изменения экспрессии генов в срезах мозга тюленя с капюшоном после гипоксической обработки в течение 60 минут после реоксигенации в течение 20 минут (S1 Рис.) .В общей сложности было получено 437 291 176 новых считываний Illumina, отражающих три биологических повтора для каждого, контроля нормоксии, обработанных гипоксией срезов и обработанных гипоксией-реоксигенацией срезов (Таблица 1).

Были сгенерированы две разные сборки, состоящие из обрезанных считываний только из необработанной зрительной коры (сборка № 1) или объединения обрезанных считываний из зрительной коры с обработанными срезами из зрительной коры (сборка № 2). Как и ожидалось, количество контигов увеличилось с 85 821 в сборке № 1 до 149 112 в сборке № 2 (таблица 2).Мы аннотировали контиги ≥500 п.н. из каждой сборки (60 602 и 89 777 контигов, соответственно) с использованием баз данных SwissProt и человека RefSeq с помощью blastx. Количество значительных результатов blastx-попаданий было лишь немного выше для сборки №2 (Таблица 2). Однако сравнение результатов, выполненных с базой данных человека RefSeq, показало, что из 23 095 уникальных совпадений blastx, объединенных в обеих сборках, только 12 265 совместно использовались обеими сборками (S2, рис.). Сборка № 1 произвела 4839 уникальных попаданий blastx, найденных только там, и 5991 попадание было обнаружено только в сборке № 2.Таким образом, сборка № 2, которая содержала большее количество контигов и больше совпадений blastx, была использована для дальнейшего анализа.

Транскриптомный ответ срезов мозга тюленя на гипоксию и реоксигенацию

Обработка срезов мозга гипоксией в течение 60 минут вызывает значительную активацию 34 генов и подавление 204 генов (таблица S1). После дополнительных 20 минут реоксигенации 34 гена были значительно активированы, а 163 гена - подавлены (таблица S2). Было обнаружено, что 25 генов активированы как в срезах гипоксии, так и в срезах гипоксии / реоксигенации; среди генов с пониженной регуляцией 84 были общими для образцов гипоксии и гипоксии / реоксигенации (рис. 1).При сравнении транскриптомов от гипоксии и срезов гипоксии / реоксигенации не было обнаружено значимо дифференциально экспрессируемых генов. Иерархическая кластеризация дифференциально регулируемых генов (рис. 2А) показала, что уровни экспрессии генов в контроле нормоксии напоминают уровни экспрессии необработанной зрительной коры, демонстрируя валидность контролей нормоксии, используемых для срезов головного мозга. Тепловая карта (рис. 2B) и анализ главных компонентов (S3 рис.) Визуализируют сходство ответов в срезах мозга, обработанных в течение 60 минут гипоксией, и срезах после 60 минут гипоксии и 20 минут реоксигенации.

Рис. 2. Тепловая карта экспрессии генов в зрительной коре и срезах головного мозга тюленя с капюшоном.

(A) Иерархическая кластеризация регулируемых генов в дифференцированно обработанных срезах мозга и зрительной коре. (B) Иерархическая кластеризация 20 верхних и 20 подавляющих генов, общих для гипоксии / реоксигенации и контроля нормоксии.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366.g002

Наиболее сильно индуцируемый ген при гипоксии - это цитокин интерлейкин-1β ( Il1b ), медиатор воспалительного ответа, которого было 668.В 85 раз выше выражено в гипоксических срезах головного мозга (таблица 3). Мы также наблюдаем сильную повышающую регуляцию (от ~ 25 до 65 раз) других цитокинов / хемокинов ( Ccl3 , Ccl4 , Cxcl1 и Il1rn ). Другие гены с повышенной активностью включают рецептор урокиназы Plaur , который участвует в заживлении ран, и факторы транскрипции Fosb и Atf3 . Из 204 значительно подавленных генов фактор транскрипции цинкового пальца Znf211 показал самый сильный ответ (113.94-кратно) вместе с другими факторами транскрипции, такими как Znf425 и Klhl11 (таблица 3).

После реоксигенации Il1b снова оказался самым сильным отвечающим геном (425,38-кратная активация) (таблица 4). В целом, список наиболее дифференциально экспрессируемых генов похож на список генов ответа на гипоксию, включая цитокины / хемокины ( Ccl3 , Ccl4 , Cxcl1 и Il1rn ) и факторы транскрипции Fosl1 . Атф3 .Гены с пониженной регуляцией включают множество генов. Самый сильный ответ был обнаружен для мРНК моторного белка Kif11 (-9,32) и фактора транскрипции Zdbf2 (-8,95) (таблица 4).

Анализ генной онтологии регулируемых генов в срезах мозга тюленя

Среди генов, активируемых в срезах головного мозга тюленя после обработки гипоксией, GO термины «связывание» (GO: 0005488) (16 генов), что частично отражает большое количество цитокинов / хемокинов и «активность фактора транскрипции, связывающего нуклеиновые кислоты. «(GO: 0001071) (6 генов) имел наибольшее количество в домене« молекулярная функция »(рис. 3A).Тест репрезентативности PANTHER показал> 5-кратное значительное обогащение по терминам «хемокиновая активность» (GO: 0008009; p = 0,00379) и «цитокиновая активность» (GO: 0005125; p = 0,00372). В области «биологический процесс» ни один из терминов не был представлен значительно. В домене «класс белков» термины «связывание нуклеиновой кислоты» (PC00171) (7 генов), «сигнальная молекула» (PC00207) (7 генов) и «фактор транскрипции» (PC00218) (6 генов) имели наибольшее количество (S5 Рис). В соответствии с результатами в области «молекулярная функция», тест избыточного представления PANTHER обнаружил> 5-кратное обогащение терминов «хемокин» (PC00074; p = 0.0113) и «цитокин» (PC00083; p = 0,00208). Анализ пути KEGG генов, активируемых гипоксией, выявил, что путь MAPK (митоген-активируемые протеинкиназы) значительно обогащен.

Рис. 3. Анализ генной онтологии регулируемых гипоксией и гипоксией / реоксигенацией генов в срезах мозга тюленя.

Анализ ГО в домене «молекулярная функция» значительно усиливающих (A) и подавляющих (B) генов в срезах головного мозга тюленя с капюшоном через 1 час гипоксии (черный) и через 1 час гипоксии с последующей 20-минутной реоксигенацией (белый).Анализ терминов GO в категориях «биологический процесс» и «класс белков» представлен на рис. S3 и S4.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366.g003

Анализ GO обнаружил, что термины «связывание» (64 гена) и «каталитическая активность» (GO: 0003824) (78 генов) отражают наибольшее количество генов подавляется при гипоксии в домене «молекулярная функция» (рис. 3В). Тест на репрезентативность PANTHER показал значительное обогащение (таким образом, подавление) «активности фосфопротеинфосфатазы» (GO: 0004721; 4.9-кратный; p = 0,0191), «активность ионного канала» (GO: 0005216; 3,8 раза; p = 0,016), «активность переносчика» (GO: 0005215; 2,42 раза; p = 0,00727), «активность трансмембранного переносчика» (GO: 0022857; 2,32 раза; p = 0,0381) и «каталитическая активность» (GO: 0003824; 1,6 раза; p = 0,00052). В области «биологический процесс» термины GO «клеточный процесс» (103) и «метаболический процесс» (GO: 0008152) (103) были самыми высокими (S4, фиг.). Тест на чрезмерное представительство PANTHER обнаружил, что несколько терминов GO обогащены среди существенно регулируемых генов, включая «ионный транспорт» (GO: 0006811; 2.99-кратный; p = 0,00334), «развитие нервной системы» (GO: 0007399; 2,85 раза; p = 0,00252) и «процесс модификации клеточного белка» (GO: 0006464; 2,59 раза; p = 0,000166). Наибольшее количество терминов GO в домене «класс белков» было «рецептор» (PC00197) (31 ген), «транспортер» (PC00227) (24 гена), «связывание нуклеиновой кислоты» (PC00171) (24 гена) и « гидролаза »(PC00121) (24 гена) (S5 фиг.). Термины «лиганд-управляемый ионный канал» (PC00141;> 5-кратный; p = 0,0178), «транспортер» (PC00227; 2,51-кратный; p = 0.00712) и «рецептор» (2,07 раза; p = 0,0184) были обнаружены значительно обогащенными в тесте избыточного представления PANTHER. Анализ KEGG подавленных генов выявил в основном пути, связанные с нейрональными процессами: «дофаминергический синапс», «управление аксоном», «ретроградная эндоканнабиноидная передача сигналов», «глутаматергический синапс» и «аритмогенная кардиомиопатия правого желудочка».

Сходный образец терминов GO был обнаружен в генах, дифференциально экспрессируемых после гипоксии / реоксигенации. Значительное обогащение в области «молекулярная функция» (фиг. 3A) было обнаружено для терминов «хемокиновая активность» (> 5 раз; p = 0.00379), «цитокиновая активность» (> 5-кратная; p = 0,00372) и «связывание» (2,3-кратная; p = 0,00767). В области «биологический процесс» (S4 фиг.) Термины «ответ на стимул» (GO: 0050896; 3,52 раза; p = 0,0287) и «клеточный процесс» (2,07 раза; p = 0,0254) были значительно перепредставлены. В домене «класс белков» (S5 фиг.) Было обнаружено> 5-кратное обогащение терминов «хемокин» (p = 0,0103), «цитокин» (p = 0,00176) и «сигнальная молекула» (p = 0,00298). тестом на чрезмерную репрезентативность PANTHER.Анализ KEGG выявил пути «ревматоидный артрит», «путь передачи сигналов NF-каппа B», «малярия» и «путь передачи сигналов TNF», на которые в значительной степени влияет гипоксия / реоксигенация.

GO-анализ генов, подавляемых гипоксией / реоксигенацией (рис. 3B), обнаружил в области «молекулярная функция» значительное обогащение терминов «активность ионного канала» (в 4,01 раза; p = 0,0388), «активность переносчика» ( 2,82 раза; p = 0,00122) и «активность трансмембранного переносчика» (2,81 раза; p = 0.00335). В домене «биологический процесс» (S4 фиг.) Было обнаружено, что несколько терминов GO значительно регулируются; среди них были «ионный транспорт» (3,41 раза; p = 0,00146), «клеточный процесс» (3,41 раза; p = 0,000005) и «первичный метаболический процесс» (GO: 0044238; 1,47 раза; p = 0,0134). В домене «класс белков» (S5 фиг.) Термины «транспортер» (2,99 раза; p = 0,00058), «переносчик катионов» (> 5 раз; p = 0,00112) и «ионный канал» (4,13 раза) ; p = 0,0368). При анализе пути KEGG не было обнаружено значительного обогащения среди генов, подавляющих реоксигенацию.

Изменения экспрессии генов в энергетическом обмене

Мы специально проанализировали изменения экспрессии 165 отобранных генов, кодирующих ферменты и другие белки, которые участвуют в клеточном энергетическом метаболизме (таблица S3; фигура S6). Для 22 генов аннотации не были доступны в текущей версии генома хорька [36], и одна не была найдена в нашем наборе данных; эти 23 гена не рассматривались. Мы обнаружили в транскриптоме 142 головного мозга тюленя-тюленя гены, которые кодируют ферменты, связанные с производством клеточной энергии.Для оценки экспрессии генов в качестве ориентира использовались ядерный и митохондриальный геномы хорька. Мы удалили 18 ядерно-кодированных генов с <1 RPKM и один митохондриальный ген ( MtNd4l ) с очень низким значением экспрессии из набора данных, оставив 123 гена для дальнейшего анализа.

Мы обнаружили значительную активацию при гипоксии и гипоксии / реоксигенации 18 генов и подавление 15 генов, которые участвуют в энергетическом метаболизме (рис. 4; таблица S3). Среди них мы обнаружили повышенную регуляцию трех генов, участвующих в метаболизме глюкозы (альдолаза A [ AldoA ], триозофосфат-изомераза [ Tpi1 ] и глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа [ Gapdh ]) и понижающая регуляция четырех из них. пять субъединиц пируватдегидрогеназного комплекса (пируватдегидрогеназа (липоамид) альфа 1 [ Pdha1 ], связывающий белок E3 [ Pdhx ], дигидролипоамид S-ацетилтрансфераза [ Dlat ] и дигидролипоамиддегидролипоамид ) ).Кроме того, мы проанализировали уровни мРНК двух выбранных генов, Pdha1 и Dlat с помощью qRT-PCR, продемонстрировав отличную корреляцию с данными из RNAseq (S7 рис.).

Рис. 4. Регулирование ферментов ферментов энергетического метаболизма в коре головного мозга тюленя в ответ на гипоксию и реоксигенацию.

Гены с повышенной регуляцией показаны зеленым плюсом (+), гены с пониженной регуляцией показаны красным минусом (-). Все гены демонстрируют одинаковые паттерны регуляции, за исключением Cox5a и Cox5b , которые регулируются только гипоксией, а также Atp5i , Sucla2 и Idh4g , которые регулируются только после реоксигенации.Толстые стрелки обозначают реакции, которым могут способствовать соблюдаемые здесь правила. См. Сокращения и подробности в таблице S3.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366.g004

Рис. 5. Уровни экспрессии компонентов комплекса пируватдегидрогеназы (PDH).

Значения RPKM Pdha1 , Pdhx , Dlat и Dld показывают значительное подавление в срезах мозга тюленя после гипоксии и гипоксии / реоксигенации (N = 3).Планки погрешностей представляют собой стандартные отклонения. Статистическая значимость была указана с помощью однофакторного дисперсионного анализа, связанного с множественными сравнительными тестами Тьюки; разные буквы указывают на статистически значимые различия.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366.g005

Анализируемые гены, кодирующие ферменты цикла трикарбоновых кислот и компоненты митохондриальной цепи транспорта электронов, не показали уникального паттерна с точки зрения повышения активности. и подавление проводящих путей.Было обнаружено, что транспортер монокарбоксилата Mct4 ( Slc16a3 ), который способствует экспорту лактата, активируется, в то время как транспортеры монокарбоксилата Mct1 ( Slc16a1 ; ENSMPUG00000005243 ) и Mct162 (пониженная регуляция ) подвергались регуляции кислородом ( ) и повторно регулировались кислородом при понижении концентрации кислорода Slc. Неожиданно мы наблюдали снижение значений RPKM ферментов метаболизма гликогена: UDP-глюкозопирофосфорилазы ( Ugp ), фермента ветвления гликогена ( Gbe1 ), фосфоглюкомутазы 3 ( Pgm3 ) и фермента гликогена Debrancher . ) при гипоксии и гипоксии / реоксигенации.Также следует отметить отсутствие значительных различий в экспрессии типичных ферментов, ограничивающих скорость гликолиза, таких как гексокиназа-1 ( Hk1 ), фосфофруктокиназа-1 ( Pfkm , Pfkl и Pfkb ) и лактат. дегидрогеназа ( Ldha и Ldhb ) между нормоксией, гипоксией и гипоксией / реоксигенацией (таблица S3).

Обсуждение

Гипоксический ответ головного мозга ныряющих млекопитающих

У большинства людей и других наземных млекопитающих церебральная гипоксия обычно является нефизиологической или патологической ситуацией, которая вызывает широкий спектр физиологических и молекулярных изменений, которые могут помочь мозгу выжить [1, 3, 39].Напротив, мозг ныряющих млекопитающих должен регулярно иметь дело с состояниями O 2 , которые могут поставить под угрозу нормальную функцию мозга у наземных млекопитающих [5, 9–12]. Примечательно, что мозг тюленей и китов не только выживает в этих условиях без видимых повреждений, но и остается функциональным. Это наблюдение вызвало ряд исследований замечательных особенностей ныряющего мозга, которые отличают его от мозга большинства не ныряющих млекопитающих [для обзора см. 5, 10, 11, 12, 18, 20].

Мы использовали срезы головного мозга тюленя с капюшоном ( C . cristata ) для изучения реакции на гипоксию и реоксигенацию на молекулярном уровне. Техника срезов мозга применялась ранее для сравнения эффективности нейронов тюленя с капюшоном и мышей в условиях гипоксии и реоксигенации с использованием электрофизиологических методов in vitro [24–26]. Хотя электрофизиологические исследования показали различия между состояниями гипоксии и реоксигенации [26], мы наблюдали небольшие изменения в паттернах экспрессии генов срезов тюленя после 60-минутной гипоксии по сравнению со срезами после 60-минутной гипоксии с последующей 20-минутной реоксигенацией (рис. 2 и 3). .После поправки на множественное тестирование ни одно из наблюдаемых различий не было значимым. Это открытие указывает на то, что в пределах временных рамок наших протоколов воздействия не было обнаружено специфической реакции реоксигенации на уровне экспрессии генов. Очевидно, 20-минутной реоксигенации было недостаточно для того, чтобы срезы мозга вернулись к нормоксическому состоянию экспрессии генов, что позволяет предположить, что посттранскрипционные процессы играют важную роль в модуляции электрофизиологической активности [24–26]. Далее вместе обсуждаются результаты реакций гипоксии и реоксигенации.

Реакция мозга тюленя на гипоксию и реоксигенацию - это активный и специфический процесс

Таким образом, гипоксия и гипоксия / реоксигенация увеличивают экспрессию 18 уникальных и 25 общих генов и снижают экспрессию 283 генов в срезах мозга тюленя с капюшоном; 84 из них были разделены между курсами лечения (рис. 1). Тем не менее, общие уровни экспрессии мРНК (измеренные суммой значений RPKM или количеством секвенированных считываний для каждого образца) существенно не различались в контрольных и лечебных образцах, что указывает на то, что применяемые здесь обработки гипоксией и гипоксией / реоксигенацией действительно не вызывают общего подавления экспрессии генов.Дифференциальная индукция и репрессия генов также указывают на то, что ответ мозга тюленя с капюшоном на гипоксическую нагрузку является активным процессом, а не пассивным снижением клеточного метаболизма. Вероятно, ни один из регулируемых генов сам по себе не отвечает за наблюдаемую толерантность срезов мозга тюленя к гипоксии и стрессам, связанным с гипоксией [24–26]. Скорее, специфическая комбинация изначально высоких уровней стрессовых генов, таких как кластерин и S100B [30], наряду с регуляцией специфических метаболических и регуляторных путей, вероятно, необходима для общей толерантности к гипоксии.

Гипоксия и реоксигенация вызывают у млекопитающих консервативный стрессовый ответ в мозге тюленя-тюленя

Наиболее заметная группа генов, которые были активированы в ответ на лечение гипоксией и гипоксией / реоксигенацией, включают цитокины и гены немедленного раннего возраста, например, Fosb , который является компонентом фактора транскрипции AP-1 (таблицы 3 и 4). ; Таблицы S1 и S2). Известно, что процессы воспаления начинаются в течение нескольких часов после ишемического инсульта [40, 41] и участвуют в удалении апоптотических и некротических клеток после ишемии [42].Это может быть истолковано как указание на то, что нервное повреждение, такое как гибель клеток, происходит в применяемых экспериментальных условиях, хотя неизвестно (но маловероятно), возникают ли такие экстремальные условия также в интактном мозге тюленя во время погружения.

Общая картина в срезах мозга тюленя с капюшоном напоминает консервативный ответ мозга млекопитающих на удар [39]. В каждой из двух групп лечения 14 генов (из 43), у которых была обнаружена повышенная регуляция, также ранее индуцировались в головном мозге крысы после 15-минутной глобальной ишемии с последующей реперфузией [39].К ним в основном относятся цитокины / хемокины и факторы транскрипции, которые, вероятно, являются компонентами консервативного механизма ответа на стресс в головном мозге млекопитающих. Однако среди генов с пониженной регуляцией только шесть (после гипоксии) и три гена (после гипоксии / реоксигенации) соответственно перекрывались с предыдущим исследованием на крысах, подчеркивая различия между лечением и дивергентными стратегиями.

Включает энергетический метаболизм мозга тюленя в ответ на гипоксию

Энергетический метаболизм - важный процесс, и его специфическая регуляция, вероятно, помогает мозгу тюленя лучше выжить в условиях ограниченной доступности O 2 .В условиях гипоксии запасы гликогена в головном мозге тюленя с капюшоном могут поддерживать гликолиз в дополнение к глюкозе, поставляемой за счет поддерживаемого церебрального кровоснабжения во время ныряния [18, 20]. Однако наши данные не указали на активацию метаболизма гликогена (рис. 4). Это может быть связано с присутствием 10 мМ глюкозы в искусственной среде срезов, которая могла оказывать репрессивное действие на гены метаболизма гликогена. Это может имитировать ситуацию с интактным животным, в котором поступление глюкозы в мозг поддерживается кровотоком.Однако для подтверждения этой интерпретации требуются дополнительные экспериментальные данные.

Мы также не наблюдали заметных изменений в экспрессии генов, кодирующих ферменты, которые обычно считаются ограничивающими скорость гликолиза [43]: гексокиназа ( Hk1 ), фосфофруктокиназа-1 ( Pfkm , Pfkl ). , Pfkb ) пируваткиназа ( Pkm ) и лактатдегидрогеназа ( Ldha и Ldhb ) (таблица S3). Однако мы обнаружили, что уровни трех других гликолитических генов, AldoA , Tpi1 и Gapdh , увеличились в срезах, подвергнутых гипоксии и гипоксии / реоксигенации (рис. гликолитическая скорость.

Повышенная зависимость от выработки гликолитической энергии в условиях низкого содержания кислорода также указывается подавлением монокарбоксилатного транспортера Mct2 и повышением активности Mct4 . Mct2 имеет высокое сродство к лактату и пирувату и экспрессируется в основном в тканях, которые используют лактат в качестве субстрата для аэробного метаболизма или глюконеогенеза [44]. Mct4 в основном присутствует в тканях, которые зависят от анаэробного гликолиза. Он имеет низкое сродство к пирувату, что имеет решающее значение для регенерации NAD + для гликолиза, обеспечивая доступность пирувата.Пируват восстанавливается до лактата, который затем выводится из клетки с помощью Mct4. Предыдущие исследования показали, что Mcts участвуют в реакции на гипоксию и ишемию. Напр., Гипоксическое прекондиционирование вызывает активацию Mct4 в астроцитах крыс [45], а нокдаун Mct4 препятствует выживанию смешанных культур астроцитов и нейронов в условиях гипоксии [46]. Активность и структура Mct4, по-видимому, связаны со специфическим для астроцитов переносчиком возбуждающих аминокислот 1 (Eaat1) [47].Следовательно, регуляция Mcts, наблюдаемая в срезах мозга тюленя, может указывать на адаптацию к оттоку лактата, продуцируемого анаэробным гликолизом. Кроме того, повышенная экспрессия Mct4 может быть частью молекулярных механизмов толерантности к гипоксии и лактату в срезах мозга тюленя с капюшоном [26]. Таким образом, данные указывают на стимуляцию пути гликолиза потоком субстрата. Предыдущие гипотезы об изменении разделения труда между астроцитами и нейронами у ныряющих млекопитающих [27, 28] также предполагали дифференциальные клеточные ответы в этих терминах.Однако такой подход не позволял различать астроциты и нейроны.

Гипоксия и реоксигенация также влияют на гены, кодирующие митохондриальные белки. По сравнению с нормоксией, уровни мРНК субъединиц пируватдегидрогеназного комплекса (Pdc), Pdha1 , Dlat , Dld и Pdhx , заметно снизились в срезах мозга тюленя в условиях гипоксии на 60%, 55%. , 37% и 41% соответственно (рис. 5). После реоксигенации уровни Pdha1 , Dlat , Dld и Pdhx оставались низкими (рис. 5).Pdc является привратником для окисления глюкозы; следовательно, подавление субъединиц Pdc указывает на то, что окисление в митохондриях подавляется. Другие исследования уже показали, что ингибирование Pdc является фундаментальным адаптивным механизмом энергетического метаболизма млекопитающих к гипоксии [48, 49]. В культивируемых раковых клетках человека и мышей снижение активности пируватдегидрогеназы во время гипоксии было связано со снижением продукции АФК и сопротивлением гибели клеток [48]. Для ферментов, которые участвуют в цикле трикарбоновых кислот и компонентов дыхательной цепи, четкой картины не наблюдалось.Ранее сообщалось о снижении активности и содержания митохондриальных белков различных клеток млекопитающих в условиях гипоксии, таких как изоцитратдегидрогеназа [50]. Напротив, мы наблюдали статистически значимое усиление изоформы изоцитратдегидрогеназы Idh4g только после гипоксии / реоксигенации (рис. 4). Повышенная регуляция компонентов комплексов III, IV и V указывает на более высокие скорости окислительного фосфорилирования в образцах гипоксии и гипоксии / реоксигенации по сравнению с нормоксией.Возможное объяснение состоит в том, что в условиях низкого содержания O 2 повышающая регуляция этих компонентов может отражать попытку клеток обеспечить эффективный прирост энергии от доступного O 2 , аналогично паттернам в митохондриях головного мозга крысы, которые были адаптировались к гипоксии [51, 52].

Заключение

Нет никаких сомнений в том, что необычная толерантность к гипоксии головного мозга тюленя с капюшоном является результатом множества молекулярных и биохимических адаптаций.Хотя ранее мы показали заметные различия в устойчивой экспрессии мРНК мозга тюленя с капюшоном и хорька и других наземных млекопитающих [30], знания о молекулярных ответах мозга были ограничены и ограничивались анализом экспрессии нескольких гены методом qRT-PCR [26]. В значительной степени мозг тюленя реагирует на гипоксическую нагрузку так же, как и мозг других млекопитающих, что включает активацию типичных стрессовых белков, таких как цитокины и гены немедленного ранга [39, 53].Однако ни один из генов, участвующих в энергетическом метаболизме, не регулируется в предыдущих исследованиях ишемического мозга [39, 54, 55], что позволяет предположить, что их регуляция является специфической реакцией мозга тюленя на гипоксию и реоксигенацию. Наблюдаемые изменения в экспрессии генов, участвующих в энергетическом метаболизме, наиболее убедительно можно интерпретировать как переход к анаэробному энергетическому метаболизму (рис. 4 и 5; таблица S3). Этот вывод подтверждается активацией генов, которые кодируют гликолитические ферменты, подавлением пируватдегидрогеназного комплекса и активацией транспортера монокарбоксилата Mct4 , что указывает на отток лактата из клеток.

Однако текущие данные дают лишь представление об адаптациях, которые необходимы, чтобы помочь мозгу тюленя справиться с периодами гипоксии во время погружения. Во-первых, как уже упоминалось, исследования транскриптомов не позволяют выявить изменения, происходящие на посттранскрипционном уровне. Во-вторых, хотя техника срезов мозга хорошо известна на животных моделях [24, 56, 57], неизвестно, действительно ли ответы в срезах отражают ситуацию in vivo .В-третьих, наши данные отражают только глобальные изменения и не позволяют различать экспрессию генов в нейронах и глиальных клетках; Фактически, имеется достаточно иммуногистологических доказательств того, что изменения во взаимодействии между нейронами и астроцитами являются важным компонентом адаптации мозга тюленя с капюшоном к гипоксии [27–29]. Клеточно-специфические транскриптомы потребуются для изучения клеточно-специфических ответов, но в настоящее время их трудно получить из ткани мозга тюленя с капюшоном.

Дополнительная информация

S3 Рис.Корреляция необработанной зрительной коры с экспрессией гена среза мозга тюленя.

(A) PCA всех транскриптов (9347 признаков с RPKM> 1) из зрительной коры (красный), срезов мозга при нормоксии (зеленый), гипоксии (синий) и реоксигенации (желтый). (B) PCA статистически DE транскриптов, общих для всех образцов (109 функций). Показан очень похожий транскриптомный ответ срезов мозга с нормоксией и зрительной коры по сравнению с срезами мозга с гипоксией и реоксигенацией.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0169366.s003

(PDF)

S4 Рис. Онтология генов в области «биологический процесс».

GO анализ был проведен для значительно повышающих (А) и понижающих (В) регулируемых генов в срезах головного мозга тюленя после 1 часа гипоксии (черный) и после 1 часа гипоксии с последующей 20-минутной реоксигенацией (белый).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366.s004

(PDF)

S5 Рис. Онтология генов в домене «класс белков».

GO анализ был проведен для значительно повышающих (А) и понижающих (В) регулируемых генов в срезах головного мозга тюленя после 1 часа гипоксии (черный) и после 1 часа гипоксии с последующей 20-минутной реоксигенацией (белый).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366.s005

(PDF)

S1 Файл. Экспрессия генов в срезах мозга зрительной коры тюленя с капюшоном.

A. Экспрессия генов (RPKM) срезов головного мозга при нормоксии (n2-n4), гипоксии (h3-4) и после реоксигенации (r2-r4).Приведен список уровней экспрессии генов (RPKM) необработанной зрительной коры [30]. B. Тест DGE срезов, хранящихся в условиях гипоксии и нормоксии. C. Тест DGE срезов после реоксигенации по сравнению с нормоксией.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169366.s008

(XLSX)

Благодарности

Мы благодарим Андреса Лилля за перечисление генов энергетического метаболизма.

Вклад авторов

  1. Концептуализация: ТБ.
  2. Формальный анализ: MLMH AF.
  3. Финансирование: MLMH TB.
  4. Расследование: MLMH AF NCD.
  5. Администрация проекта: ТБ.
  6. Ресурсы: NCD LF.
  7. Надзор: ТБ.
  8. Проверка: MLMH.
  9. Визуализация: MLMH AF TB.
  10. Написание - первоначальный черновик: MLMH AF TB.
  11. Написание - просмотр и редактирование: MLMH AF NCD LF TB.

Список литературы

  1. 1. Dirnagl U, Iadecola C, Moskowitz MA. Патобиология ишемического инсульта: комплексный взгляд. Trends Neurosci. 1999. 22 (9): 391–7. pmid: 10441299
  2. 2. Чаморро А, Дирнагл У, Урра X, Планас AM. Нейропротекция при остром инсульте: направленная на эксайтотоксичность, окислительный и нитрозативный стресс и воспаление. Lancet Neurol. 2016: в печати.
  3. 3. Хаддад Г.Г., Цзян К. О 2 депривация в центральной нервной системе: о механизмах нейронального ответа, дифференциальной чувствительности и травмах.Prog Neurobiol. 1993. 40 (3): 277–318. pmid: 7680137
  4. 4. Hansen AJ. Влияние аноксии на распределение ионов в головном мозге. Physiol Rev.1985; 65 (1): 101–48. pmid: 3880896
  5. 5. Ларсон Дж., Дрю К.Л., Фолкоу Л.П., Милтон С.Л., Парк Т.Дж. Нет кислорода? Без проблем! Внутренняя толерантность мозга к гипоксии у позвоночных. J Exp Biol. 2014; 217 (Pt 7): 1024–39. pmid: 24671961
  6. 6. Натаниэль Т.И., Уильямс-Эрнандес А., Хантер А.Л., Лидди С., Пеффли Д.М., Умесири Ф.Э. и др.Тканевая гипоксия во время ишемического инсульта: адаптивные ключи от моделей животных, толерантных к гипоксии. Brain Res Bull. 2015; 114: 1–12. pmid: 25738761
  7. 7. Бано Д., Никотера П. Сигналы Ca 2+ и гибель нейронов при ишемии мозга. Гладить. 2007. 38 (2 доп.): 674–6. pmid: 17261713
  8. 8. Therade-Matharan S, Laemmel E, Carpentier S, Obata Y, Levade T, Duranteau J и др. Производство активных форм кислорода митохондриями в эндотелиальных клетках, подвергшихся реоксигенации после гипоксии и истощения глюкозы, опосредуется церамидом.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2005; 289 (6): R1756–62. pmid: 16278342
  9. 9. Керем Д., Эльснер Р. Церебральная толерантность к асфиксической гипоксии у морского тюленя. Respir Physiol. 1973; 19 (2): 188–200. pmid: 4763083
  10. 10. Батлер П.Дж. Метаболическая регуляция у ныряющих птиц и млекопитающих. Respir Physiol Neurobiol. 2004. 141 (3): 297–315. pmid: 15288601
  11. 11. Батлер П.Дж., Джонс ДР. Физиология ныряния птиц и млекопитающих. Physiol Rev.1997; 77 (3): 837–99.pmid:

    67
  12. 12. Рамирес JM, Folkow LP, Blix AS. Толерантность к гипоксии у млекопитающих и птиц: от дикой природы до клиники. Annu Rev Physiol. 2007; 69: 113–43. pmid: 17037981
  13. 13. Scholander PF. Экспериментальные исследования дыхательной функции ныряющих млекопитающих и птиц. Hvalradets Skr. 1940; 22: 1–131.
  14. 14. Запол В.М., Лиггинс Г.К., Шнайдер Р.К., Квист Дж., Снайдер М.Т., Кризи Р.К. и др. Региональный кровоток во время симуляции ныряния у тюленя Уэдделла в сознании.J Appl Physiol Respir Environ Exerc Physiol. 1979; 47 (5): 968–73. pmid: 511722
  15. 15. Qvist J, Hill RD, Schneider RC, Falke KJ, Liggins GC, Guppy M, et al. Концентрация гемоглобина и напряжение газов в крови у тюленей Уэдделла, ныряющих во фридайвинг. J Appl Physiol. 1986. 61 (4): 1560–9. pmid: 3096941
  16. 16. Meir JU, Champagne CD, Costa DP, Williams CL, Ponganis PJ. Чрезвычайная толерантность к гипоксемии и недостаток кислорода в крови у ныряющих морских слонов. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol.2009. 297 (4): R927–39. pmid: 19641132
  17. 17. Уильямс Т.М., Заванелли М., Миллер М.А., Голдбек Р.А., Морледж М., Каспер Д. и др. Бег, плавание и ныряние изменяют нейрозащитные глобины в мозге млекопитающих. Proc R Soc Lond, Ser B: Biol Sci. 2008. 275 (1636): 751–8.
  18. 18. Дэвис RW. Обзор многоуровневых адаптаций для увеличения продолжительности аэробного погружения у морских млекопитающих: от биохимии к поведению. J Comp Physiol [B]. 2014. 184 (1): 23–53.
  19. 19.Бликс А.С., Фолков Б. Сердечно-сосудистые изменения при нырянии у млекопитающих и птиц. В: Sheperd JT, Abboud FM, редакторы. Справочник по физиологии - сердечно-сосудистая система III. Bethesda: Am. Physiol. Soc .; 1983. с. 917–45.
  20. 20. Ponganis PJ. Дайвинг на млекопитающих. Comp Physiol. 2011; 1 (1): 447–65.
  21. 21. Blix AS, Elsner R, Kjekshus JK. Сердечный выброс и его распределение через капилляры и шунты A-V у водолазных тюленей. Acta Physiol Scand. 1983. 118 (2): 109–16.pmid: 6624500
  22. 22. Folkow LP, Blix AS. Дышащие воздухом под водой: ныряющие млекопитающие и птицы. В: Nilsson GE, редактор. Физиология дыхания позвоночных. Жизнь с кислородом и без него. Кембридж: Издательство Кембриджского университета; 2010. с. 222–64.
  23. 23. Folkow LP, Blix AS. Поведение тюленей с капюшоном ( Cystophora cristata ) при нырянии в Гренландском и Норвежском морях. Polar Biol. 1999. 22 (1): 61–74.
  24. 24. Folkow LP, Рамирес JM, Людвигсен S, Рамирес N, Blix AS.Замечательная устойчивость к нейронной гипоксии у взрослого морского котика, ныряющего в глубокое плавание ( Cystophora cristata ). Neurosci Lett. 2008. 446 (2–3): 147–50. pmid: 18824079
  25. 25. Рамирес JM, Folkow LP, Людвигсен S, Рамирес PN, Blix AS. Медленные собственные колебания в толстых неокортикальных срезах устойчивых к гипоксии тюленей для глубокого ныряния. Неврология. 2011; 177: 35–42. pmid: 21185914
  26. 26. Czech-Damal NU, Geiseler SJ, Hoff ML, Schliep R, Ramirez JM, Folkow LP и др. Роль гликогена, глюкозы и лактата в активности нейронов во время гипоксии в головном мозге тюленя ( Cystophora cristata ).Неврология. 2014; 275: 374–83. pmid: 24959743
  27. 27. Mitz SA, Reuss S, Folkow LP, Blix AS, Ramirez JM, Hankeln T. и др. Когда мозг «ныряет»: глиальный окислительный метаболизм может придать мозгу тюленя толерантность к гипоксии. Неврология. 2009. 163 (2): 552–60. pmid: 19576963
  28. 28. Schneuer M, Flachsbarth S, Czech-Damal NU, Folkow LP, Siebert U, Burmester T. Нейроглобин тюленей и китов: свидетельства различной роли в головном мозге ныряльщиков. Неврология.2012; 223: 35–44. pmid: 22864183
  29. 29. Hoff MLM, Fabrizius A, Folkow LP, Burmester T. Атипичное распределение изоферментов лактатдегидрогеназы в мозге тюленя с капюшоном ( Cystophora cristata ) может отражать биохимическую адаптацию к дайвингу. J Comp Physiol [B]. 2016; 186 (3): 373–86.
  30. 30. Fabrizius A, Hoff MLM, Engler G, Folkow LP, Burmester T. Когда мозг погружается: анализ транскриптома показывает снижение аэробного энергетического метаболизма и увеличение стрессовых белков в мозге тюленя.BMC Genomics. 2016; 17: 583. pmid: 27507242
  31. 31. Blix AS, Walløe L, Messelt EB, Folkow LP. Селективное охлаждение мозга и его сосудистая основа у водолазных тюленей. J Exp Biol. 2010. 213 (Pt 15): 2610–6. pmid: 20639422
  32. 32. Odden A, Folkow LP, Caputa M, Hotvedt R, Blix AS. Охлаждение мозга у ныряющих тюленей. Acta Physiol Scand. 1999. 166 (1): 77–8. pmid: 10372982
  33. 33. Мерфи Б., Запол В.М., Хочачка П.В. Метаболическая активность сердца, легких и мозга во время ныряния и восстановления у тюленя Уэдделла.J Appl Physiol Respir Environ Exerc Physiol. 1980. 48 (4): 596–605. pmid: 7380685
  34. 34. Гайзелер SJ, Ларсон J, Folkow LP. Синаптическая передача, несмотря на тяжелую гипоксию в срезах гиппокампа глубоко ныряющего тюленя с капюшоном. Неврология. 2016; 334: 39–46. pmid: 27480049
  35. 35. Фут А.Д., Лю Й., Томас Г.В., Винар Т., Альфольди Дж., Дэн Дж. И др. Конвергентная эволюция геномов морских млекопитающих. Нат Жене. 2015; 47 (3): 272–5. pmid: 25621460
  36. 36. Пенг Х, Альфольди Дж., Гори К., Эйсфельд А.Дж., Тайлер С.Р., Тисончик-Го Дж. И др.Предварительная последовательность генома хорька ( Mustela putorius furo ) облегчает изучение респираторных заболеваний человека. Nat Biotechnol. 2014; 32 (12): 1250–5. pmid: 25402615
  37. 37. Ми Х.Й., Муругануджан А, Касагранде Дж.Т., Томас П.Д. Масштабный анализ функций генов с помощью системы классификации PANTHER. Nat Protoc. 2013. 8 (8): 1551–66. pmid: 23868073
  38. 38. Робинсон MD, Смит GK. Оценка отрицательной биномиальной дисперсии по малой выборке с приложениями к данным SAGE.Биостатистика. 2008. 9 (2): 321–32. pmid: 17728317
  39. 39. Бюттнер Ф., Кордес С., Герлах Ф., Хейманн А., Алессандри Б., Люксембург Ю. и др. Геномный ответ мозга крысы на глобальную ишемию и реперфузию. Brain Res. 2009; 1252: 1–14. pmid: 198
  40. 40. Barone FC, Feuerstein GZ. Медиаторы воспаления и инсульт: новые возможности для новых методов лечения. J Cereb Blood Flow Metab. 1999. 19 (8): 819–34. pmid: 10458589
  41. 41. Йи Дж. Х., Парк SW, Кападиа Р., Вемуганти Р.Роль факторов транскрипции в опосредовании постишемического церебрального воспаления и повреждения головного мозга. Neurochem Int. 2007. 50 (7–8): 1014–27. pmid: 17532542
  42. 42. Дантон Г.Х., Дитрих В.Д. Воспалительные механизмы после ишемии и инсульта. J Neuropathol Exp Neurol. 2003. 62 (2): 127–36. pmid: 12578222
  43. 43. Берг Дж. М., Тимочко Дж. Л., Страйер Л. Биохимия. Издание 7-е изд. Нью-Йорк: У. Х. Фриман; 2012. 1054 с.
  44. 44. Симпсон И.А., Каррутерс А., Ваннуччи С.Дж.Спрос и предложение в метаболизме энергии мозга: роль переносчиков питательных веществ. J Cereb Blood Flow Metab. 2007. 27 (11): 1766–91. pmid: 17579656
  45. 45. Гао Ц., Ван Ц., Лю Б., Ву Х, Ян Ц., Джин Дж и др. Периодическая гипоксия, вызванная прекондиционированием эпилептической толерантности, за счет усиления экспрессии монокарбоксилатного транспортера 4 в астроцитах гиппокампа крыс. Neurochem Res. 2014; 39 (11): 2160–9. pmid: 25146899
  46. 46. Gao C, Zhu W., Tian L, Zhang J, Li Z. MCT4-опосредованная экспрессия EAAT1 участвует в устойчивости к гипоксическому повреждению в совместных культурах астроцитов и нейронов.Neurochem Res. 2015; 40 (4): 818–28. pmid: 25645447
  47. 47. Лю Б., Ню Л., Шен М.З., Гао Л., Ван С., Ли Дж. И др. Снижение экспрессии транспортера 4 астроглии монокарбоксилата при височной эпилепсии. Mol Neurobiol. 2014; 50 (2): 327–38. pmid: 24464262
  48. 48. Кикучи Д., Минамишима Ю.А., Накаяма К. Пролилгидроксилаза PHD3 взаимодействует с пируватдегидрогеназой (PDH) -E1beta и регулирует клеточную активность PDH. Biochem Biophys Res Commun. 2014. 451 (2): 288–94.pmid: 25088999
  49. 49. Ким Дж. В., Чернышев И., Семенза Г. Л., Данг CV. HIF-1-опосредованная экспрессия киназы пируватдегидрогеназы: метаболический переключатель, необходимый для клеточной адаптации к гипоксии. Cell Metab. 2006. 3 (3): 177–85. pmid: 16517405
  50. 50. Мерфи Б.Дж., Робин Э.Д., Таппер Д.П., Вонг Р.Дж., Клейтон Д.А. Гипоксическая координационная регуляция митохондриальных ферментов в клетках млекопитающих. Наука. 1984. 223 (4637): 707–9. pmid: 6320368
  51. 51. Лукьянова Л.Д., Кирова Ю.И.Контролируемые митохондриями сигнальные механизмы защиты мозга при гипоксии. Front Neurosci. 2015; 9: 320. pmid: 26483619
  52. 52. Лукьянова Л.Д., Чернобаева Г.Н., Романова В.Е. Влияние адаптации к перемежающейся гипоксии на окислительное фосфорилирование в митохондриях мозга крыс с разной чувствительностью к дефициту кислорода. Bull Exp Biol Med. 1995; 120: 1189–92.
  53. 53. Bonestroo HJ, Nijboer CH, van Velthoven CT, Kavelaars A, Hack CE, van Bel F, et al.Воспалительная реакция мозга и печени после неонатальной гипоксии-ишемии у новорожденных крыс. Dev Neurosci. 2013. 35 (2–3): 197–211. pmid: 23689428
  54. 54. Джин К., Мао ХО, Эшу М.В., Нагаяма Т., Минами М., Саймон Р.П. и др. Микроматричный анализ экспрессии генов гиппокампа при глобальной ишемии головного мозга. Энн Нейрол. 2001. 50 (1): 93–103. pmid: 11456315
  55. 55. Шмидт-Кастнер Р., Чжан Б., Беляев Л., Хуторова Л., Амин Р., Бусто Р. и др. ДНК-микроматричный анализ экспрессии кортикальных генов во время ранней рециркуляции после очаговой ишемии головного мозга у крыс.Brain Res Mol Brain Res. 2002. 108 (1–2): 81–93. pmid: 12480181
  56. 56. Lonchamp E, Dupont JL, Beekenkamp H, Poulain B, Bossu JL. Кора мозжечка мыши в органотипических культурах срезов: модель in vitro для анализа последствий мутаций и патологий на выживание, развитие и функцию нейронов. Crit Rev Neurobiol. 2006. 18 (1-2): 179–86. pmid: 17725520
  57. 57. Сибуя И., Кабашима Н., Ибрагим Н., Сетиаджи С.В., Уэта Ю., Ямасита Х. Пре- и постсинаптическая модуляция электрической активности супраоптических нейронов крыс.Exp Physiol. 2000; 85 Номер спецификации: 145S – 51S.
Анализ транскриптома

показывает снижение аэробного энергетического метаболизма и увеличение стрессовых белков в мозге тюленя - тема исследовательской статьи в биологических науках. Скачайте научную статью в формате PDF и читайте ее бесплатно в открытом научном центре CyberLeninka.

Fabrizius et al. BMC Genomics (2016) 17: 583 DOI 10.1186 / s12864-016-2892-y

BMC Genomics

НАУЧНАЯ СТАТЬЯ Открытый доступ

Когда мозг погружается в воду: анализ транскриптома показывает снижение аэробного энергетического метаболизма и увеличение стрессовых белков в мозге тюленя

Андрей Фабрициус Мариана Лейвас Мюллер Хофф, Герхард Энглер, Ларс П.Фольков и Торстен Бурместер

Аннотация

Предыстория: Во время длительных погружений в мозг китов и тюленей снижается поступление кислорода (гипоксия). Нейроны головного мозга тюленя с капюшоном (Cystophora cristata) более толерантны к условиям с низким содержанием кислорода, чем у мышей, а также лучше переносят другие стрессовые состояния, связанные с гипоксией, такие как уменьшение поступления глюкозы и высокие концентрации лактата. Мало что известно о молекулярных механизмах, которые поддерживают толерантность к гипоксии ныряющего мозга.

Результаты: Здесь мы использовали RNA-seq, чтобы приблизиться к молекулярной основе необычной стрессоустойчивости мозга тюленя. Созданный компанией Illumina транскриптом зрительной коры головного мозга тюленя с капюшоном сравнивали с транскриптомом хорька (Mustela putorius furo), который служил наземным родственником. Анализ онтологии генов показал значительное обогащение транскриптов, связанных с трансляцией и аэробной выработкой энергии в хорьках, но не в мозге тюленя. Кластерин, внеклеточный шаперон, является наиболее экспрессируемым геном в мозге тюленя и в четыре раза выше, чем в транскриптоме мозга хорька или любого другого млекопитающего.Наибольшее различие было обнаружено для S100B, кальций-связывающего стрессового белка с плейотропной функцией, который был в 38 раз обогащен в мозге тюленя. Примечательно, что значительное обогащение мРНК S100B также было обнаружено в транскриптомах мозга китов, но не в мозге наземных млекопитающих.

Заключение. Сравнительная транскриптомика указывает на более низкую аэробную способность мозга тюленя, что можно интерпретировать как общую стратегию энергосбережения. Повышенная экспрессия генов, связанных со стрессом, таких как кластерин и S100B, возможно, способствует замечательной устойчивости мозга к гипоксии головного мозга тюленя с капюшоном.Более того, высокие уровни S100B, которые, возможно, защищают мозг, по-видимому, являются результатом конвергентной адаптации ныряющих млекопитающих.

Ключевые слова: мозг, кальций, дайвинг, глюкоза, гипоксия, тюлень, морские млекопитающие, стресс

Фон

Нехватка кислорода (гипоксия) обычно оказывает разрушительное воздействие на функцию и выживание мозга млекопитающих. Гипоксия также участвует и является причиной многих нейрональных нарушений у людей, например, болезни Альцгеймера [1], болезни Паркинсона [2] и церебральной ишемии (инсульта) [3-5].Недостаток кислорода

* Для корреспонденции: [email protected] tEqualcontributors

Институт зоологии, Биоцентр Гриндель, Гамбургский университет,

Martin-Luther-King-Platz 3, D-20146 Hamburg, Германия

Полный список информации об авторах доступен в конце статьи

обычно приводит к необратимому повреждению мозга в течение нескольких минут и, в конечном итоге, к смерти [4].Напротив, мозг ныряющих млекопитающих, то есть китов и тюленей, может без повреждений пережить повторяющиеся и продолжительные периоды системной гипоксии [6–12].

Замечательная способность многих морских млекопитающих к нырянию является результатом сочетания различных поведенческих, анатомических и физиологических адаптаций [7-10, 13-16]. Эти адаптации, которые увеличивают поступление O2, включают высокий уровень гемоглобина и миоглобина, большой объем крови, увеличенные запасы крови, увеличенную емкость для

О © 2016 Автор (ы).Открытый доступ Эта статья распространяется в соответствии с условиями Центральной международной лицензии Creative Commons Attribution 4.0 BnlVled (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), которая разрешает неограниченное использование, распространение и

воспроизведение на любом носителе при условии, что вы должным образом укажете автора (авторов) и источник, предоставите ссылку на лицензию Creative Commons и укажете, были ли внесены изменения. Отказ от лицензии Creative Commons Public Domain Dedication (http: // creativecommons.org / publicdomain / zero / 1.0 /) применяется к данным, предоставленным в этой статье, если не указано иное.

анаэробный метаболизм и ресурсосберегающие изменения сердечно-сосудистой системы, такие как брадикардия и периферическая вазоконстрикция [11, 15, 17, 18]. Кроме того, морские млекопитающие демонстрируют особую адаптацию к плаванию, к преодолению воздействия гипербарической среды, к терморегуляции в холодной воде, к усилению водосбережения, а также демонстрируют адаптацию органов чувств [15,19, 20].

Тюлень с капюшоном (C. cristata) демонстрирует удивительную способность нырять с максимальной продолжительностью погружения около 1 часа и максимальной зарегистрированной глубиной> 1000 м [21]. Во время погружения РО2 в артериальной крови резко падает, как это также показано для некоторых других глубоководных видов [6, 12, 17, 22], и, таким образом, мозгу тюленя приходится иметь дело с длительными периодами снижения поступления кислорода. Электрофизиологические исследования с использованием срезов головного мозга показали, что нейроны тюленя-капюшона оставались активными в условиях тяжелой гипоксии и сохранялись до 1 часа, в то время как нейроны мышей погибали всего через несколько минут [23, 24].Мозг тюленя с капюшоном переносит низкий уровень глюкозы или высокий уровень лактата как при нормоксии, так и при гипоксии [25]. Толерантность к гипоксии нейронов тюленя с капюшоном может быть, по крайней мере, частично, из-за сдвига окислительного метаболизма с нейронов на астроциты, о чем свидетельствует отчетливое различие в распределении нейроглобина и цитохрома с в головном мозге тюленя с капюшоном. тюлень по сравнению с мозгом наземных млекопитающих [26, 27].

Адаптация морских млекопитающих к гипоксии на генетическом уровне может быть частично объяснена избирательными дупликациями и утратой генов [28] или специфическими заменами в кодирующих последовательностях [29].Однако нет никаких сомнений в том, что изменения в экспрессии отдельных генов также вносят вклад в адаптацию. Чтобы лучше понять молекулярные основы стрессоустойчивости мозга тюленя с капюшоном, мы использовали подход RNA-seq и сравнили количество транскриптов в зрительной коре головного мозга тюленя с капюшоном и хорька. Мы обнаружили, что мозг тюленя с капюшоном экспрессирует меньше генов, связанных с энергетическим метаболизмом и трансляцией, но показал замечательные уровни двух типичных стрессовых генов, кластерина и S100B.Примечательно, что высокий уровень экспрессии S100B также был обнаружен у китов, но не у наземных млекопитающих.

Результаты

Расшифровка зрительной коры тюленя с капюшоном и хорька

Мы получили транскриптомы из зрительной коры головного мозга тюленя и хорька (см. Дополнительный файл 1: Таблица S1 и Дополнительный файл 2: Таблица S2), уровни экспрессии мРНК оценивали с помощью RNA-seq. Всего 10 298 транскриптов имели значения RPKM> 1 в обоих транскриптомах.Для дальнейшего анализа дифференциальной экспрессии учитывались только транскрипты с RPKM> 5 у обоих видов, что дало 6 229 транскриптов (дополнительный файл 3: Таблица S1).

Наивысшие уровни мРНК в зрительной коре головного мозга тюленя (таблица 1a) были обнаружены для шаперонного кластерина (CLU) с 3104,57 RPKM, за которым следует нейромодулятор простагландин D2-синтазы (PTGDS; 2213,95 RPKM), связывающий кальций S100. белок B (S100B; 1860.29 RPKM), стрессовый белок с плейотропной функцией, метаболический фермент глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH, 1413.17 RPKM) и домен гидролизующего фермента глицерофосфодиэфирфосфодиэстеразы, содержащий 2 (GDPD2; 1334,93 RPKM). В головном мозге хорька (таблица 1b) самые высокие уровни были обнаружены для GAPDH (3728,00 RPKM), митохондриально кодируемой цитохром С-оксидазы II (MTCO2; 2266,01 RPKM), пептидил-пролилцис-транс-изомеразы E-подобного гена ( L0C101679695; 1824,67 RPKM), который катализирует изомеризацию пептидных связей пролина, и кальмодулин 1 (1805,51 RPKM) и 2 (1802,73 RPKM), которые оба опосредуют контроль различных ферментов и других белков через Ca2 +.

Наибольшие различия между уровнями экспрессии в головном мозге тюленя и хорька (таблица 2) были обнаружены для S100B, у которого RPKM в мозге тюленя в 37,98 раза выше. Богатый лейцином протеогликан остеоглицин (OGN) был в 12,14 раза выше в мозге тюленя, за ним следует Nei-эндонуклеаза VIII-подобная 2 (NEIL2), ДНК-гликозилаза, участвующая в репарации поврежденной ДНК (в 10,11 раз выше в мозге тюленя) , алкогольдегидрогеназа гидроксистероид (17-бета) дегидрогеназа 11 (HSD17B11; 6.46 x), транскрипт, который кодирует сывороточный белок, связанный с белками класса I главного комплекса гистосовместимости (MHC) (бета-2-микроглобулин; B2M; 6,26 x), цитохром P450, семейство 4, подсемейство V, полипептид 2 (CYP4V2; 6,05 x), который окисляет жирные кислоты, и антиоксидантный ген параоксоназы 2 (PON2).

Функциональная аннотация транскриптов, дифференциально экспрессируемых в транскриптомах тюленя и хорька

Для анализа GO (рис. 1) учитывались только гены с RPKM> 5 у обоих видов (6229 генов; дополнительный файл 3: таблица S1) и более чем двукратное различие экспрессии.В генах (263 со складчатостью> 2), которые более высоко экспрессируются в мозге тюленя, термины GO «каталитическая активность» (91) и «связывание» (72) были самыми высокими в области «молекулярная функция» (дополнительная файл 4: Таблица S3). Тест на репрезентативность PANTHER показал, что обогащение GO-Slim терминов «структурная составляющая цитоскелета» (2,66 раза; p = 0,00644), «оксидоредуктазная активность» (2,56 раза; p = 0,0241) и «каталитическая активность» (1,4 раз; p = 0,0364) был значимым. Термины, относящиеся к связыванию ДНК, были недостаточно представлены.В области «биологический процесс» наибольшие числа были отнесены к терминам GO «метаболический процесс» (115) и «клеточный процесс» (101). Было обнаружено, что большое количество терминов GO чрезмерно представлены, включая термины, относящиеся к глиальным клеткам (> 5 раз; p <0,05), «окислительно-восстановительный процесс» (2,48 раза; p = 0,0203) и «реакция на стресс». (1,73 раза; p = 0,00221). В

Таблица 1 Наиболее высоко экспрессируемые гены в зрительной коре головного мозга тюленя (A) и хорька (B) n --o

Ген Символ гена Функция Тюлень с капюшоном (RPKM) Хорек (RPKM) Разница складок 3

А.Манжета с капюшоном „

Кластерин CLU шаперон 3104,57 777,62 3,99

Нейромодулятор ПТГДС простагландин-D2-синтазы 2213,95 1451,49 1,53

S100 кальций-связывающий белок B S100B Регулятор связывания Ca2 + 1860,29 48,98 37,98

Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа GAPDH Метаболический фермент 1413,17 3728,00 -2,64

Домен глицерофосфодиэфирфосфодиэстеразы, содержащий 2 GDPD2 Липидный метаболизм 1334.93 277,95 4,80

Глутамат-аммиачная лигаза GLUL контроль pH, удаление аммиака и L-глутамата 1046,64 768,49 1,36

Кальмодулин 2 CALM2 Регулятор связывания Ca2 + 1002,24 1805,51 -1,80

SPARC-подобный 1 (хевин) SPARCL1 Ca2 + -связывание 938,95 536,88 1,75

Альдолаза C, фруктозо-бисфосфат ALDOC Метаболический фермент 918,67 906,26 1,01

Просапозин PSAP Липидный обмен 883,57 913.66 -1,03

Б. Хорек

Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа GAPDH Метаболический фермент 1413,17 3728,00 -2,64

Митохондриально кодируемая цитохром С оксидаза II MTCO2 Дыхательная цепь 245,64 2266,01 -9,22

Пептидилпролилцис-транс-изомераза E-подобная LOC 101679695 Неизвестно 98,39 1824,67 -18,55

Кальмодулин 2 CALM2 Регулятор связывания Ca2 + 1002,24 1805,51 -1,80

Кальмодулин 1 CALM1 Регулятор связывания Ca2 + 480.64 1802,73 -3,75

Нейромодулятор ПТГДС простагландин-D2-синтазы 2213,95 1451,49 1,53

Митохондриальная АТФ-синтаза, бета-субъединица ATP5B Дыхательная цепь 541,42 1166,96 -2,16

Лактатдегидрогеназа B LDHB Метаболический фермент 453,40 1127,78 -2,49

Малатдегидрогеназа 1, NAD MDh2 Метаболический фермент 544,42 1055,62 -1,94

Рибосомальпротеин L26 RPL26 Трансляция 289,61 1040.08 -3,59

Таблица 2 Транскрипты наиболее широко представлены в зрительной коре головного мозга тюленя по сравнению с мозгом хорька

Дифференциально экспрессируемый ген Обозначение гена Функция Тюлень с капюшоном (RPKM) Хорек (RPKM) Разница складок

S100 кальций-связывающий белок B S100B Са2 + -связывающий регулятор 1860,3 49,0 37,98

Остеоглицин OGN Фактор роста 288,0 23,7 12,14

Nei-эндонуклеаза VIII-подобная 2, репарация ДНК NEIL2 51.1 5,1 10,11

Гидроксистероид (17-бета) дегидрогеназа 11 HSD17B11 Синтез стероидов 81,3 12,6 6,46

P-2-микроглобулин B2M Иммунный белок 242,1 38,7 6,26

Цитохром P450, семейство 4, подсемейство V, полипептид 2 CYP4V2 Липидный обмен 86,2 14,3 6,05

Параоксоназа 2 PON2 Антиоксидантный белок 95,9 17,3 5,54

Biglycan BGN Развитие и восстановление 41,1 7,7 5,35

Moesin MSN Взаимодействие мембрана-цитоскелет 60.4 11,3 5,33

Трансмембранный 4 L из шести членов семейства 1 TM4SF1 Передача сигнала 33,4 6,3 5,31

Учитывались только гены со значениями RPKM> 5. Предполагаемые гены HLA-DRA были исключены

«класс белков», наибольшее количество было обнаружено в терминах «рецептор», «цитоскелетный белок», «модулятор фермента», «гидролаза», «трансфераза», «связывание нуклеиновой кислоты», «переносчик» и «оксидоредуктаза». ". Тест на репрезентативность показал значительное обогащение терминов «цитоскелетный белок семейства актина» (3.45-кратный; p = 0,0026) и «оксидоредуктаза» (2,63 раза; p = 0,0263).

Мы обнаружили 1207 генов, экспрессия которых в мозге хорька как минимум в два раза выше (дополнительный файл 5: таблица S4). В области «молекулярная функция» термины GO «каталитическая активность» (374) и «связывание» (351) были самыми высокими. Среди терминов GO-Slim, которые показали значительное обогащение, были «структурная составляющая рибосомы» (> 5-кратная; p = 1,9 x 10-22), «активность фактора инициации трансляции» (2.92-кратный; p = 0,038) и «оксидоредуктазная активность» (1,84 раза; p = 0,00057). В области «биологический процесс» наибольшие числа были отнесены к терминам GO «метаболический процесс» (115) и «клеточный процесс» (101). В домене «класс белков» самые высокие числа были обнаружены в терминах «связывание нуклеиновой кислоты» (181), «модулятор фермента» (86) и «трансфераза» (83). Тест репрезентативности показал значительное обогащение терминов, среди прочего, тестом было «окислительное фосфорилирование» (4,74 раза; p = 0.000265), «дыхательная цепь переноса электронов» (2,68 раза; p = 0,000128) и «трансляция» (3,66 раза; p = 8,77 x 10-23).

Сравнительный анализ транскриптомов мозга млекопитающих

Высокая экспрессия CLU и S100B в зрительной коре головного мозга тюленя с капюшоном по сравнению с кортексом хорька была подтверждена с помощью qRT-PCR (дополнительный файл 6: рисунок S1). Чтобы оценить уровни экспрессии CLU и S100B в мозге других млекопитающих, мы получили транскриптомы мозга других млекопитающих из базы данных SRA (дополнительный файл 7: Таблица S2).Если возможно, мы выбрали транскриптомы из коры головного мозга. Для китов только «мозговой» транскриптом (без

, дальнейшее описание) от малого полосатика и транскриптом мозжечка от гренландского кита. Мы обнаружили высокую экспрессию CLU только в транскриптоме мозга тюленя, но не в каком-либо другом из исследованных транскриптомов мозга млекопитающих (рис. 2а). Было обнаружено, что S100B сильно экспрессируется в головном мозге тюленя с капюшоном, а также в мозге двух китов.Уровни экспрессии S100B статистически различались между ныряющими и не ныряющими видами (двусторонний t-критерий; p = 0,0009).

Поскольку соотношение нейронов / глии может различаться в образцах мозга, а у китов может быть более высокое относительное содержание глиальных клеток [30], мы нормализовали уровни экспрессии S100B в соответствии с относительными уровнями экспрессии нейронального маркера (RBFOX3) и глиального маркерный ген (GFAP) (примечание: CLU не был нормализован, потому что он экспрессируется как в нейронах, так и в клетках глии).Фактически, отношения GFAP / RBFOX3 варьируются между видами до коэффициента> 200 (рис. 2b). Однако нормализованные коэффициенты экспрессии ясно показывают значительно более высокие уровни S100B в мозге тюленя с капюшоном и двух видов китов (p = 0,0021).

Для оценки сходства транскриптомов мозга у разных видов были рассчитаны коэффициенты корреляции транскриптомов и визуализированы с помощью дерева объединения соседей (дополнительный файл 8: рисунок S2).Общего сходства транскриптомов мозга ныряющих млекопитающих не обнаружено. Транскриптомы мозга кита объединяются с транскриптомами коровы, а транскриптомы зрительной коры тюленя с капюшоном - с корой хорька, что, вероятно, отражает эволюционные взаимоотношения таксонов.

Обсуждение

Нет признаков более высокой анаэробной способности мозга тюленя, но есть свидетельства снижения аэробного энергетического метаболизма

По крайней мере, во время длительных погружений мозг китов и тюленей должен справляться с ограниченным поступлением кислорода.В то время как

Рис. 1 Анализ генной онтологии (GO) дифференциально экспрессируемых генов тюленя (синий) и хорька (красный). Учитывались только гены с как минимум двукратной разницей в уровнях экспрессии и RPKM> 5 у обоих видов. термины GO в наборе данных аннотации PANTHER «Молекулярная функция». b Термины GO в наборе аннотационных данных PANTHER "BiologicalProcess"

Рис. 2 Уровни экспрессии Clu (синий) и S100B (зеленый) в тканях мозга ныряющих и не ныряющих млекопитающих a Указаны конкретные области мозга и виды.b Экспрессия S100B была нормализована в соответствии с соотношением нейрон / глия

системных механизма, помогающих ныряющим млекопитающим выжить, хорошо изучены на уровне организма [7-10, 13-15, 17, 28, 29], мало что известно о молекулярных механизмах, которые помогают мозгу переносить периоды гипогликемии. оксия. Примечательно, что уровни мРНК ключевых ферментов анаэробного метаболизма, лактатдегидрогеназы A и B (LDHA и LDHB), ниже в зрительной коре головного мозга тюленя с капюшоном, чем у хорька (дополнительный файл 3:

).

Spreadsheet S1), подтверждающие исследования qRT-PCR и тесты активности [31].Таким образом, несмотря на способность нейронов тюленя переносить длительные периоды гипоксии [23-25] и высокий уровень гликогена в мозге тюленя [6, 25, 32], нет - по крайней мере на уровне транскриптома - свидетельств более высокого анаэробная емкость всего мозга. Скорее, похоже, существует корректировка разделения труда между нейронами и астроцитами, в результате чего, например, в высшем анаэробном

емкости нейронов и более высокий аэробный метаболизм астроцитов, что может улучшить выживаемость нейронов [26, 27, 31].

Анализ терминов GO показал, что большая часть генов, которые значительно преобладают в транскриптоме мозга хорька, связаны с аэробным энергетическим метаболизмом (например, «окислительное фосфорилирование», «дыхательная электронная транспортная цепь», «образование метаболитов-предшественников»). и энергия ») (Дополнительный файл 5: Таблица S4). В мозгу тюленя дело обстоит иначе. Таким образом, вместо того, чтобы иметь более высокую анаэробную способность, как это наблюдается у других видов гипоксии или устойчивых к аноксии видов [10, 33, 34], адаптация мозга тюленя к условиям с низким содержанием кислорода может включать более низкий аэробный энергетический метаболизм.Мы также обнаружили в чрезмерно представленных генах хорьков обогащенные термины GO, связанные с трансляцией, что также предполагает сравнительно более низкий синтез белка в мозге тюленя. Поскольку трансляция является одним из наиболее требовательных к АТФ клеточных процессов, ее сокращение также может способствовать глобальной экономии энергии мозга тюленя. Подобные наблюдения были сделаны раньше, например, у рыб, подвергшихся гипоксии, или у бескислородных черепах [33, 35, 36].

Мы также отмечаем, что мы не нашли доказательств того, что наблюдаемые паттерны экспрессии заметно зависят от использования конкретных областей мозга, пола или морфологических факторов, таких как мозг или массы тела.Корреляционный анализ экспрессии генов между транскриптомами мозга млекопитающих показал замечательную корреляцию между паттернами экспрессии генов и филогенезом видов (дополнительный файл 8: рисунок S2). Таким образом, филогенетическое родство, по-видимому, является основной движущей силой экспрессии генов в мозге, что оправдывает использование хорька в качестве близкого родственника для сравнения с тюленем.

Кластерин и S100B могут способствовать стрессоустойчивости головного мозга ныряльщиков

CLU (также известный как аполипопротеин J) является наиболее экспрессируемым геном в зрительной коре головного мозга тюленя с капюшоном (3104.4 РПКМ). RPKM намного выше, чем в зрительной коре головного мозга хорька или в других общедоступных транскриптомах других млекопитающих (рис. 2а), что указывает на специфическую адаптацию мозга тюленя с капюшоном. Ген CLU кодирует два разных продукта, которые выполняют множество функций [37, 38]. Обычная секретируемая форма представляет собой гетеродимерный гликопротеин, который действует как внеклеточный шаперон и, как полагают, способствует выживанию клеток. Альтернативный сплайсинг приводит к усеченному белку CLU, который мешает BAX-опосредованному пути апоптоза.У человека CLU участвует в нескольких нейродегенеративных заболеваниях [38]. Например, растворимый CLU предотвращает агрегацию белка амилоида в при болезни Альцгеймера [39], а высокие уровни мРНК CLU связаны со старением [40]. Повышенная регуляция CLU наблюдалась при различных стрессовых условиях, включая окислительный стресс [38]. Таким образом, можно предположить, что CLU защищает мозг тюленя от окислительного стресса, вызванного

примерно в периоды гипоксии во время погружения, а также во время реоксигенации, когда уплотнение выходит на поверхность.В этом контексте высокие уровни мРНК Clu в мозге тюленя можно интерпретировать либо как предварительную адаптацию к стрессовым условиям во время погружений, либо как экспрессию Clu индуцировали стрессовые условия во время погружений.

Наибольшая разница в экспрессии была обнаружена для S100B, у которого RPKM в коре головного мозга тюленя с капюшоном в 38 раз выше, чем в коре головного мозга хорька (1860,3 против 49,0 RPKM). S100B представляет собой Ca2 + -связывающий белок EF-hand, который, по крайней мере, в мозге мышей, крыс и человека, в основном экспрессируется в астроцитах, но также и в некоторых нейронах [41-43].Мы должны отметить, что у нас нет информации о клеточном распределении S100B у тюленя с капюшоном, хорька и большинства других видов, используемых в сравнительном подходе. S100B выполняет внутриклеточные и внеклеточные функции и регулирует различные процессы, включая пролиферацию клеток, активацию астроцитов во время повреждения и болезни мозга, а также способствует развитию рака. У людей высокие уровни S100B связаны с шизофренией [44, 45] и другими заболеваниями головного мозга [46, 47]. Примечательно, что уровень S100B также был повышен в мозге малых полосатиков и гренландских китов по сравнению с мозгом не ныряющих млекопитающих (рис.2а), и эта разница сохраняется, когда значения RPKM корректируются в соответствии с соотношением глия / нейрон (рис. 2b). Кластерный анализ коэффициентов корреляции значений экспрессии различных транскриптомов исключает, что наблюдаемое сходство обусловлено схожими областями мозга (дополнительный файл 8: рисунок S2). Таким образом, S100B является компонентом общего механизма адаптации к стрессу, который, должно быть, эволюционировал конвергентно у китов и тюленей, и который помогает мозгу ныряющих млекопитающих лучше выжить при пониженном снабжении кислородом.Одним из возможных механизмов может быть то, что высокие уровни S100B усиливают внутриклеточные сайты связывания Ca2 +, тем самым увеличивая буферную способность Ca2 + и тем самым снижая эксайтотоксичность, вызванную гипоксией, поскольку массивный приток Ca2 + в противном случае вызвал бы необратимые повреждения нейронов и индуцировал бы апоптоз [3-5 ]. В качестве альтернативы, высокие уровни S100B могут быть индикатором повреждения мозга, которое происходит в ответ на стрессовую жизнь ныряющих млекопитающих.

Множество других генов показали заметные различия в уровнях экспрессии, но их функции в головном мозге интерпретировать труднее.Например, предыдущие исследования связывали OGN с формированием костей и мышц [48], а CYP4V2 у человека ассоциирован с дистрофией сетчатки [49]. Тем не менее, в 10,1 раз более высокие уровни гликозилазы NEIL2, связанной с репарацией ДНК [50, 51], можно легко объяснить увеличением повреждений ДНК в гипоксическом мозге тюленя. PON2, который метаболизирует окисленную арахидоновую кислоту и докозагексаеновую кислоту [52], в 5,54 раза выше у тюленя с капюшоном и может участвовать в антиоксидантной реакции клеток мозга.Однако, что касается Clu и S100B, остается неясным, были ли гены, которые были высоко экспрессированы у тюленя

мозга отражает внутреннюю особенность, или они увеличиваются в ответ на стресс, вызванный погружениями.

Выводы

Ежегодно миллионы людей умирают или заболевают тяжелыми заболеваниями из-за состояний или заболеваний, которые снижают снабжение кислородом чувствительных к гипоксии тканей, таких как мозг. Острые метаболические нарушения, такие как инсульт, имеют особенно разрушительные последствия, которые в большинстве случаев невозможно исправить.Напротив, мозг ныряющих млекопитающих переносит длительные периоды системной гипоксии. Дифференциальная регуляция определенных генов, таких как CLU и S100B, а также, вероятно, многих других, может способствовать защите мозга ныряющего человека. Эти гены также могут быть подходящими мишенями для лекарств, которые предотвращают, например, Инсульт.

Методы

Животные и подготовка проб

Взрослые тюлени с капюшоном (n = 5; самки, масса тела от 142 до 220 кг) были пойманы в паковых льдах Гренландского моря и подверглись эвтаназии под глубокой газовой анестезией (вентиляция 1.5–3% изофлурана [Forene, Abbott, Германия] в воздухе), после начальной седации (внутримышечная или внутривенная инъекция 1,5–3,0 мг золазепама / тлетета-мина на кг массы тела). После кровотечения и декапитации образцы мозга хранили замороженными при -80 ° C в RNAlater (Qiagen, Hilden, Германия). Четыре взрослых хорька (M. putorius furo) (самец; возраст ~ 2 года; масса тела ~ 1,5 кг) были получены из зоопарка Университетского медицинского центра Гамбург-Эппендорф (UKE, Германия). Животных умерщвляли под глубокой анестезией (Кетамин / Домитор) с передозировкой пентобарбитала; впоследствии мозг был удален ветеринарами.Образцы мозга хранили при -80 ° C в RNAlater.

Суммарную РНК

экстрагировали с использованием peqGOLD Trifast (PEQLAB, Эрланген, Германия) в сочетании с Crystal RNA Mini Kit (Biolab Products, Bebensee, Германия). После количественного и качественного анализа с использованием спектрофотометрии и гель-электрофореза образцы РНК использовали для секвенирования Illumina или qRT-PCR.

Секвенирование и сборка транскриптомов

Библиотеку для парного секвенирования длиной 300 нуклеотидов получали из 5 мкг РНК из зрительной коры головного мозга тюленя (взрослая самка).g РНК зрительной коры и секвенирование выполняли с помощью химии HiSeq2500 v4 с расчетным результатом 25 миллионов считываний (GATC Biotech, Констанц, Германия). Анализ качества последовательностей выполнялся с помощью FastQC и CLC-Genomics Workbench (версия 7.5). Для обрезки все читаются с более чем двумя

неоднозначных символа и со средним качеством Phred ниже 15 были отброшены. Дополнительно были обрезаны первые 14 нуклеотидов с 5'-конца.

Для сборки de novo транскриптома головного мозга тюленя с капюшоном использовались считывания с парных концов с контролем качества (12 473 522 считывания).После сборки был выполнен этап считывания обратного отображения. Для анализа BLAST допускались только контиги с минимальной длиной 300 п.н. Сборка de novo и обратное отображение были выполнены с помощью CLC-Genomics Workbench (версия 7.5).

Необработанные файлы транскриптомов из зрительной коры головного мозга тюленя с капюшоном и хорька доступны в базе данных NCBI SRA под номерами доступа SRR3001184 (Bioproject PRJNA278355) и SRR3000035 (PRJNA305974) соответственно.

Функциональная аннотация транскриптома

Для аннотирования контигов de novo транскриптома мозга тюленя с капюшоном был выполнен локальный поиск BLAST с помощью инструмента BLAST рабочей среды CLC. Для аннотирования контигов использовались две разные базы данных белков; во-первых, тщательно подобранная и неизбыточная база данных SWIS-SPROT и, во-вторых, только база данных белков человека RefSeq (для последующей аннотации Gene Ontology (GO)). Принимались только попадания BLAST с ожидаемым значением E <10-5.Мы предпочли аннотировать неоднозначные контиги на основании сходства с генами моржа (Odobenus rosmarus) и хорька (M. putorius furo).

Чтобы идентифицировать чрезмерно представленные функциональные категории среди различных наборов экспрессируемых генов, мы использовали PANTHER (анализ белков через эволюционные отношения; http://go.pantherdb.org/) версии 10.0 [53]. Были представлены термины GO в доменах «молекулярная функция» и «биологический процесс», а также класс белков. Обогащение категорий оценивалось с помощью теста избыточной репрезентативности PANTHER (выпуск 2015.04.30) с использованием человеческих генов в качестве справочного списка. Были протестированы полные термины GO и PANTHER GO-Slim. Категории с p-значениями <0,05 после коррекции Бонферрони считались значимыми.

Экспрессионный анализ (RNA-seq)

Картирование было выполнено с использованием алгоритма RNA-seq программы CLC-Genomics Workbench (версия 7.5). Ensembl-build 1.0.75 хорька использовался в качестве эталонного генома. Считывания обрезанной печати были картированы с использованием следующих параметров: 75% длины считывания и 75% нуклеотидов должны были соответствовать эталону для считывания, которое должно быть включено в сопоставление.Расстояние парного считывания рассчитывалось автоматически в диапазоне от 145 до 730 п.н. Для расчета RPKM использовались только карты считывания, уникальные для генома, что исключает систематическую ошибку повторяющихся последовательностей при количественной оценке считывания. Для набора данных усеченной РНК-seq хорька параметры были скорректированы до 95% сходства и 95% совпадения длины, для чтения было

.

включены в отображение. Расстояние парного считывания рассчитывалось автоматически в диапазоне от 90 до 378 п.н.

Сравнительная транскриптомика

Мы извлекли общедоступные транскриптомы коры головного мозга мышей (Mus musculus), коры головного мозга свиньи (Sus scrofa), коры головного мозга собаки (Canis lupus knownis), коры (Bos taurus), коры овец (Ovis aries), малых полосатиков (Balaenoptera acutoros- trata) мозг и мозжечок гренландского кита (Balaena mysticetus) из базы данных SRA (инвентарные номера SRX186042, ERX240895, ERX324009, SRX211675, ERX 454974, SRX313597 и SRX7).Каждый набор данных был сопоставлен с соответствующим геномом (транскриптомы кита были сопоставлены с геномом Bos taurus), а экспрессия гена была рассчитана как RPKM (количество считываний на килобазу на миллион сопоставленных считываний). Были включены только гены с RPKM> 5 у тюленя с капюшоном. Статистическую оценку выполняли с помощью GraphPad Prism 6, версия 6.01 (La Jolla California USA).

Чтобы внести поправку на разные виды или области мозга, соотношение глия / нейрон для каждого образца было рассчитано с использованием значений RPKM для GFAP и RBFOX3 (псевдоним NeuN) в качестве прокси.Поскольку RBFOX3 в настоящее время не аннотирован в геноме свиньи, мы использовали SNAP25 в качестве нейронального гена для расчета соотношения глия / нейрон у этого вида. Корреляционный анализ проводился с использованием скорректированных значений. Коэффициенты корреляции Пирсона были рассчитаны с использованием Microsoft Excel 2013 для 4650 скорректированных значений экспрессии генов. Коэффициенты корреляции экспрессии генов между видами были преобразованы в расстояния и использованы для расчета дерева с помощью программы NEIGHBOR пакета PHYLIP 3.68.g общей РНК образцов коры головного мозга тюленя и хорька с использованием набора Fermentas RevertAid H-Reverse Transcriptase Kit (Thermo Fisher Scientific, Брауншвейг, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. qRT-PCR выполняли на системе ПЦР в реальном времени ABI 7500 с мастер-миксом Power SYBR Green (Applied Biosystems, Дармштадт, Германия) с использованием протокола 40 циклов (95 ° C в течение 15 секунд, 60 ° C в течение 15 секунд, 72 ° C в течение 30 с). Последовательности праймеров приведены в Дополнительном файле 9: Таблица S5. Относительные уровни мРНК были рассчитаны с использованием значений порога цикла (CT) и представлены как кратные изменения уровней мРНК хорька.

Дополнительные файлы

Дополнительный файл 1: Таблица S1. Резюме секвенирования Illumina. Приведено количество считываний до и после качественной обрезки. Обозначен процент считываний, отображаемых в геноме хорька. (PDF 20 кб)

Дополнительный файл 2: Таблица S2. Сборка транскриптома de novo из визуальной коры уплотнения. (PDF 6 кб)

Дополнительный файл 3: Таблица S1. Сравнительная экспрессия генов в мозге тюленя и хорька.Экспрессия генов (значения RPKM) в зрительной коре головного мозга тюленя и хорька. Порог был установлен на RPKM> 5 для обоих видов. (XLSX 406 кб)

Дополнительный файл 4: Таблица S3. Гены чрезмерно представлены в мозге тюленя. Онтологический анализ генов, экспрессия которых как минимум в два раза выше в зрительной коре головного мозга тюленя с капюшоном по сравнению с зрительной корой головного мозга хорька. A. Даны термины GO для доменов «молекулярная функция» и «биологический процесс», а также «класс белков».B и C. Тест репрезентативности PANTHER доменов «молекулярная функция», «биологический процесс» и «класс белка» с использованием полных (B) и тонких терминов PANTHER GO. (PDF 24 кб)

Дополнительный файл 5: Таблица S4. Гены чрезмерно представлены в мозгу хорьков. Онтологический анализ генов, которые, по крайней мере, в два раза выше экспрессируются в зрительной коре головного мозга хорька по сравнению с зрительной корой тюленя с капюшоном. A. Даны термины GO для доменов «молекулярная функция» и «биологический процесс», а также «класс белков».B и C. Тест репрезентативности PANTHER доменов «молекулярная функция», «биологический процесс» и «класс белка» с использованием полных (B) и тонких терминов PANTHER GO. (PDF 74 кб)

Дополнительный файл 6: Рисунок S1. Сравнение результатов qRT-PCR и RNA-seq. Изменения в выбранных уровнях мРНК в зрительной коре морского тюленя и хорька оценивали с помощью qRT-PCR (черный; n = 4) и RNA-seq (белый). Оценивали уровни мРНК генов S100B, Clu, SLC1A6 и GAPDH.Оба метода дали одинаковые результаты. (PDF 22 кб)

Дополнительный файл 7: Таблица S2. Экспрессия генов в головном мозге млекопитающих. Значения RPKM были рассчитаны для коры мышей, свиней, собак, коров, овец, хорьков и тюленей, в мозге полосатика и мозжечке гренландского кита. нет данных, не имеется; н.о., не обнаружено. (XLSX 760 кб)

Дополнительный файл 8: Рисунок S2. Корреляция экспрессии генов между транскриптомами мозга млекопитающих.Коэффициенты корреляции были преобразованы в расстояния и визуализированы деревом соединения соседей. (PDF 27 кб) Дополнительный файл 9: Таблица S5. Список праймеров. Прямой и обратный праймеры, которые были созданы в соответствии с консервативными последовательностями генов хорька и тюленя с капюшоном, использовались в анализах экспрессии qRT-PCR. (PDF 6 кб)

Сокращения

GO, генная онтология; qRT-PCR, количественная RT-PCR в реальном времени; RNA-seq, секвенирование РНК; RPKM, чтения на килобазу на миллион отображенных чтений

Благодарности

Мы благодарим Николь У.Чех-Дамал за помощь на раннем этапе этих исследований. Финансирование

Эта работа была поддержана Deutsche Forschungsgemeinschaft (Bu956 / 12). MLMH поддерживается стипендиями для докторов философии. Немецкой службой академических обменов (DAAD) и Coordenagao de Aperfeigoamento de Pessoalde NivelSuperior (CAPES) / Бразилия (5125 / 11-1).

Наличие данных и материалов

Необработанные файлы Illumina расшифровок визуальной коры тюленя с капюшоном и хорька доступны в базе данных NCBISRA (http: // www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/) под номерами доступа SRR3001184 (Bioproject PRJNA278355) и SRR3000035 (PRJNA305974) соответственно. Другие транскриптомы мозга млекопитающих были получены из базы данных NCBISRA (номера доступа SRX186042, ERX240895, ERX324009, SRX211675, ERX454974, SRX313597, SRX7). Все другие данные, полученные или проанализированные в ходе этого исследования, включены в эту опубликованную статью.

Авторские взносы

Концепция и дизайн экспериментов: ТБ.Выполненные исследования: AF, MLMH, GE, LPF. Анализ и интерпретация данных: AF, MLMH, LPF, TB. Написал статью: AF, MLMH, GE, LPF, TB. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Согласие на публикацию

Не применимо.

Утверждение этических норм и согласие на участие

тюленя с капюшоном были отловлены в паковых льдах Гренландского моря при наличии соответствующих разрешений от властей Дании и Гренландии, а также от Национального управления исследований животных Норвегии (NARA; разрешения No.5399 и 7247). Уплотнения обрабатывались в соответствии с Директивой ЕС 2010/63 / EU (см. ДИРЕКТИВУ 2010/63 / EU Приложение IV, пункт 1a) с использованием процедур, утвержденных NARA (разрешения № 5399 и 7247) и властями Университет Трумса0 (номер разрешения AAB / 06). С хорьками обращались в соответствии с Законом Германии о защите животных (Tierschutzgesetz) и европейскими руководящими принципами по уходу и использованию животных в научных экспериментах (Директива 2010/63 / EU), утвержденными государственным органом Гамбурга по защите животных (BUG-Hamburg). , Германия; разрешение №ORG719).

Сведения об авторе

11 Институт зоологии, Биоцентр Гриндель, Гамбургский университет, Мартин-Лютер-Кинг-Платц 3, D-20146 Гамбург, Германия. 2 Кафедра нейрофизиологии и патофизиологии, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, 20246 Гамбург, Германия. 3 Кафедра арктической и морской биологии, Университет Тромса0 - Арктический университет Норвегии, N0-9037 Тромс0, Норвегия.

Получено: 19 марта 2016 г. Принято: 6 июля 2016 г. Опубликовано онлайн: 9 августа 2016 г.

Список литературы

1.Сверстники C, Пирсон HA, Бойл JP. Гипоксия и болезнь Альцгеймера. Очерки Биохимии. 2007; 43: 153-64.

2. Шпеер Р.Э., Каруппагаундер С.С., Бассо М., Слейман С.Ф., Кумар А., Бранд Д., Смирнова Н., Газарян И., Хим С.Дж., Ратан Р.Р. Гипоксия-индуцируемый фактор, пролилгидроксилазы как мишени для нейрозащиты «антиоксидантными» хелаторами металлов: от ферроптоза до инсульта. Free Radic Biol Med. 2013; 62: 26-36.

3. Dirnagl U, ladecola C, Moskowitz MA. Патобиология ишемического инсульта: комплексный взгляд.Trends Neurosci. 1999; 22 (9): 391-7.

4. Хаддад Г.Г., Цзян С. 02 Депривация в центральной нервной системе: о механизмах нейронального ответа, дифференциальной чувствительности и травмах. Prog Neurobiol. 1993; 40 (3): 277-318.

5. Hansen AJ. Влияние аноксии на распределение ионов в головном мозге. Physiol Rev.1985; 65 (1): 101-48.

6. Керем Д., Эльснер Р. Церебральная толерантность к асфиксической гипоксии у морского тюленя. Respir Physiol. 1973; 19 (2): 188-200.

7. Батлер П.Дж. Метаболическая регуляция у ныряющих птиц и млекопитающих. Respir Physiol Neurobiol. 2004; 141 (3): 297-315.

8. Батлер П.Дж., Джонс ДР. Физиология ныряния птиц и млекопитающих. Physiol Rev.1997; 77 (3): 837-99.

9. Рамирес JM, Folkow LP, Blix AS. Толерантность к гипоксии у млекопитающих и птиц: от дикой природы до клиники. Annu Rev Physiol. 2007; 69: 113-43.

10. Ларсон Дж., Дрю К.Л., Фолкоу Л.П., Милтон С.Л., Парк Т.Дж.Нет кислорода? Без проблем! Внутренняя толерантность мозга к гипоксии у позвоночных. J Exp Biol. 2014; 217 (Pt 7): 1024-39.

11. Folkow LP, Blix AS. Дышащие воздухом под водой: ныряющие млекопитающие и птицы. В: Nilsson GE, редактор. Физиология дыхания позвоночных. Жизнь с кислородом и без него. Кембридж: Издательство Кембриджского университета; 2010. с. 222-64.

12. Меир Дж. Ю, Шампанское CD, Коста ДП, Уильямс CL, Понганис П. Дж.. Чрезвычайная толерантность к гипоксемии и недостаток кислорода в крови у ныряющих морских слонов.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2009; 297 (4): R927-939.

13. Дэвис Р.В. Обзор многоуровневых адаптаций для увеличения продолжительности аэробного погружения у морских млекопитающих: от биохимии к поведению. J. Comp Physiol B. 2014; 184 (1): 23-53.

14. Бликс А.С., Фольков Б. Сердечно-сосудистые изменения при нырянии у млекопитающих и птиц. В: Sheperd JT, Abboud FM, редакторы. Справочник по физиологии сердечно-сосудистой системы III. Bethesda: Am. Physiol. Соц; 1983.п. 917-45.

15. Ponganis PJ. Дайвинг на млекопитающих. Comp Physiol. 2011; 1 (1): 447-65.

16. Уильямс Т.М., Заванелли М., Миллер М.А., Голдбек Р.А., Морледж М., Каспер Д., Пабст Д.А., Маклеллан В., Кантин Л.П., Клигер Д.С. Бег, плавание и ныряние изменяют нейрозащитные глобины в мозге млекопитающих. Proc R Soc Lond Ser B Biol Sci. 2008; 275 (1636): 751-8.

17. Шоландер П.Ф. Экспериментальные исследования дыхательной функции ныряющих млекопитающих и птиц.Hvalradets Skr. 1940; 22: 1-131.

18. Blix AS, Elsner R, Kjekshus JK. Сердечный выброс и его распределение через капилляры и шунты A-V у водолазных тюленей. Acta Physiol Scand. 1983, -118 (2) 1109—16.

19. Койман Г.Л., Кастеллини М.А., Дэвис Р.В. Физиология ныряния у морских млекопитающих. Annu Rev Physiol. 1981, 43: 343-56.

20. Ортиз РМ. Осморегуляция у морских млекопитающих. J Exp Biol. 2001; 204 (Pt 11): 1831-44.

21.Folkow LP, Blix AS. Ныряющее поведение тюленя с капюшоном (Cystophora cristata) в Гренландском и Норвежском морях. Polar Biol. 1999; 22 (1): 61-74.

22. Qvist J, Hill RD, Schneider RC, Falke KJ, Liggins GC, Guppy M, Elliot RL, Hochachka PW, Zapol WM. Концентрация гемоглобина и напряжение газов в крови у тюленей Уэдделла, ныряющих во фридайвинг. J Appl Physiol. 1986; 61 (4): 1560-9.

23. Folkow LP, Рамирес JM, Людвигсен S, Рамирес N, Blix AS. Замечательная устойчивость к нейронной гипоксии у взрослого морского тюленя, ныряющего глубоко в воду (Cystophora cristata).Neurosci Lett. 2008; 446 (2-3): 147-50.

24. Рамирес JM, Folkow LP, Ludvigsen S, Ramirez PN, Blix AS. Медленные собственные колебания в толстых неокортикальных срезах устойчивых к гипоксии тюленей для глубокого ныряния. Неврология. 2011; 177: 35-42.

25. Чех-Дамал Н.Ю., Гайзелер С.Дж., Хофф М.Л., Шлип Р., Рамирес Дж.М., Фолков Л.П., BurmesterT. Роль гликогена, глюкозы и лактата в активности нейронов во время гипоксии в мозге тюленя с капюшоном (Cystophora cristata). Неврология.2014; 275: 374-83.

26. Mitz SA, Reuss S, Folkow LP, Blix AS, Ramirez JM, Hankeln T., Burmester T. Когда мозг начинает нырять: глиальный окислительный метаболизм может придать толерантность к гипоксии в мозгу тюленя. Неврология. 2009; 163 (2): 552-60.

27. Schneuer M, Flachsbarth S, Czech-Damal NU, Folkow LP, Siebert U, Burmester T. Нейроглобин тюленей и китов: свидетельства различающейся роли в головном мозге ныряльщиков. Неврология. 2012; 223: 35-44.

28.Yim HS, Cho YS, Guang X, Kang SG, Jeong JY, Cha SS, Oh HM, Lee JH, Yang EC, Kwon KK и др. Геном малых полосатиков и водная адаптация китообразных. Нат Жене. 2014; 46 (1): 88-92.

29. Фут А.Д., Лю Й., Томас Г.В., Винар Т., Альфольди Дж., Дэн Дж., Дуган С., Ван Элк К.Э., Хантер М.Э., Джоши В. и др. Конвергентная эволюция геномов морских млекопитающих. Нат Жене. 2015; 47 (3): 272-5.

30. Ясли ПР. Исследование структуры мозга китообразных с новой гипотезой о корреляции термогенеза с эволюцией большого мозга.Биол Рев Камб Филос Соц. 2006; 81 (2): 293-338.

31. Hoff MLM, Fabrizius A, Folkow LP, BurmesterT. Атипичное распределение изоферментов лактатдегидрогеназы в мозге тюленя с капюшоном (Cystophora cristata) может отражать биохимическую адаптацию к дайвингу. J. Comp Physiol B. 2016; 469 (3): 275-80.

32. Керем Д., Хаммонд Д.Д., Элснер Р. Уровни гликогена в тканях тюленя Уэдделла, Leptonychotes weddelli: возможная адаптация к асфиксической гипоксии. Comp Biochem Physiol A Comp Physiol.1973; 45 (3): 731-6.

33. Хочачка П.В., Бак Л.Т., Долл СиДжей, Лэнд СК. Объединяющая теория толерантности к гипоксии: молекулярная / метаболическая защита и механизмы спасения для выживания при недостатке кислорода. Proc Natl Acad Sci USA. 1996; 93 (18): 9493-8.

34. Lutz PL, Nilsson GE. Мозги позвоночных в пилотном свете. Respir Physiol Neurobiol. 2004; 141 (3): 285-96.

35. Van Ginneken VJT, Van Caubergh P, Nieveen M, Balm P, Van Den Thillart G, Addink A.Влияние воздействия гипоксии на энергетический обмен карпа обыкновенного (Cyprinus Carpio L). Neth J Zool. 1997; 48 (1): 65-82.

36. Фрейзер К.П., Хулихан Д.Ф., Лутц П.Л., Леоне-Каблер С., Мануэль Л., Бречин Дж. Полное подавление синтеза белка во время аноксии без задержки синтеза белка после аноксии у красноухой черепахи Trachemys scripta elegans. J Exp Biol. 2001; 204 (Pt 24): 4353-60.

37. Парк С., Матис К.В., Ли И.К. Физиологические роли аполипопротеина J / кластерина в метаболических и сердечно-сосудистых заболеваниях.Rev Endocr Metab Disord. 2014; 15 (1): 45-53.

38. Пуччи С., Маццарелли П., Миссироли Ф., Регина Ф., Риччи Ф. Нейрозащита: VEGF, IL-6 и кластерин: темная сторона Луны. Prog Brain Res. 2008; 173: 555-73.

39. Giannakopoulos P, Kovari E, French LE, Viard I., Hof PR, Bouras C. Возможная нейрозащитная роль кластерина при болезни Альцгеймера: количественное иммуноцитохимическое исследование. Acta Neuropathol. 1998; 95 (4): 387-94.

40.Тругак И.П., Гонос Е.С. Кластерин / аполипопротеин J при старении и раке человека. Int J Biochem Cell Biol. 2002; 34 (11): 1430-48.

41. Донато Р., Сорчи Г., Риуцци Ф., Аркури С., Бьянки Р., Броцци Ф., Тубаро С., Джамбанко И. Двойная жизнь S100B: внутриклеточный регулятор и внеклеточный сигнал. Biochim Biophys Acta. 2009; 1793 (6): 1008-22.

42. Heizmann CW, Fritz G, Schafer BW. Белки S100: структура, функции и патология. Front Biosci. 2002; 7: d1356-1368.

43. Донато Р., Кэннон Б.Р., Сорчи Дж., Риуцци Ф., Хсу К., Вебер Д.Д., Гечи К. Функции белков S100. Curr Mol Med. 2013; 13 (1): 24-57.

44. Елмо-Круз С., Морера-Фумеро А.Л., Абреу-Гонсалес П. S100B и шизофрения. Психиатрия Clin Neurosci. 2013; 67 (2): 67-75.

45. Aleksovska K, Leoncini E, Bonassi S, Cesario A, Boccia S, Frustaci A. Систематический обзор и метаанализ уровней циркулирующего S100B в крови при шизофрении.PLoS ONE. 2014; 9 (9), e106342.

46. Калия М., Коста ESJ. Биомаркеры психических заболеваний: современное состояние и перспективы на будущее. Обмен веществ. 2015; 64 (3 доп. 1): С11-15.

47. Ролвинк, Великобритания, Фигаджи А.А. Биомаркеры черепно-мозговой травмы при церебральных инфекциях. Clin Chem. 2014; 60 (6): 823-34.

48. Танака К., Мацумото Е., Хигашимаки Ю., Катагири Т., Сугимото Т., Сейно С., Кадзи Х. Роль остеоглицина в связи между мышцами и костью.J Biol Chem. 2012; 287 (15): 11616-28.

49. Ли А., Цзяо Х, Мунье Флорида, Шордерет Д.Ф., Яо В., Ивата Ф., Хаякава М., Канаи А., Чен М.С., Льюис Р.А. и др. Кристаллическая корнеоретинальная дистрофия Бьетти вызывается мутациями в новом гене CYP4V2. Am J Hum Genet. 2004; 74 (5): 817-26.

50. Хазра Т.К., Ков Ю.В., Хатахет З., Имхофф Б., Болдог И., Моккапати С.К., Митра С., Изуми Т. Идентификация и характеристика новой ДНК-гликозилазы человека для репарации повреждений, вызванных цитозином.J Biol Chem. 2002; 277 (34): 30417-20.

51. Доу Х, Митра С., Хазра Т.К. Ремонт окисленных оснований в пузырьковых структурах ДНК человеческими ДНК-гликозилазами NEIL1 и NEIL2. J Biol Chem. 2003; 278 (50): 49679-84.

52. Драганов Д.И., Тейбер Дж.Ф., Спилман А., Осава Ю., Сунахара Р., Ла Ду Б.Н. Человеческие параоксоназы (PON1, PON2 и PON3) представляют собой лактоназы с перекрывающимися и различными субстратными специфичностями. J Lipid Res. 2005; 46 (6): 1239-47.

53.Ми Х.Й., Муругануджан А, Касагранде Дж.Т., Томас П.Д. Масштабный анализ функций генов с помощью системы классификации PANTHER. Nat Protoc. 2013; 8 (8): 1551-66.

Отправьте следующую рукопись в BioMed Central, и мы поможем вам на каждом этапе:

• Мы принимаем предварительные запросы

• Наш инструмент выбора поможет вам найти наиболее подходящий журнал

• Оказываем круглосуточную поддержку клиентов

• Удобная онлайн-подача

• Тщательная экспертная оценка

• Включение в PubMed и все основные службы индексирования

• Максимальная видимость для ваших исследований

Отправьте рукопись на ■ v

www.biomedcentral.com/submit Central

Теннессианец из Нэшвилла, штат Теннесси, 8 ноября 2009 г. · W20

20W ВОСКРЕСЕНЬЕ, 8 НОЯБРЯ, 2009 ПЕРВЫЙ ЧЕТВЕРТЫЙ РОЛЛ ТЕННЕССИНА УИЛЬЯМСОНА AM. Айоделе Бабалола, Ава Багаеваджи, Натали Балмаседа, Джордон Бартлетт, Лорен Бартон, Колби Басор, Камила Бехарано, Кайли Бетчли, Далтон Бикел, Оливия Блер, Майя Болден, Анджело Бун, Мэдисон Бошер, Кейс Болдин, Рейлоргин Бранч, Дэвид Кристиансон, Сара Коул, Марисса Купер, Кэмерон Кураж, Паркер Кокс, Тейлор Кверко, Дилан Дозье, Калли Эллиотт, Нельсон Фабрициус, Эндрю Фахим, Ханна Фриман, Бенджамин Гарвин, Верена Гебраниус, Кэлан Гливз, Брэндан Год-Дард, Тайлер Хейли, Сара Харрис, Джексон Хартман, Эндрю Хелфенбергер, Джейк Хилл, Мередит Холмс, Майлз Холт, Дженна Хопкинс, Эшли Херст, Кайл Джеймс, Эмили Джонсон, Натали Джонс, Дженика Кеньон, Чейз Кэфхарт, Камилла Керр, Сидней Лейн, Бреннон Ли , Эстер Лим, Джордан Линк, Эмма Ливерс, Виктория Мир, Александра Морено, Куинн Нидхэм, Анналисса Нили, Эмили Нойхаус, Алексис Нью-сом, Destiny Odds, Осенний Оглетри, Тэмин Парк, Кейтлин Пейн, Уильям Пайпер, Миранда Рэнсон, Лара Редман , Кристина Роб эртс, Тоби Робертсон, Блейк Роксберри, Мэтью Соцерман, Джейсон Шефф, Джейк Шаус, Лорен Шрейдер, Эрл Шугарт, Нил Шукла, Джошуа Скелтон, Джонатан Смит, Пол Стайскал, Мэдисон Стивенс, Саванна Суматра, Мина Сваминатан, Эндрю Тейвислор, Соуминатан, Эндрю Тейвислор, Мэтью Тумлин, Рэйчел Вон, Эмили Векки, Морган Уолден, Реджинальд Уокер, Томас Уолш, Якоб Уайт, Сара Вифф, Ноа Вуд, Хи Ян, Хантер Йоско, седьмой класс: Эрика Агнью, Джейсон Аллен, Кейтлин Аллен, Джесси Арц, Девин Этвелл , Николас Бойд, Молли Балджер, Эмили Карлсон, Итан Карлсон, Хью Картер, Николас Кастор, Джи Чен, Ноа Чилверс, Эллисон Кларк, Перри Купер, Джейн Коппейдж, Джанель Дэвис, Шанайа Деруша, Блейк Дубберт, Мэдисон Дубберт, Лейси Дювалл, Кали Эджуорт, Крис-тен Эллиотт, Джозеф Эрнст, Дэниел Эррико, Моника Фалтас, Майкл Флетчер, Чендлер Флинт, Уильям Фроули, Эндрю Гейттенс, Мэдисон Гаргано, Брайден Гаррисон, Райан Гелтч, Оливия Граул, Уильям Гроссон, Ричард Гири, Трейс Халперн, Диллион Хардисон, Дж. Остин Харрелл, Мэдлин Хастингс, Мэтью Херман, Хизер Эрнандес, Закари Эрнандес, Меган Хёффлер, Джессика Ховард, Сидни Хаддлстон, Скотт Хадсон, Максвелл Хамфрис, Райан Дженнингс, Гарима Джетвани, Кэтрин Джонсон, Грейслин "Пенни Сэйн" ! " Налоговый кредит до 1500 долларов на нашу безрезервуарную воду Попрощайтесь с более высокими затратами на электроэнергию и резервуарами для хранения воды большой емкости с компактным энергоэффективным газовым водонагревателем без резервуаров.Установленные экспертами Benjamin Franklin Plumbing, вы значительно сэкономите на счетах за электроэнергию за счет повышения эффективности и горячего водоснабжения по запросу. Для обслуживания звоните 615-791-0338. Бенджамин Франклин Сантехника, с гарантией «Если есть задержка, мы платим вам!» 6: 7? L-0338 j 'СКИДКА $ 300! j '$ 2bo ВЫКЛ. j Безбаковый водонагреватель. Скидка 50 долларов. Купоны на очистку слива не должны использоваться с другими предложениями. www.benfranklinplumbing.com mjamin ПУНКТУАЛЬНЫЙ САНТЕХНИК В случае задержки мы платим вам! Джонс, Сиарра Келлог, Холден Кинканнон, Габриэль Кирби, Уитни Киркланд, Лекси Клюгерман, Анна Краус, Джейён Ли, Карл Лейтнер, Анджела Ли, Кеннет Литтлтон, Морган Луни, Маура Лоудер, Чендлер Мэтлок, Коллин МакАртур, Меган Маккартер, Закари МакКоннелл, Элли МакКроу, Брайан Маккей, Мэттью Моельманн, Александрия Мончелли, Миша Морар, Маури Манси, Тайлер Ньюси, Ки Омели, Александр Омели Кайли Филлипс, Джейкоб Полоуэй, Эллен Рэдклифф, Сварна Радхакришнан, Келси Райли, Джаред Роуз, Саманта Розелл, Брианна Рак, Оуэн Шерлог, Колин Шин, Мёнги Шин, Милена Шафф, Дэвид Старк, Кейси Стюарт, Меган Стюлик, Меганск, Меган Стюарт Теп-манивонг, Тайлер Томпсон, Джери Тиммонс, Джошуа Таунсенд, Тами Траунг, Чендлер Трумэн, Дженнифер Уолкер, Уильям Уэллс, Мэтью Уайт, Эндрю Уильямс, Мэтью Уишарт, Кейтлин Райт, Кори Ву, Демин Завити, Тин Чжао.Восьмой класс: Уильям Алвис, Натали Балкон, Хейли Баллон, Витас Бхаргава, Уинстон Богл, Обезимнака Бомс, Уильям Бро, Кристофер Бриджес, Мишель Буитраго, Александрия Картер, Тиана Кастильо, Лорен Кастор, Шарлотта Чандлер, Ханна Джу Чанганс, Ханна Джу Чанганс Кейтлин Комптон, Кайсин Ковэрсон, Дастин Козарт, Трент Кроутерс, Изабелла Дэвис, Эндрю ДеБаттиста, Кайла Дикинсон, Колби Дрейк, Саманта Эджертон, Мэттью Эллиотт, Лили Эмерсон, Джонатан Фейсер, Джейкоб Фроули, Майлс Фуллен, Изабелла Гебелла, Изабелла Гебелла Алексис Гилберт, Чейз Геринг, Мэри Гленн Густри, Коллин Госс, Картер Грин, Клейтон Хейл, Джессика Гамильтон, Кен Харасава, Коннор Хинсон, Эндрю Ханикатт, Лэндри Дженкинс, Стивен Дженсен, Вен-нела Кандипати, Калеб Кин, Эллисон Крумнауэр, Елена Куйкендалл, Джейкоб Лоуренс, Кеннеди Лит, Чарльз Ли, Хи Ын Ли, Рэйчел Ли, Артур Лю, Ияо Лю, Пэйтон Логан, Элизабет Люк, Со Мэн, Алексис Мартин, Эш-Ли МакКлари, Алисса Миллер, Мелисса Миллер, Кеннеди Мур, Джошуа Муччи, Нат-суки Накаяма, Брэдли Нойхаус, Сара Ноэль, Кейс Оффутт, Сидней Овертон, Пол Парк, Сэм Парк, Грегори Проу, Джесси Рагланд, Картер Рэнсон, Лэндон Ризонер, Кайла Райс, Николас Ричардсон, Саванна Холанна Ричардсон Ричмонд, Мишель Самес, Сара Шульц, Келси Шарбер, Сэмюэл Ширли, Лорен Шулер, Эллисон Симс, Джексон Слоан, Дэниел Смит, Лорен Смит, Брайс Свенсон, Эрн-Бенджамин Франклин - 2009 n Очистка воды нагревателей Скидка 50 долларов на любой ремонт сантехники; j line Томас, Кортленд Томпсон, Линдси Тодд, Дженнифер Толман, Логан Трент, Пол Троян, Алек Велес, Ронделл Уокер, Тейлор Уоррен, Мэллори Уилкер-сон, Аарон Уильямс, Эми Уильямс, Энди Уильямс, Джеймс Янг, Мэдлин Янг.Лесной средний СПИСОК ПРИНЦИПАЛА Шестой класс: Эмми Аллен, Явин Алвис, Анхель Асир-ватам, Геон Су Бэ, Джейкоб Бэхман, Виктория Болл, Киран Барретт, Джереми Бенджамин, Мег Бобо, Джесси Бун, Брэди Боув, Алекс Бринкманн, Трэвис Бёрхарт, Кристин Каллахан, Карли Кантрелл, София Черино, Молли Чой, Лорен Чианчиоло, Люк Чианциоло, Мэрайя Кумбс, Кортни Крэйвен, Джек Дамс, Ник Даушот, Кэтрин Дэвид, Таннер Дэвис, Тони Динг, Майкл Дипаскале, Дрю Дадли, Эман Дуррани Эби, Мэгги Эггинк, Хейли Эрик-сон, Захари Эриксон, Чарли Гэбриэль, Коллин Хэмвей, Кэролайн Хизерли, Николас Хеллервик, Рейган Хоман, Карли Хорват, Джош Хауэр-тон, Дрю Хьюз, Остин "ЕСЛИ ВАМ НРАВИТСЯ СДЕЛКА, ВЫ ПОЛУЧИТЕ Обеденный стул LOVE Costa del Mar Bentwood можно сравнить с 79 долларами.99 Essex of Franklin: 1113 Murfreesboro Rd, Suite 204, Franklin, TN 37064 (расположен на Уильямсон-сквер) Телефон: 615-591-7671 Открыто с понедельника по субботу с 10:00 до 19:00 и в воскресенье с 12:00. 18:00. Чтобы узнать о других местах и ​​получить дополнительную информацию, посетите нас в Интернете по адресу http: www.essexretailoutlet.com. im g Депозитные сертификаты IFl. 17-месячный депозитный сертификат на остатки на балансе 1000 долларов и более. 27-месячный депозитный сертификат на остаток на 1000 долларов и более. CD FDIC-член действует только для средств, которые в настоящее время не находятся на депозите в любом офисе BancorpSouth.Минимальный депозит: 1000 долларов США. Максимальный депозит: 250 000 долларов США. Не годится ни с одним другим предложением. Существенный штраф за досрочное снятие. Ставка для 17-месячного CD составляет 1,75 годовой процентной доходности. Ставка для 27-месячного CD составляет 2,25 годовой процентной доходности. Цены действительны по состоянию на 8 ноября 2009 г. Цены могут быть изменены без предварительного уведомления. Только для индивидуальных клиентов. Никаких коммерческих, банковских, общественных фондов или брокерских депозитов. Законодательство, разрешающее увеличение лимитов страхового покрытия вкладов, предусматривает увеличение страхового покрытия до 250 000 долларов США до 31 декабря 2013 года.Джетт, Трент Джонс, Кэти Ккомт, Келси Лэмб, Беннетт Лэйден, Дастин Лин, Тай Логан, Эндрю Лутгенс, Мартин Мэтсон, Клейтон Мэйфилд, Лейси Маккей, Джонатан Миллер, Аманда Мизерокки, Спинни Майз, Эшли Морган, Лиам Маккала, Кели Нэнс, Эллисон Ноффсингер, Кэмерон О'Нил, Момоне Одзава, Энди Парк, Джонг Парк, Мэттью Перес, Моника Пинори, Стефани Портанова, Сидней Расмуссен, Калли Ричардсон, Сара Розенталь, Лея Сэнфорд, Брок Шенвальд, Кертис Шунк, Хейган Северанс, Кейс Ши, Дэвис Шоенер, Мэттью Сконечны, Эмили Стадник, Анна Стивенс, Андреа Суйтер, Коннор Салливан, Сапна Суреш, Алиса Торино, Эмбер ван Золинген, Сара Ваггенер, Клэр Уокер, Морган Ванг, Генри Уэллс, Тайлер Уильямс, Саваян Уиллс, Савайанна Уиллс , Эмили Уайзман, Джек Уайли, Бекка Завес.Седьмой класс: Нили Аарон, Дженни Альбертсон, Зак Аллегра, Джослин Эндрюс, Рейган Энтони, Маккензи Этвуд, Деван Байджал, Бейли Белчер, Ханна Белчер, Сэм Белчер, Бреннан Бодин, Виктория Брис- Коллекция Карсон Loveseat по цене 199,99 доллара. Брофи, Калеб Браун, Кейт Браун, Салли Бак, Сэм Картер, Сабрина Кейси, Остин Читвуд, Сара Конли, Эмили Каллум, Лорен Каннингем, Габби Дент, Брайс Дентон, Рейган Дил, Мэтью Дудас, Митчелл Данн, Джейкоб Элрод, Эбби Эванс, Коннор Филипович, Элли Флинн, Сабрина Флори, Элиот Форстер-Бенсон, Райан Галлахер, Николас Глисон, Энди Гордон, Эмили Грэмс, Мариса Ган-терт, Джесси Гамильтон, Макс Хаммер, Эшли Харман, Дитон Хильдабранд, Джошуапер Хонггер, Дэниел Хопфенс , Мисси Хант, Джоси Хатчинсон, Мэрайя Айви, Джэвон Чон, Джордан Джуэлл, Стивен Карл, Валерия Карнаух, Оливия Кеффер, Мэдди Кинг, Мэтт Кирш, Сара Кляйн-Крахт, Линдси Нотт, Анна Костуик, Дженнифер Ли, Элизабет Ли, Молли Ленихан , Джин Ли, Джордан Лоу, Шелб и Лукас, Мередит Луцак, Срути Мадху, Стивен Маркончини, Элли Марквардт, Дункан МакКарри, Гарретт Монтгомери, Эйслинн Мерфи, Бейли Мерфи, Джессика Майерс, Лорен Майерс, Дженна Нам, Кристофер Никастро, Хейли Оливер, Уилл Паркей Sloan НАШ МАГАЗИН "E Costa del Mar Bentwood Counter Stool по сравнению с 99 $.99 Краткосрочные и долгосрочные сроки погашения CD В течение ограниченного времени BancorpSouth предлагает краткосрочные и долгосрочные варианты годовой процентной ставки по депозитным сертификатам. Депозитные сертификаты с федеральным страхованием застрахованы Федеральной корпорацией по страхованию вкладов на сумму до 250 000 долларов. Сила, стабильность, уверенность BancorpSouth превосходит требования FDIC к банку, который должен быть классифицирован как «хорошо капитализированный», что является наивысшей классификацией FDIC по капитализации. BancorpSouth отказался от участия в программе государственных закупок капитала в рамках программы TARP, отчасти из-за исторически сильной капитальной позиции компании.Удобное расположение Чтобы найти ближайший к вам филиал BancorpSouth, позвоните нам по телефону 888-797-771 1 или посетите bancorpsouth.com, чтобы воспользоваться нашим удобным поиском местоположения на веб-сайте. БэнкорпСаут Рэдфорд, Оливия Рансин, Джеффи Рейн, Мэдисон Райф, Итан Райли, Рэйчел Розенфельд, Джесси Сампселл, Коллин Шей, Кейт Скардон, Гаррет Стэтум, Кэрри Стоукс, Эллен Сударшан, Скай Саттон, Алекс, Тесс Томас, Лилли ван Солинген , Аканэ Ватан-абэ, Эй Джей Вей, Эмма Уоттон, Микаэла Уит, Бейли Уиттен, Стэнли Сян, Арьяна Явари, Джеффри Чжан.Восьмой класс: Брук Андерсон, Кимберли Бартоломью, Джейкоб Берекса, Росс Бердсонг, Тейлор Бриггс, Эмили Бирн, Бен Чен, Кэролайн Корр, Ханна Крессман, Мелисса Дэнли, Блейк Диггс, Оливия Донахью, Лаура Эванс, Джонас Фейн, Абигейл Готт , Райган Грир, Ирис Хао, Кармен Джексон, Тимоти Цзян, Виньеш Кумар, Натан Лейн, Сара Лейден, Коллин Лейрер, Трей Логан, Грейси Маротта, Кэтрин Оукс, Акаш Оза, Сейнн Парк, Даниэль Рейнс, Келли Рэйнс, Энни Рефф, Морган Ричардсон, Райан Смелцер, Джулия Стаффер, Джошуа Стори, Меган Сазерленд, Грейс Такер, Дэниел Троу, Конни Цай, Итан Уайт, Сэмюэл Винсор, Карен Янг.Покупайте ОГРОМНУЮ экономию намного ниже розничной на телевизорах высокой четкости, электронике, бытовой технике, посуде, домашнем декоре, одежде, инструментах, игрушках и многом другом! Кресло для отдыха Carson Collection по цене 179,99 долларов США. Каркас кровати Laguna Queen с рельсами - по цене 199,99 долларов США (матрас и подушки продаются отдельно). Доверяйте там, где вы находитесь, bancorpsouth.com t

статей журнала | Полимеры и биоматериалы

1.Купер, С. Л., Р. Д. Эндрюс и др., "Холодное волочение стеклообразных полимеров", Trans. Soc. Реология, 9, 446-447 (1965).

2. Купер, С. Л. и А. В. Тобольский, "Исследование механических свойств полиимидов", Textile Res. J., 35, 1110–1115 (1965).

3. Сперлинг, Л. Х., С. Л. Купер, А. В. Тобольский, "Эластомерные и механические свойства полимет-карбораниленсилоксанов", J. Appl. Polymer Sci., 10, 1725-1735 (1966).

4. Купер С.Л. и А. В. Тобольский, "Вязкоупругое поведение сегментированных эластомеров", Textile Res. J., 36, 800-803 (1966).

5. Купер, С. Л. и А. В. Тобольский, "Свойства линейных эластомерных полиуретанов", J. Appl. Polymer Sci., 10, 1837-1844 (1966).

6. Купер, С. Л. и А. В. Тобольский, "Аномальное снижение модуля упругости из-за сшивки", J. Appl. Polymer Sci., 11, 1361-1369 (1967).

7. Купер, С. Л., А. Дж. Маккиннон, Д.С. Преворсек, "Морфологические изменения скрученных моноволокон из нейлона 66 и полиэтилентерефталата", J. Polymer Sci., A-1, 6, 353-361 (1968).

8. Купер, С. Л., А. Дж. Маккиннон, Д. С. Преворсек, "Структура скрученных нейлоновых 6 и поли (этилентерефталатных) волокон", Textile Res. J., 38, 803-810 (1968).

9. Купер, С. Л., Д. С. Хух и В. Дж. Моррис, «Смягчение напряжений в сшитых блок-сополимерных эластомерах», I&EC, Prod. Res. and Dev., 7, 248-251 (1968).

10. Флумерфельт, Р. В., М. В. Пиерик, С. Л. Купер и Р. Б. Берд, "Обобщенный плоский поток Куэтта неньютоновской жидкости", Индиана и Инж. Chem. Основы, 8, 354-357 (1969).

11. Купер С. Л., "Свойства набухших блок-сополимерных эластомеров", J. Polymer Sci., A-1, 7, 1765-1772 (1969).

12. Эстес, Г. М., Р. В. Сеймур, Д. С. Ха и С. Л. Купер, "Механические и оптические свойства блок-сополимеров. I. Полиэфир-уретаны", Polymer Engr.and Sci., 9, 383–387 (1969).

13. Эстес, Г. М., Д. С. Хух и С. Л. Купер, "Механические и оптические свойства блок-полимеров. II. Полиэфир-уретаны", Блок-полимеры, под ред. С. Л. Аггарвал, Plenum Press, NY, 225-236 (1970).

14. Коутски, Дж. А., Н. В. Хиен и С. Л. Купер, «Некоторые результаты исследований под электронным микроскопом блок-сополимеров полиэфир-уретан и полиэфир-уретан», J. Polymer Sci., B8, 353-359 (1970).

15. Сеймур, Р.W., G. M. Estes и S. L. Cooper, "Инфракрасные исследования сегментированных полиуретановых эластомеров. I. Водородная связь", Macromolecules, 3 (5), 579-583 (1970).

16. Маркс, К. Л., Дж. А. Коутски, С. Л. Купер, "Морфология сополимеров бутадиен-метакриловая кислота", J. Polymer Sci., B9, 167-171 (1971).

17. Эстес, Г. М., Р. В. Сеймур и С. Л. Купер, "Инфракрасные исследования сегментированных полиуретановых эластомеров. II. Инфракрасный дихроизм", Macromolecules, 4 (4), 452-457 (1971).

18. Ха, Д. С. и С. Л. Купер, "Динамические механические свойства полиуретановых блочных полимеров", Polym. Engr. Sci., 11 (5), 369-376 (1971).

19. Сеймур, Р. В. и С. Л. Купер, "Исследования полиуретановых блок-полимеров методом ДСК", J. Polymer Sci., PT. Б., 9, 689-694 (1971).

20. Хиен, Н. В., С. Л. Купер, Дж. А. Коутски, "Морфология и свойства скрученных полимерных волокон", J. Macromol. Физ.-мат. Науки, В6, (2), 343-364 (1972).

21.Мац, Д. Дж., В. Г. Гулдемонд и С. Л. Купер, «Замедленная текучесть стеклообразных полимеров», J. Polymer Sci., PT. А2, 10, 1917-1930 (1972).

22. Сеймур Р. В., Г. М. Эстес, Д. С. Хух и С. Л. Купер, "Реооптические исследования полиуретановых блочных полимеров", J. Polymer Sci., PT. A2, 10, 1521-1527 (1972).

23. Сеймур, Р. В., С. Л. Купер, "Термический анализ полиуретановых блочных полимеров", Macromolecules, 6, 48-53 (1973).

24. Маркс, К.Л., Д. Ф. Колфилд и С. Л. Купер, "Морфология иономеров", Macromolecules, 6, 344-353 (1973).

25. Маркс К. Л. и С. Л. Купер, «Иономеры полиэтилена: эффект отжига», Die Makromol. Chemie, 168, 339-344 (1973).

26. Мац, Д. Дж., У. Г. Гулдемонд и С. Л. Купер, "Податливость поликарбоната и полисульфона при ползучести и растяжении-деформации", Polym. Engr. Sci., 13, 300-307 (1973).

27. Нг, Х. Н., А. Э. Аллегрецца, Р. В. Сеймур и С.Л. Купер, "Влияние размера сегмента и полидисперсности на свойства полиуретановых блочных полимеров", Polymer, 14, 255-261 (1973).

28. Сеймур, Р. В., А. Э. Аллегрецца и С. Л. Купер, "Исследования сегментарной ориентации блок-полимеров: I. Полиуретаны, связанные водородом", Macromolecules, 6, 896-902 (1973).

29. Маркс К. Л. и С. Л. Купер, "Кристалличность иономеров", J. Macromolecular Sci.-Phys., B9 (1), 19-33 (1974).

30. Юроти, Дж.Б. и С.Л. Купер, "Свойства уплотненного аморфного полистирола", J. Appl. Polymer Sci., 18, 897-911 (1974).

Аллегрецца А.Э., Сеймур Р.В., Х.Н. Нг и С.Л. Купер, "Исследования сегментарной ориентации блок-полимеров: II. Полиуретаны, не связанные водородными связями", Polymer, 15, 433-440 (1974).
Шен, М., У. Мехра, М. Нииноми, Дж. Т. Коберштейн, С. Купер, "Морфологические, реооптические и динамические механические исследования полукристаллического блок-сополимера", J. Appl. Phys., 45, 4182-4189 (1974).

33. Blumentritt, B.F., B.T. Ву, С. Купер, "Механические свойства ориентированных прерывистых армированных волокном термопластов: I. Однонаправленная ориентация волокна", Polym. Engr. Sci., 14, 633-640 (1974).

34. Blumentritt, B.F., B.T. Ву, С. Купер, "Механические свойства ориентированных прерывистых армированных волокном термопластов: II. Случайное в плоскости ориентации волокна", Polym. Engr. Sci., 15, 428-436 (1975).

35. Блюментрит, Б.Ф., Б. Ву, С. Купер, "Разрушение ориентированных термопластов, армированных короткими волокнами", Композиты, 6, 105-114 (1975).

36. Koberstein, J.T., M.C. Шен, С.Л. Купер, "Тонкие полимерные пленки для инфракрасной спектроскопии", Rev. Sci. Instr., 46, 1639–1641 (1975).

37. Muzykewicz, K.J., E.B. Кроуэлл-младший, А.П. Харт, М. Шульц, К.Г. Хилл-младший и С.Л. Купер, «Тесты времени адгезии тромбоцитов и контактной активации на мембранах из ацетата целлюлозы с покрытием Hema», J.Биомед. Матер. Res., 9, 486-499 (1975).

38. Иглз, Дана Б., Б.Ф. Блюментрит и С.Л. Купер, "Межфазные свойства термопластов, армированных волокном Кевлар-49", J. Appl. Polymer Sci., 20, 435-445 (1976).

39. Lilaonitkul, A., J.C. West, and S.L. Купер, «Свойства политетраметиленоксида-политетраметилентерефталатных блочных полимеров», J. Macromol. Sci.-Phys., B12, 563-597 (1976).

40. Schroeder, L.R. и С. Купер, "Диссоциация водородных связей в полиамидах", J.Прил. Phys., 47, 4310-4317 (1976).

41. Лилаониткул А. и С.Л. Купер, "Свойства полиэфир-полиэфирных термопластичных эластомеров", Rubber Chem. and Tech., 50, 1-23 (1977).

42. Хаббелл, Д.С. и С.Л. Купер, "Физические свойства и морфология смесей полимеров поли-е-капролактона", J. Appl. Polymer Sci., 21, 3035-3061 (1977).

43. Хаббелл, Д.С. и С.Л. Купер, «Сегментная ориентация в смесях поли-е-капролактона с поливинилхлоридом и нитроцеллюлозой», J.Polymer Sci., Polym. Phys. Ed., 15,
, 1143-1161 (1977).

44. Barber, T.A., T.R. Матис, Дж.В.Иленфельд, С.Л. Купер и Д.Ф. Мошер, "Краткосрочные взаимодействия крови с полимерными материалами сосудистого трансплантата: адсорбция белка, образование тромба и отложение лейкоцитов", Scanning El. Микроскопия, Symp.
Т. II, 431-440 (1978).

45. Ihlenfeld, J.V., T.R. Матис, Т. Барбер, Д.Ф. Мошер, С.Дж. Апдайк, А.П. Харт, Л.М. Риддл, С.Л. Купер, «Временное отложение тромба на полимерных биоматериалах: роль фибронектина в плазме», Trans.Являюсь. Soc. Артиф. Интер. Органы, 24, 727-734 (1978).

46. Срихатрапимук В.В. и С. Купер, "Инфракрасный термический анализ полиуретановых блочных полимеров", J. Macromol. Sci.-Phys., B15, 267-311 (1978).

47. Ihlenfeld, J.V. and S.L. Купер, «Переходная адсорбция белка in vivo на полимерных биоматериалах», J. Biomed. Матер. Res., 13, 577-591 (1979).

48. Ihlenfeld, J.V., T.R. Матис, Л.М.Риддл, С.Л. Купер, "Измерение временного отложения тромба на полимерных материалах", Thrombosis Res., 14, 953-967 (1979).

49. McBride, J.S., T.A. Массаро и С. Купер, "Диффузия газов через полиуретановые блок-полимеры", J. Appl. Polymer Sci., 23, 201-214 (1979).

50. Barber, T.A., L.K. Ламбрехт, Д. Мошер, Б. Янг, Дж.В.Иленфельд, С.Л. Купер, «Влияние белков сыворотки на тромбоз и прилипание лейкоцитов к полимерным поверхностям», Scanning El. Микроскопия, Symp. Vol. III, 881-890 (1979).

51. Лилаониткул, А. и С.Л. Купер, "Исследования диэлектрической релаксации сегментированных полиэфиров", Macromolecules, 12, 1146-1156 (1979).

52. Hesketh, T.R., J.W.C. Ван Богарт и С. Купер, "Дифференциальный анализ сканирующей калориметрии морфологических изменений в сегментированных эластомерах", Polymer Engr. and Sci., 20, 190-197 (1980).

53. Ван Богарт, J.W.C., А. Лилаониткул и С.Л. Купер, "Морфология и свойства блок-сополимеров с коротким сегментом", J. Macromol. Sci.-Phys., B17, 267-301 (1980).

54. Cooper, S.L. и А. Лилаониткул, "Свойства термопластичных полиуретановых эластомеров", Adv. в Урете. Sci. and Technol., 8, 163-183 (1979).

55. Яруссо, Д.Дж., Г.С. Кнапп, П. Георгопулос, С.Л. Купер, "EXAFS-анализ катионной среды в сульфированных иономерах полистирола", J. Polymer Sci., Polymer Letters, 18, 557-562 (1980).

56. Валланс, M.A., D.C. Faith III and S.L. Купер, «Диэлектрическая спектроскопия на суб-звуковых частотах - два метода в сравнении», Rev.Sci. Ин-т., 51 (10), 1338-1341 (1980).

57. Ван, Карл Б. и С.Л. Купер, "Морфология и свойства смесей поливинилхлорид-полиуретан", J. Appl. Polymer Sci., 26, 2989-3006 (1981).

58. Ван Богарт, J.W.C., D.A. Блюмке и С. Купер, "Вызванные отжигом морфологические изменения в сегментированных эластомерах", Polymer, 22, 1428-1438 (1981).

59. Ван Богарт, J.W.C., P.E. Гибсон и С. Купер, "Морфология термоустойчивых сегментированных эластомеров", Rubber Chem.and Technol., 54, 963-975 (1981).

60. Lambrecht, L.K., B.R. Янг, Д.Ф. Мошер, А.П. Харт, У.Дж. Хаммар и С.Л. Купер, "Временное отложение тромба на полиэтилене, покрытом хитозаном и гепарином", Trans. Являюсь. Soc. Артиф. Интер. Органы, 27, 380–385 (1981).

61. Hwang, K.K.S., C.Z. Ян и С. Купер, "Свойства полиэфир-полиуретановых цвиттериономеров", Polym. Engr. Sci., 21, 1027-1036 (1981).

62. Лела, доктор медицины, Р.Дж. Стаффорд, Л. Ламбрехт, Б.Р. Янг и С.Л. Купер, "Литой против экструдированного биомера для биомедицинских приложений", Пер. Являюсь. Soc. Артиф. Междунар. Органы, 27, 504-510 (1981).

63. Янг, Б.Ф., Л.К. Ламбрехт, Д.Ф. Мошер и С. Купер, "Белки плазмы: их роль в инициировании отложения тромбоцитов и фибрина на биоматериалах", Adv. в Chem. Сер., 199, амер. Chem. Soc., Вашингтон, округ Колумбия, 317-349 (1982).

64. Мармур А. и С.Л. Купер, "Модель отложения и отделения белков и тромбоцитов на биоматериалах", J.Коллоид и Интерф. Sci., 89, 458-465 (1982).

65. Кошиба, М., К.К.С. Хван, С.К. Фоли, Д.Дж. Яруссо и С. Купер, "Свойства отверждаемых УФ акрилатов полиуретана", J. Mater. Sci., 14, 1447-1458 (1982).

66. Wilson, R.S., M.G. Гуд, доктор медицины Лела и С.Л. Купер, "Ex-vivo устройство с узкой щелью для оценки взаимодействия крови и материала", Пер. Являюсь. Soc. Артиф. Интер. Органы, 28, 420-425 (1982).

67. Янг, Б. Р., М. Дж. Дойл, В.Э. Коллинз, Л.К. Ламбрехт, К.А. Джордан, Р. Альбрехт, Д.Ф. Мошер и С. Купер, «Влияние тромбоспондина и других белков а-гранул тромбоцитов на искусственный поверхностный тромбоз», Trans. Являюсь. Soc. Артиф. Интер. Органы, 28, 498-503 (1982).

68. Ван Богарт, J.W.C., P.E. Гибсон и С. Купер, "Взаимосвязи структуры и свойства в поликапролактон-полиуретанах", J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 21, 65-95 (1983).

69. Лела, доктор медицины, Л.К. Ламбрехт, Б.Р. Янг и С.Л. Купер, "Физико-химические характеристики и переносимость крови in-vivo литого и экструдированного биомера", J. Biomed. Матер. Res., 17, 1-22 (1983).

70. Ван, Карл Б. и С.Л. Купер, "Морфология и свойства смесей поли (винилхлорид) -поли (бутадиен-соакрилонитрил)", J. Polymer Sci., Polymer Phys. Ed., 21, 11-27 (1983).

71. Ян, К.З., К.К.С. Хван и С.Л. Купер, "Морфология и свойства полибутадиеновых и полиэфир-полиуретановых цвиттериономеров", Die Makromolekulare Chemie, 184, 651-668 (1983).

72. Миллер, Дж. А., К. К.С. Хван и С.Л. Купер, "Свойства аниономеров полиэфир-полиуретан", J. Macromol. Sci.-Phys., B22, 321-341 (1983).

73. Pan, H.K., D.J. Яруссо, Г.С.Кнапп, С.Л. Купер, "EXAFS-исследования иономеров нафиона никеля", J. Polymer Sci., Polym. Phys. Ed., 21, 1389-1401 (1983).

74. Wang, C.B. and S.L. Купер, "Морфология и свойства сегментированных полиэфирных полиуретанмочевин", Macromolecules, 16, 775-786 (1983).

75. Belfiore, L.A., P.M. Хенрикс, Д.Дж. Масса, Н. Зумбулядис, В.П. Ротвелл и С. Купер, "Молекулярная динамика систем поликарбонат-разбавитель: применение твердотельного ЯМР углерода 13 высокого разрешения", Macromolecules, 16, 1744-1753 (1983).

76. Belfiore, L.A. and S.L. Купер, «Взаимодействие поликарбоната бисфенола-A с разбавителем: исследования ЯМР углерода-13 с высоким разрешением в растворе и в твердом состоянии», J. Polymer Sci., Polymer Phys. Ed., 21, 2135-2157 (1983).

77. Speckhard, T.A., G. ver Strate and S.L. Купер, "Свойства полиизобутилен-полиуретановых блок-сополимеров: I. Макрогликоли от озонолиза изобутилен-изопренового сополимера", Polymer Engr. and Sci., 23, 337-349 (1983).

78. Яруссо, Д.Дж. и С. Купер, "Микроструктура иономеров: интерпретация данных малоуглового рентгеновского рассеяния", Macromolecules, 16, 1871-1879 (1983).

79. Валланс, М.А., А.С. Юнг и С.Л. Купер, "Диэлектрическое исследование области стеклования в сегментированных сополимерах простого полиэфира и уретана", Colloid and Polymer Science, 261, 541-554 (1983).

80. Лела, доктор медицины, C.A. Джордан, M.E. Pariso, L.K. Lambrecht, S.L. Купер и Р. Альбрехт, "Морфологические изменения, происходящие во время тромбообразования и эмболизации биоматериалов в шунте серии Ex-vivo у собак", Сканирующая электронная микроскопия, 1983 (4), стр. 1983-1994.

81. Янг, Б.Р., Л.К. Ламбрехт, Р.М. Альбрехт, Д.Ф. Мошер и С. Купер, «Взаимодействие тромбоцитов и белков на границах раздела кровь-полимер в модели испытаний на собаках», Trans. Являюсь. Soc. Артиф. Интер. Органы 29, 442-446 (1983).

82. Lambrecht, L.K., M.D. Lelah, R.M. Альбрехт и С. Купер, "Оценка отложения тромба на полимерных биоматериалах в новой модели шунта серии Ex-vivo у субчеловеческих приматов", Trans. Являюсь. Soc. Артиф. Интер. Органы, 29, 194–199 (1983).

83. Pan, H.K., D.J. Яруссо, Г.С. Кнапп, М. Пинери, А. Мигер, J.M.D. Коуи и С. Купер, "EXAFS и мессбауэровские исследования иономеров нафиона, нейтрализованных железом", J. Chem. Phys., 79 (10), 4736-4745 (1983).

84. Goodman, S.L., M.D. Lelah, L.K. Lambrecht, S.L. Купер и Р. Альбрехт, "Отложение тромбоцитов на поверхности полимеров in vitro и ex vivo", сканирующая электронная микроскопия, Symp. Vol. 1984 (1), стр. 279-290.

85. Belfiore, L.A., P.M. Хендрихс и С. Купер, «Влияние разбавителя на подвижность карбоната в поликарбонате бисфенола-А в твердом состоянии», Polymer, 25, 452-458 (1984).

86. Лела, доктор медицины, Л.К. Ламбрехт и С. Купер, "Шунт для собак серии Ex-vivo для оценки отложения тромба на поверхности полимера", J. Biomed. Матер. Res., 18,
, 475-496 (1984).

87. Hwang, Kirk K.S., D.J. Хемкер и С. Купер, "Фазовые диаграммы и морфология твердого сегмента уретановой модели и полиэфирных макрогликолей", Macromolecules, 17,
307-315 (1984).

88. Фалабелла, Р., Р.Дж. Фаррис и С. Купер, "Основные уравнения ориентации в полиуретановых эластомерах", J.Реология, 28, 123–154 (1984).

89. Miller, J.A., S.L. Купер, К. Хан и Г. Прукмайр, "Малоугловое рассеяние нейтронов полиуретановым блок-сополимером", Macromolecules, 17 1063-1071 (1984).

90. Hwang, K.K.S., S.B. Лин, С.Ю. Цай и С. Купер, "Свойства полиуретановых олигомерных смесей по сравнению с высокомолекулярными блок-сополимерами", Polymer, 25, 947-955 (1984).

91. Vallance, M.A. and S.L. Купер, "Микроструктура в блок-сополимерах с линейной конденсацией: подход к моделированию", Macromolecules, 17, 1208-1219 (1984).

92. Hwang, K.K.S., G. Wu, S.B. Линь и С.Л. Купер, "Синтез и характеристика модельных соединений MDI-бутандиолуретана", J. Polymer Sci., Polym. Chem. Ed., 22, 1677-1697 (1984).

93. Пан, Х.К., Г.С. Кнапп, С.Л. Купер, "EXAFS и XANES Исследования Zn + 2 и Rb + 1 нейтрализованных перфторированных иономеров", Colloid and Polymer Sci., 262, 734-746 (1984).

94. Belfiore, L.A. and S.L. Купер, «Влияние смешивания на подвижность полистирола в диапазоне средних килогерц в смесях стекловидного полистирола и разбавителя», Polymer, 25, 645-649 (1984).

95. Спекхард, Т.А., К.К.С. Хван, К.З. Янг, В.Р. Лаупан и С.Л. Купер, "Свойства сегментированных полиуретановых цвиттериономерных эластомеров", J. Macromol. Наука и физика, B23, 175-199 (1984).

96. Hwang, K.K.S., T.A. Спекхард и С. Купер, "Свойства ионизации полиуретановых аниономеров посредством бимолекулярного нуклеофильного замещения уретанового водорода", J. Macromol. Sci.-Phys., B23, 153-174 (1984).

97. Яруссо, Д.Дж., Ю.С. Дин, Х.К. Пан, С.Л. Купер, "EXAFS-анализ структуры иономерных микродоменов", J. Polymer Sci., Polym. Phys. Ed., 22, 2073-2093 (1984).

98. Беллиссимо, Дж. А. и С. Купер, "Инфракрасные спектроскопические исследования с преобразованием Фурье адсорбции белков плазмы при четко определенных условиях потока", Пер. Являюсь. Soc. Артиф. Int. Органы, 30, 359-363 (1984).

99. Лела, доктор медицины, Т.Г. Grasel, J.A. Пирс, Л. Ламбрехт и С. Купер, "Влияние толщины стенки силиконовых трубок на образование тромба Ev-vivo в последовательном шунте", Trans.Являюсь. Soc. Артиф. Int. Органы, 30, 411-416 (1984).

100. Дин, Ю.С., Д.Дж. Яруссо, Х. Пан и С.Л. Купер, "Расширенная тонкая структура поглощения рентгеновских лучей: исследования иономеров сульфированного полистирола, нейтрализованного цинком", J. Appl. Phys., 56, 2396-2403 (1984).

101. Lin, Shaow B., S.Y. Цай, Т. Спекхард, К.К.С. Хван, Дж. Дж. Jerzerc и S.L. Купер, «Свойства полиуретанакрилатов, отвержденных под действием УФ-излучения: влияние типа полиола и молекулярной массы», Chem. Engr. Communications, 30, 251-273 (1984).

102. Валланс, M.A., J.L. Castles and S.L. Купер, "Микроструктура термопластичных полиуретановых эластомеров после полимеризации", Polymer, 25, 1734-1746 (1984).

103. Миллер, Дж. А. и С. Купер, "Исследование малоуглового рассеяния нейтронов олиго (окситетраметилен)", Die Macromol. Chemie, 185, 2429-2435 (1984).

104. Миллер, Дж. А., Шао Б. Линь, К. К.С. Хван, К. Ву, П. Гибсон и С. Купер, "Свойства модельных полиэфирполиуретановых блок-сополимеров: эффекты распределения жестких сегментов по длине", Macromolecules, 18, 32-44 (1985).

105. Линь, Шао Б., К.К.С. Хван, С.Ю. Цай и С. Купер, "Изучение сегментарной ориентации блок-сополимеров простого полиэфира и полиуретана с различной длиной и распределением твердых сегментов", Colloid and Polymer Sci., 263, 128-140 (1985).

106. Яруссо, Д.Дж. и С. Купер, "Анализ данных МУРР из иономерных систем", Polymer, 26, 371-378 (1985).

107. Пан, Х.К., А. Мигер, Г.С. Кнапп, С.Л. Купер, "EXAFS-исследования нейтрализованного нафиона Fe + 3: интерпретация второго пика в радиальной структурной функции", J.Chem. Phys., 82, 1529-1538 (1985).

108. Speckhard, T.A., S.L. Купер, V.S.C. Чанг и Дж. П. Кеннеди, "Свойства полиизобутилен-полиуретановых блочных полимеров. II. Макрогликоли, полученные по технологии Inifer", Polymer, 26, 55-69 (1985).

109. Спекхард, Т.А., К.К.С. Хван, С.Л. Купер, V.S.C. Чанг и Дж. П. Кеннеди, "Свойства полиизобутилен-полиуретановых блок-сополимеров: III. Жесткие сегменты на основе 4,4'-дициклогексилметандиизоцианата (h22MDI) и бутандиола", Polymer, 26, 70-78 (1985).

110. Yu, X., M.R. Nagarajan, T.G. Grasel, P.E. Гибсон и С. Купер, «Поли (диметилсилоксан) -полиуретановые эластомеры: синтез и свойства сегментированных сополимеров и родственных цвиттериономеров», J. Polymer Sci., Polym. Phys. Ed., 23, 2319-2338 (1985).

111. Спекхард Т.А., К.К.С. Хван, С. Лин, С.Ю. Цай, М. Кошиба, Ю.С. Дин и С.Л. Купер, "Свойства полиуретановых акрилатов, отвержденных под действием УФ-излучения: влияние реактивного разбавителя", J. Appl. Polymer Sci., 30, 647-666 (1985).

112. Лела, доктор медицины, Дж. А. Пирс и С. Купер, «Измерение контактных углов на поверхности круглых трубок с использованием метода захваченного пузыря», J. Biomed. Матер. Res., 19, 1011-1015 (1985).

113. Лела, доктор медицины, J.A. Пирс, Л. Ламбрехт и С. Купер, «Иономеры простого полиэфира и уретана: свойства поверхности / взаимосвязь совместимости с кровью Ex-vivo», J. Colloid and Interface Sci., 104, 422-439 (1985).

114. Каслс, Дж. Л., М. А. Валланс, С.Л. Купер, "Термические и механические свойства блок-сополиэфиров с коротким сегментом и сложных сополиэфиров и сложных эфиров", J. Polymer Sci., Polymer Phys. Ed., 23, 2119-2147 (1985).

115. Yu, X., M.R. Nagarajan, C. Li, T.A. Спекхард и С. Купер, "Свойства отвержденных ультрафиолетом поли (диметилсилоксан) акрилатов мочевины", J. Appl. Polymer Sci., 30, 2115-2135 (1985).

116. Миллер, Дж. А. и С. Купер, "Исследование влияния подготовки образца на малоугловое рассеяние рентгеновских лучей от полиуретанового блочного полимера", J.Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 23, 1065-1077 (1985).

117. Lelah, M.D., S.L. Купер, Х. Охнума и Т. Котака, "Ex-vivo и in-vitro реакция крови на триблочные полимеры поли (стирол-бутадиен-b4-винилпиридин) с модифицированной поверхностью", Polymer J., 17, 841-854 (1985) .

118. Миллер, Дж. А., Дж. М. Маккенна, Г. Прукмайр, Дж. Э. Эпперсон и С.Л. Купер, "Конформация цепей в блок-сополимерах полиэфира и полиэфира со средним и высоким содержанием сложного эфира: исследование малоуглового рассеяния нейтронов", Macromolecules, 18, 1727-1736 (1985).

119. Miller, J.A., G. Pruckmayr, J.E. Epperson and S.L. Купер, "Температурный отклик конформации цепи полиэфирного мягкого сегмента в полиуретановом блок-сополимере, измеренный с помощью малоуглового рассеяния нейтронов", Polymer, 26, 1915-1920 (1985).

120. Park, K. and S.L. Купер, "Важность состава исходного белкового слоя и распространения тромбоцитов при остром поверхностно-индуцированном тромбозе", Trans. Амер. Soc. Артиф. Интер. Органы, 31, 483-488 (1985).

121.Лела, доктор медицины, Т. Grasel, J.A. Пирс и С. Купер, "Ex-vivo взаимодействия и отношения свойств поверхности полиэфируретанов", J. Biomed. Матер. Res., 20, 433-468 (1986).

122. Lambrecht, L.K., B.R. Янг, Р. Стаффорд, Р. Альбрехт, Д.Ф. Мошер и С. Купер, «Влияние предварительно всасываемых белков плазмы крови собак и человека на тромбоз, индуцированный искусственной поверхностью in-vivo», Thrombosis Res., 41, 99-117 (1986).

123. Парк, К., Д.Ф. Мошер и С.Купер, «Острый поверхностно-индуцированный тромбоз в модели Ex vivo у собак: важность белкового состава исходного монослоя и активации тромбоцитов», J. Biomed. Матер. Res., 20, 589-612 (1986).

124. Гибсон П.Э., Дж. У. К. Ван Богарт и С. Купер, "Исследования методом малоуглового рассеяния рентгеновских лучей термически индуцированных морфологических изменений в сегментированных полиуретановых эластомерах", J. Polymer Sci., Polymer Phys. Ed., 24, 885-907 (1986).

125. Парк, К., Р.М. Альбрехт, С.Р. Симмонс, С.Л. Купер, «Новый подход к изучению адсорбированного белка на биоматериалах: окрашивание иммуноголдом», J. Colloid and Interf. Sci., 111, 197-211 (1986).

126. Спекхард, Т.А. и С. Купер, «Предельные свойства при растяжении сегментированных полиуретановых эластомеров: факторы, приводящие к ухудшению свойств полиуретанов на основе неполярных мягких сегментов», Rubber Chem. and Technol., 59, 405-431 (1986).

127. Yu, Xuehai, M.R. Nagarajan, C. Li, P.E. Гибсон и С.Л. Купер, «Поли (хлорпропилметил-диметилсилоксан) -полиуретановые эластомеры: синтез и свойства сегментированных сополимеров и родственных цвиттериономеров», J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 24, 2681-2702 (1986).

128. Pitt, W.G., K. Park, S.L. Купер, «Последовательная адсорбция белка и отложение тромба на полимерных биоматериалах», J. Colloid and Interface Sci., 111, 343-362 (1986).

129. Спекхард, Т.А., Дж. А. Миллер и С. Купер, "Исследование полимеризации полиуретановых блочных полимеров методом Монте-Карло".I. Идеальные условия полимеризации, Macromolecules, 19, 1558-1567 (1986).

130. Миллер, Дж. А., Т. А. Спекхард и С. Купер, "Исследование методом Монте-Карло моделирования полимеризации полиуретановых блочных полимеров. II. Неидеальные условия полимеризации", Macromolecules, 19, 1568-1574 (1986).

131. Wilson, R.S., A. Marmur and S.L. Купер, «Модель отложения и эмболизации белков и тромбоцитов на поверхности биоматериалов», Annals of Biomed. Engr., 14, 383-400 (1986).

132. Goodman, S.L., S.L. Купер и Р. Альбрехт, "Активация тромбоцитов у людей, собак и макак на поверхности полимеров", Progress in Argans-1985, Y. Nose, C. Kjeustrand и P. Иванович, редакторы, ISAO Press, Кливленд, стр. 1050-1055, 1986.

133. Park, K., S.J. Гернт и С. Купер, «Влияние остатков фибриногена сиаловой кислоты на отложение тромбоцитов ex-vivo на биоматериалы», Thrombosis Res., 43, 293-302 (1986).

134. Ли, Д.К., Т.А. Спекхард и С. Купер, "Метод определения молекулярной массы и свойств раствора полиуретановых блочных полимеров", Macromolecules, 19, 2383-2390 (1986).

135. Grasel, T.G. и С. Купер, «Свойства поверхности и совместимость полиуретановых мочевин с кровью», «Биоматериалы», 7, 315-328 (1986).

136. Pitt, W.G. and S.L. Купер, "Исследования FTIR / ATR влияния скорости сдвига на адсорбцию альбумина на биомер", Biomaterials, 7, 340-348 (1986).

137. Grasel, T.G., R.S. Уилсон, доктор медицины Лела, Х.В. Белич, С. Купер, "Кровоток и поверхностно-индуцированный тромбоз", Пер. Являюсь. Soc. Артиф. Внутренние органы, 32, 515 (1986).

138. Andrade, J.D., S. Nagaoka, S.L. Купер, Т. Окано и С.В. Ким, "Совместимость поверхностей и крови: современные гипотезы", Пер. Амер. Soc. Артиф. Int. Органы, 33, 75-84 (1987).

139. Миллер, Дж. А., Т. А. Спекхард и С. Купер, "Исследование методом Монте-Карло моделирования полимеризации полиуретановых блок-сополимеров".III. Условия неидеальной полимеризации: моделирование преждевременного фазового разделения во время реакции и различной реакционной способности удлинителя цепи и полиола с использованием модели простой погружающейся ванны, «Полимер, 28, 758-767 (1987).

140. Speckhard, T.A., J.G. Хоман, Дж. Миллер и С. Купер, "Исследование методом Монте-Карло моделирования полимеризации полиуретановых блок-сополимеров. IV. Моделирование экспериментальных данных", Polymer, 28, 768-776 (1987).

141. Grasel, T.G., J.A. Пирс и С. Купер, «Влияние прививки алкила на свойства поверхности и совместимость полиуретановых блок-полимеров с кровью», J. Biomed. Матер. Res., 21, 815-842 (1987).

142. Li, C., R.M. Нагараджан, К. Чанг и С.Л. Купер, "Синтез и характеристика отверждаемых излучением полиуретанов, содержащих боковые акрилатные группы", Polym. Engr. Sci., 26, 1442-1450 (1987).

143. Pitt, W.G., B.R. Янг и С. Купер, "Измерение углов смачивания продвигающегося и отходящего контакта внутри полимерных трубок", Коллоиды и поверхности, 27, 345-355 (1987).

144. Collins, W.E., D.F. Мошер, А. Диван, К. Мурти, С. Симмонс, Р. Альбрехт и С. Купер, "Отложение тромбоцитов Ex-vivo на предварительно абсорбированных поверхностях фибронектина", Сканирующая микроскопия, 1987, 1, 1669-1676 (1987).

145. К.Д. Мурти, Диван, A.R., W.E. Коллинз, С. Симмонс, Р. Альбрехт и С. Купер, «Использование метки иммунным золотом для сравнения адсорбционного поведения фибриногена, фибронектина и альбумина на полимерах», Сканирующая микроскопия, 1, 765-773 (1987).

146. Grasel, T.G., W.G. Pitt, K.D. Мурти, Т.Дж. Маккой и С. Купер, "Свойства экструдированных полиуретанов для приложений, контактирующих с кровью", Биоматериалы, 8, 329-340 (1987).

147. Pitt, W.G., S.H. Шпигельберг и С. Купер, "Адсорбция фибронектина на поверхности полиуретана: исследования инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье", "Белки на интерфейсах", Серия симпозиумов ACS, Vol. 343, стр. 324-338, T.A. Horbett and J.L. Brash, Eds., 1987.

.

148.Коллинз, W.E., D.F. Мошер, Б. Томазини и С. Купер, «Предварительное сравнение тромбогенной активности витронектина по сравнению с другими RGD-содержащими белками, связанными с поверхностью», Annals, N.Y. Acad. Sci., «Кровь при контакте с естественными и искусственными поверхностями», E.F. Leonard, V.T. Turitto and L. Vroman, Eds., 516, 291-299 (1987).

149. Янг, Б.Р., В.Г. Питт, С.Л. Купер, "Адсорбция белка на полимерных биоматериалах: II. Кинетика адсорбции", J. Colloid and Interf.Sci., 125, 246-260 (1988).

150. Дин, Ю.С., Р.А. Регистр, М.Р. Нагараджан, Х.К. Пан и С.Л. Купер, "EXAFS-анализ пластифицированных цинк-нейтрализованных сульфированных иономеров полистирола", J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 26, 289-300 (1988).

151. Стивенсон, Дж. К. и С. Л. Купер, "Множественное эндотермическое поведение при плавлении полиэфиров, содержащих поли (тетраметилен терефталат), и сложных блок-сополиэфиров", J. Polym. Sci., Polym. Physics Ed., 26, 953-966 (1988).

152. Ли, Чи, Т.А. Спекхард, X. Yu, S.L. Купер, «Синтез и свойства полицианоэтилметилсилоксановых полиуретановых эластомеров: исследование сегментарной совместимости», J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 26, 315-337 (1988).

153. Янг Б.Р., У.Г. Питт и С.Л. Купер, "Адсорбция белка на полимерных биоматериалах: I. Изотерма адсорбции", J. Colloid and Interf. Sci., 124, 28-43 (1988).

154. Мурти, К.Д., С.Р. Симмонс, Р.М. Альбрехт, С.Л. Купер, "Окрашивание фибриногена иммунным золотом на поверхности биоматериала: влияние условий маркировки", J. Colloid and Interface Science, 125, 176-189 (1988).

155. Pitt, W.G. and S.L. Купер, "Адсорбция альбумина на полиуретанах, дериватизированных с алкильной цепью: I. Эффект алкилирования C-18", J. Biomed. Матер. Res., 22, 359-382 (1988).

156. Grasel, T.G., D.C. Lee, A.T. Циммерман, Т. Словински и С. Купер, «Экстракция полиуретановых блочных полимеров: влияние на объем и свойства поверхности», «Биоматериалы», 9, 383-392 (1988).

157. Ли, округ Колумбия, Р.А. Зарегистрируйтесь, C.Z. Ян и С. Купер, "Иономеры полиуретана на основе МДИ. I. Новая модель малоуглового рассеяния рентгеновских лучей", Macromolecules, 21, 998-1004 (1988).

158. Ли, округ Колумбия, Р.А. Зарегистрируйтесь, C.Z. Ян и С. Купер, "Иономеры полиуретана на основе МДИ. II. Взаимосвязи между структурой и свойством", Macromolecules, 21, 1005-1008 (1988).

159. Pitt, W.G., T.G. Грасель и С. Купер, "Адсорбция альбумина на полиуретанах, дериватизированных с алкильной цепью: II.Влияние длины алкильной цепи, Biomaterials, 9, 36-46 (1988).

160. Стивенсон, Дж. К. и С. Л. Купер, "Изменения микроструктуры и свойств, сопровождающие кристаллизацию жесткого сегмента в эластомерах блочного сополиэфира и сложного эфира", Macromolecules, 21, 1309-1316 (1988).

161. Ding, Y.S., S.R. Хаббард, К. Ходгсен, Р.А. Регистр и С.Л. Купер, "Аномальное малоугловое рассеяние рентгеновских лучей на иономере сульфированного полистирола", Macromolecules, 21, 1698-1703 (1988).

162.Регистр, Р.А. и С. Купер, "Эффекты размывания при коллимации" точечных отверстий "с одномерным обнаружением", J. Appl. Кристаллография, 21, 550-557 (1988).

163. Регистр, Р.А., М. Фукар, Р. Джером, Ю.С. Дин и С.Л. Купер, "Отношения структура-свойство в эластомерных карбокси-телехелических иономерах полиизопрена", Macromolecules, 21, 1009-1015 (1988).

164. Li, C., S.L. Гудман, Р. Альбрехт и С. Купер, "Морфология сегментированных полибутадиеновых полиуретановых эластомеров", Macromolecules, 21, 2361-2375 (1988).

165. Pitt, W.G., D.J. Фабрициус, Б. Сингх, Д.Ф. Мошер и С. Купер, «Адсорбция витронектина на полистироле и окисленном полистироле», J. Colloid and Interf. Sci., 129, 231-239 (1989).

166. Филлипс Р.А., Стивенсон Дж. С., Нагараджан М. Купер, "Взаимосвязь структура-свойство и чувствительность к влаге уретановых эластомеров смешанных мягких сегментов PDMS / PTMO", J. Macromol. Sci.-Phys., B27, 245-274 (1988).

167. Grasel, T.G. и С.Л. Купер, "Свойства и биологическое взаимодействие полиуретановых аниономеров: эффект включения сульфоната", J. Biomed. Матер. Res., 23, 311-338 (1989).

168. Okkema, A.Z., D.J. Фабрициус, Т. Grasel, S.L. Купер и Р.Дж. Здрахала, "Объемные, поверхностные и контактирующие с кровью свойства полиэфирполиуретанов, модифицированных полидиметилсилоксановыми макрогликолами", "Биоматериалы", 10, 23-32 (1989).

169. Регистр, Р.А., А. Сен, Р.А. Вайс и С. Купер, "Влияние термической обработки на локальную структуру катионов в полистироле сульфированного марганца", Macromolecules, 22, 2224-2229 (1989).

170. Okkema, A.Z., T.G. Grasel, R.J. Здрахала, Д. Соломон и С. Купер, "Объемные, поверхностные и контактирующие с кровью свойства полиэфируретанов, модифицированных полиэтиленоксидом", J. Biomater. Sci., Polymer Ed., 1, 43-62 (1989).

171. McCoy, T.J., T.G. Грасель, А. Оккема и С. Купер, «Острые и хронические взаимодействия собак с кровью ex vivo с первичными эталонными материалами NHLBI-DTB», «Биоматериалы», 10, 243-250 (1989).

172. Дин Ю.С., Р.А. Зарегистрируйтесь, C.Z. Ян и С. Купер, "Синтез и характеристика сульфированных полиуретановых иономеров на основе TDI", Polymer, 30, 1204-1212 (1989).

173. Дин Ю.С., Р.А. Зарегистрируйтесь, C.Z. Ян и С. Купер, "Малоугловое рассеяние рентгеновских лучей на сульфированных иономерах полиуретана на основе TDI", Polymer, 30, 1213-1220 (1989).

174. Дин Ю.С., Р.А. Зарегистрируйтесь, C.Z. Ян и С. Купер, "Влияние локальной структуры катиона на физические свойства модельных иономеров полиуретана", Polymer, 30, 1221-1226 (1989).

175. Регистр, Р.А., А. Сен, Р.А. Вайс и С. Купер, "Морфология и локальная структура катионов в смеси нейтрализованного медью карбоксиполибутадиена и поли (стирол-Со-4-винилпиридин)", J. Polym. Sci., Polym. Phys. Изд. 27, 1911-1925 (1989).

176. Goodman, S.L., T.G. Grasel, S.L. Купер и Р. Альбрехт, "Изменение формы тромбоцитов и реорганизация цитоскелета на полиуретанмочевинах", J. Biomed. Матер. Res., 23, 105-123 (1989).

177. Ли К., Р.А. Регистр и С.Л. Купер, "Прямое наблюдение ионных агрегатов в сульфированных иономерах полистирола", Polymer, 30, 1227-1233 (1989).

178. Регистр Р.А., Х-Н. Ю. и С.Л. Купер, «Влияние полярности матрицы и старения окружающей среды на морфологию сульфированных полиуретановых иономеров», Polymer Bulletin, 22, 565-571 (1989).

179. Goodman, S.L., S.L. Купер и Р. Альбрехт, "Полиуретановые поддерживающие пленки: структура и клеточная адгезия", Scanning Microsc., Suppl., 3, 285-295 (1989).

180. Ю., X., А.З. Оккема и С. Купер, "Синтез и физические свойства поли (перфторалкилэфира) уретанов", J. Appl. Polym. Sci., 41, 1777-1795 (1990).

181. Grasel, T.G., D. Castner, B.D. Ратнер и С. Купер, «Характеристика полиуретанов с привитыми алкилами с помощью фотоэлектронной спектроскопии с переменным углом наклона», J. Biomed. Матер. Res., 24, 605-620 (1990).

182. McCoy, T.J., H.D. Ваберс и С. Купер, "Оценка полиуретановых сосудистых трансплантатов у собак с хроническим шунтированием A-V", J.Biomed Mater. Res., 24, 107-129 (1990).

183. Li, C. and S.L. Купер, "Прямое наблюдение морфологии полиэфир уретанов с помощью высоковольтной электронной микроскопии", Polymer, 31, 3-7 (1990).

184. Регистр Р.А. и С. Купер, "Аномальное малоугловое рассеяние от нейтрализованных никелем иономеров: 1. Аморфные полимерные матрицы", Macromolecules, 23, 310-317 (1990).

185. Регистр Р.А. и С. Купер, "Аномальное малоугловое рассеяние на нейтрализованных никелем иономерах: 2.Полукристаллические полимерные матрицы, Macromolecules, 23, 318-323 (1990).

186. Томпсон П.А., X. Ю и С.Л. Купер, "Взаимосвязь структуры и свойства полиуретановых иономеров с архитектурой звездообразной цепи", J. Appl. Polym. Sci., 41, 1831-1841 (1990).

187. Goodman, S.G., S.R. Симмонс, С. Купер и Р. Альбрехт, "Предпочтительная адсорбция белков плазмы на аполярные микродомены полиуретана", J. Colloid. Интерф. Sci., 139, 561-570 (1990).

188. Register, R.A., S.L. Купер, П. Тиягараджан, С. Чакрапани и Р. Джером, "Влияние ионной агрегации на размеры иономерной цепи: I. Телехелические полистиролы", Macromolecules, 23, 2978-2983 (1990).

189. Register, R.A., G. Pruckmayr and S.L. Купер, "Влияние ионной агрегации на размеры иономерной цепи: II. Сульфированные иономеры полиуретана", Macromolecules, 23, 3023-3026 (1990).

190. Giroux, T.A. и С. Купер, "Исследования FTIR / ATR адсорбции человеческого фибронектина на плазменном дериватизированном полистироле", J.Коллоид и Интерф. Sci., 139 (2), 351-362 (1990).

191. Okkema, A.Z., X-H. Ю. и С.Л. Купер, "Физические характеристики и характеристики контакта с кровью биомера с привитым пропилсульфонатом", Биоматериалы, 12, 3-12 (1991).

192. Янг, Ч.З., Ч. Ли, Ю.С. Дин и С.Л. Купер, «Синтез и характеристика полидиметилсилоксановых полимочевин-уретанов и родственных цвиттериономеров», J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 29, 75-86 (1991).

193. Такахара, А., А.З. Оккема, А.Дж. Кури и С. Купер, «Влияние поверхностной гидрофильности на реакционную способность тромбоцитов сегментированных полиуретанов», «Биоматериалы», 12, 324-334 (1991).

194. Takahara, A., A.Z. Оккема, Х. Ваберс и С.Л. Купер, "Влияние гидрофильных боковых цепей мягких сегментов на свойства поверхности и совместимость с кровью сегментированных поли (уретанмочевины)", J. Biomed. Матер. Res., 25, 1095-1118 (1991).

195. Takahara, A., R.W. Hergenrother, A.J. Кури и С. Купер, "Влияние химии мягких сегментов на биостойкость сегментированных полиуретанов".I. Окисление in vitro, J. Biomed. Mater. Res., 25, 341-356 (1991).

196. Homan, J.G., X.-H. Yu, J.J. Коннор и С. Купер, "Отверждаемые УФ-излучением полиуретан-акрилатные взаимопроникающие сети на основе касторового масла", J. Appl. Polym. Sci., 43, 2249-2257 (1991).

197. Янг, Ц.З., Т.Г. Grasel, J.L. Bell, R.A. Регистр и С.Л. Купер, "Карбоксилатсодержащие полиуретаны с удлиненной цепью", J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 29, 581-588 (1991).

198. Fabrizius-Homan, D.Дж. И С.Л. Купер, «Конкурентная адсорбция витронектина с альбумином, фибриногеном и фибронектином на полимерных биоматериалах», J. Биомед. Матер. Res., 25, 953-971 (1991).

199. Fabrizius-Homan, D.J. и С. Купер, "Сравнение адсорбции трех адгезионных белков на поверхности биоматериала", J. Biomater. Sci., Polymer Ed., 3, 27-47 (1991).

200. Goodman, S.L., S.L. Купер и Р. М. Альбрехт, «Влияние альбумина, адсорбированного субстратом, на распространение тромбоцитов», J.Биоматер. Sci., Polymer Ed., 2, 147-159 (1991).

201. Okkema, A.Z. и С. Купер, «Влияние включения карбоксилатных и / или сульфонатных ионов на физические свойства и свойства контакта с кровью полиэфируретана», «Биоматериалы», 12, 668-676 (1991).

202. Giroux, T.A. и С. Купер, "Характеристика поверхности плазменных дериватизированных полиуретанов", J. Appl. Polym. Sci., 43, 145-155 (1991).

203. Жиру Т.А. и С. Купер, "Исследование FTIR адсорбции фибронектина и фибриногена полиуретанами, дериватизированными плазмой", J.Коллоид Интерф. Sci., 146, 179–194 (1991).

204. Visser, S.A. and S.L. Купер, «Сравнение физических свойств карбоксилированных и сульфированных модельных иономеров полиуретана», Macromolecules, 24, 2576-2583 (1991).

205. Visser, S.A. and S.L. Купер, "Анализ данных малоуглового рассеяния рентгеновских лучей для модельных полиуретановых иономеров: оценка моделей твердых сфер", Macromolecules, 24, 2584-2593 (1991).

206. Оккема, А.З., С.А. Виссер, С.Л. Купер, «Физические свойства и свойства контакта с кровью полиуретанов на основе удлинителя цепи диола, содержащего сульфоновую кислоту», J. Biomedical Mater. Res., 25, 1371-1395 (1991).

207. Visser, S.A., G. Pruckmayr and S.L. Купер, "Анализ модельных полиуретановых иономеров методом малоуглового рассеяния нейтронов", Macromolecules, 24, 6769-6775 (1991).

208. Yu, Xuehai, C. Song, C. Li, S.L. Купер, "Исследование термопластичных эластомеров полиэфир-полиимид. I. Синтез и свойства", J.Прил. Polym. Sci., 44, 409-417 (1992).

209. Lin, H.B., Z.-C. Чжао, К. Гарсиа-Эчеверрия, Д. Х. Рич и С.Л. Купер, "Синтез нового полиуретана, содержащего ковалентно связанный RGD пептид", J. Biomatls. Sci., Polym. Ed., 3, 217-227 (1992).

210. Hergenrother, R.W. and S.L. Купер, «Влияние удлинителя цепи и стабилизаторов на стабильность полиуретанов in vivo», J. Appl. Биоматериалы, 3, 17-22 (1992).

211. Окамото, Д.Т., Т.У. Рут и С.Л. Купер, "Исследование системы поли (уретан-мочевина) методом ЯМР 13С", Macromolecules, 25, 1068-1073 (1992).

212. Wabers, H.D., T.J. Маккой, А. Okkema, R.W. Hergenrother, M.F. Вольф и С. Купер, "Биостойкость и свойства контакта с кровью полиуретана и биомера с привитым сульфонатом", J. Biomater. Sci., Polymer Ed., 4,107-133 (1992).

213. Takahara, A., R.W. Hergenrother, A.J. Кури и С. Купер, "Влияние химии мягких сегментов на биостойкость сегментированных полиуретанов".II. Исследования гидролитического разложения и сорбции липидов in vitro, J. Biomed Mater. Sci., 26, 801-818 (1992).

214. Сильвер, J.A., A.Z. Оккема, А.П. Харт, С.Л. Купер, С. Шареф, Д. Лабарр и М. Йозефович, «Антикоагулянтные эффекты сульфонатсодержащих полиуретанов», «Биоматериалы», 13, 339-344 (1992).

215. Fabrizius-Homan, D.J. и С. Купер, "Биологическая активность адсорбированного витронектина", тромбоз и гемостаз, 68, 194-202 (1992).

216.Visser, S.A. и S.L. Купер, "Влияние типа нейтрализующего катиона на морфологию и свойства модельных иономеров полиуретана", Polymer, 33, 920-929 (1992).

217. Visser, S.A. and S.L. Купер, "EXAFS-анализ катионов локальной среды в модельных иономерах полиуретана", Polymer, 33, 930-937 (1992).

218. Visser, S.A. and S.L. Купер, "Морфология и свойства смешанных анионных иономеров", Polymer, 33, 3790-3796 (1992).

219. Visser, S.А. и С.Л. Купер, "Исследование деформации иономера с помощью двумерного малоуглового рентгеновского рассеяния и оценка моделей морфологии иономера", Macromolecules, 25, 2230-2236 (1992).

220. Visser, S.A. and S.L. Купер, "Исследование реакции модельных иономеров полиуретана на одноосную деформацию с помощью малоуглового рассеяния нейтронов", Polymer, 33, 4280-4287 (1992).

221. Visser, S.A. and S.L. Купер, "Исследование деформации иономера с помощью малоуглового рентгеновского рассеяния: эффект нейтрализующего катиона", Polymer, 33, 4705-4710 (1992).

222. Hergenrother, R.W. and S.L. Купер, «Улучшенные материалы для приложений, контактирующих с кровью: смеси сульфированных и несульфированных полиуретанов», J. Materials Sci., Matls. in Med., 3, 313-321 (1992).

223. Лин, Х. Б., К. Г.-Эчеверрия, Д. Х. Рич, С. Асакура, В. Сан, Д. Ф. Мошер и С. Купер, "Адгезия эндотелиальных клеток к полиуретанам, содержащим ковалентно присоединенные пептиды RGD", Biomaterials, 13, 905-914 (1992).

224. Окамото, Д.Т., С.Л. Купер и Т. Рут, "Контроль над усовершенствованием твердотельных ядерных реакторов по технологии Overhauser в полиуретановых блок-сополимерах", Macromolecules, 25, 3301-3303 (1992).

225. Wabers, H.D., R.W. Hergenrother, A.J. Кури и С. Купер, "Отложение тромба на полиуретанах, предназначенных для биомедицинских применений", J. Appl. Биоматериалы, 3, 167-176 (1992).

226. Ko, T.M., J. C. Lin, S.L. Купер, "Характеристики поверхности и исследования адгезии тромбоцитов плазмосульфированного полиэтилена", Biomaterials, 14, 657-664 (1993).

227. Ко, Т.М. и С. Купер, "Свойства поверхности и характеристики адгезии тромбоцитов акриловой кислоты и полиэтилена, обработанного аллиламиновой плазмой", J. Appl. Polym. Sci., 47, 1601-1619 (1993).

228. Goodman, S.L., S.L. Купер и Р. Альбрехт, «Интегриновые рецепторы и адгезия тромбоцитов к синтетическим поверхностям», J. Biomed. Матер. Res., 27, 683-695 (1993).

229. Yu, Xuehai, B.P. Грейди, Р. Райнер и С. Купер, "Механические и термические свойства отверждаемых УФ-излучением полиуретана и полимочевинных акрилатов", J.Прил. Polym. Наук, 49, 1943-1955 (1993).

230. Юй, Сюэхай, Б.П. Грейди, Р. Райнер и С. Купер, "Свойства иономеров полиаминовых кислот", J. Appl. Polym. Sci., 47, 1673–1683 (1993).

231. Окамото, Д.Т., Э.М. О'Коннелл, С.Л. Купер и Т. Рут, "Определение характеристик полиуретанов на основе МДИ с помощью ядерного магнитного резонанса твердого тела 13C", J. Polymer Science, Phys., 31, 1163-1177 (1993).

232. Ko, T.M., J.-C. Линь и С.Л. Купер, "Исследование характеристик поверхности и адгезии тромбоцитов плазмокарбоксилированного полиэтилена", J.Colloid & Interface Sci., 156, 207-217 (1993).

233. Hergenrother, R.W., H.D. Ваберс и С. Купер, "Влияние химии твердых сегментов и деформации на стабильность полиуретанов: стабильность in-vivo", Biomaterials, 14, 449-458 (1993).

234. Лин, Х. Б., К. Б. Льюис, Д. Л. Скампавиа, Б. Д. Ратнер и С. Л. Купер, "Поверхностные свойства полиуретановых блочных сополимеров с привитым RGD-пептидом: переменный угол взлета и исследования ESCA на холодной стадии", J. Biomaterials Sci., Polymer Ed., 4, 183-198 (1993).

235. Сильвер, J.H., K.B. Льюис, Б. Ратнер и С. Купер, «Влияние типа полиола на структуру поверхности сульфонатсодержащих полиуретанов», J. Biomed. Матер. Res., 27, 735-745 (1993).

236. Ахуджа, A.A., R.W. Hergenrother, C.M. Стротер, А.А. Рапп, С. Купер и В. Graves, "Покрытия платиновой спирали для увеличения тромбогенности - предварительное исследование на кроликах", Amer. J. of Neuroradiology, 14, 794-798 (1993).

237.Питт, W.G., D.R. Уивер и С. Купер, "Кинетика адсорбции фибронектина на блок-полимерах полиуретан-мочевина", J. Biomater. Sci., Polymer Ed., 4, 337-346 (1993).

238. Сильвер, J.H., J.W. Маршан и С. Купер, «Влияние типа полиола на физические свойства и тромбогенность сульфонатсодержащих полиуретанов», J. Biomed. Матер. Res., 27, 1443-1457 (1993).

239. Lim, F., X-H. Ю. и С.Л. Купер, «Влияние прививки эфира олигоэтиленоксида моноаллил (арил) спирта на свойства поверхности и совместимость полиуретанов с кровью», Biomaterials, 14, 537-545 (1993).

240. Сильвер, J.H., H.B. Линь и С.Л. Купер, «Влияние адсорбции белка на реакцию сульфированных полиуретанов при контакте с кровью», «Биоматериалы», 14, 834-844 (1993).

241. Грейди Б.П., Х. Мацуока, Н. Исэ, Ю. Накатани и С.Л. Купер, "Влияние метода подготовки образцов на сверхмалоугловое рассеяние рентгеновских лучей слабосульфированных полистиролов", Macromolecules, 26, 4064-4066 (1993).

242. Маруччи, Г., С. Бхаргава и С. Л.Купер, "Модели поведения утолщения в физически сшитых сетях", Macromolecules, 26, 6483-6488 (1993).

243. Hergenrother, R.W., X.-H. Ю. и С.Л. Купер, "Свойства контакта с кровью полидиметилсилоксана полимочевины-уретанов", Биоматериалы, 15, 635-640 (1994).

244. Янг, Ч.З., Х. Чжан, Э.М. О'Коннелл, Р.Дж. Годдард и С. Купер, «Смеси ацетатов металлов и полиуретанов, содержащие пиридиновые группы», J. Appl. Polym. Sci., 51, 365-374 (1994).

245. Lin, H.B., R.W. Hergenrother, J.H. Сильвер, J.C. Lin, F. Lim, T.W. Бродхаген и С. Купер, "Ex-vivo совместимость силиконсодержащих биоматериалов с кровью", J. of Materials Science: Materials in Medicine, 5, 207-213 (1994).

246. Lin, H.B., W. Sun, D.F. Мошер, К. Эчеверриа, К. Шауфельбергер, П.И. Лелкес и С. Купер, «Синтез и свойства клеточной адгезии полиуретанов, содержащих ковалентно привитые RGD-пептиды», J. Biomed. Матер. Res., 28, 329-342 (1994).

247. Филлипс, Р. А., Дж. М. Маккенна и С. Л. Купер, "Стеклование и поведение при плавлении многоблочных сополимеров полиэфира и сложного эфира с жесткими сегментами поли (тетраметиленизофталата)", J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 32, 791-802 (1994).

248. Клингенберг Д. Л. и С. Л. Купер, "Электростатика на грубых поверхностях раздела", J. Electrostatics, 35, 339-348 (1995).

249. Лим, Ф., С. З. Янг и С. Л. Купер, "Синтез, характеристика и совместимость с кровью полидиметилсилоксановых полимочевин-уретанов", Биоматериалы, 15, 408-416 (1994).

250. Майерс, К. В. и С. Л. Купер, "Анализ некоторых ошибок в вычислении функций ориентации полимеров на основе измерений инфракрасного дихроизма", Appl. Spectroscopy, 48, 72-78 (1994).

251. Лин, Дж. -К., Т. М. Ко и С. Л. Купер, "Сульфирование поверхности полиэтилена: характеристика поверхности и исследования адгезии тромбоцитов", J. Colloid and Interface Sci., 164, 99-106 (1994).

252. Lin, J. -C. и С. Л. Купер, "Плазменная модификация внутренней поверхности трубок из полиэтилена низкой плотности для биомедицинских приложений", J.Прил. Polym. Sci., Appl. Polym. Symp., 54, 157-166 (1994).

253. Годдард Р. Дж., Б. П. Грейди и С. Л. Купер, "Пик отжига при комнатной температуре в иономерах: ионные кристаллиты или водопоглощение?", Macromolecules, 27, 1710-1719 (1994).

254. Грейди, Б. П., Э. М. О'Коннелл, С. З. Янг и С. Л. Купер, «Смеси ацетатов металлов и полиуретанов, содержащие пиридиновые группы II. Исследования SAXS и EXAFS», J. Polymer Sci., Polymer Phys. Ed., 32, 2357-2366 (1994).

255. Сильвер, Дж. Х., К. В. Майерс, Ф. Лим и С. Л. Купер, "Влияние молекулярной массы полиола на физические свойства и гемосовместимость полиуретанов, содержащих макрогликоли полиэтиленоксида", Biomaterials, 15, 695-704 (1994).

256. Сильвер, Дж. Х., Р. В. Хергенротер, Ж.-К. Лин, Ф. Лим, Х.-Б. Лин, Т. Окада, М. К. Чоудри и С. Л. Купер, «Поверхностные и контактные с кровью свойства монослоев алкилсилоксана, нанесенных на силиконовый каучук», J. Biomed.Матер. Res., 29, 535-548 (1995).

257. Грэди, Б. П. и С. Л. Купер, "EXAFS-исследования внутренней совокупной структуры слабосульфированного полистирола I. Определение координационной среды относительно катиона", Macromolecules, 27, 6627-6634 (1994).

258. Грэди, Б. П. и С. Л. Купер "EXAFS-исследования внутренней агрегатной структуры слабосульфированного полистирола II. Эффект одноосной ориентации", Macromolecules, 27, 6635-6641 (1994).

259. Годдард. Р. Дж. И С. Л. Купер, «Полиуретановые катиономеры с боковыми триалкиламмониевыми группами: влияние содержания ионов, алкильной группы и нейтрализующего аниона», J. Polymer Sci., Polymer Phys. Ed., 32, 1557-1571 (1994).

260. Филлипс, Р. А. и С. Л. Купер, "Разделение фаз в кристаллизующихся многоблочных сополимерах полиэфира и сложного эфира с жесткими сегментами поли (тетраметиленизофталата)", Polymer, 35. 4146-4155 (1994).

261. Караянни, Э.и С. Л. Купер "Структура и термодинамика в ассоциированных модельных растворах иономеров", Ind. and Engr. Chem. Res. 33, 2492-2503 (1994).

262. О'Коннелл Э. М., Т. В. Рут и С. Л. Купер, "Морфологические исследования слабосульфированного полистирола с использованием 23Na ЯМР: 1. Влияние состава образца", Macromolecules, 27, 5803-5810 (1994).

263. Цучия, Т. А. Такахара, С. Л. Купер и А. Накамура, "Исследования опухолевой активности полиуретанов: истощение ингибирующего действия метаболического взаимодействия на поверхности полиалифатического уретана, но не на полиэфируретане", J.Биомед. Матер. Res., 29, 835-841 (1995).

264. Дикинсон, Р. Б. и С. Л. Купер, «Количественное измерение и математический анализ кинетики бактериальной адгезии, зависящей от сдвига, к поверхностям биоматериала», AIChE J., 41, 2160-2174 (1995).

265. Дикинсон, Р. Б., Дж. А. Нагель, Д. Макдевит, Т. Дж. Фостер, Р. А. Проктор и С. Л. Купер, «Количественное сравнение адгезии золотистого стафилококка, связанного с поверхностью, связанного с фибриногеном», Infect.Immun., 63, 3143-3150 (1995).

266. Lin, J.-C. и С. Л. Купер "Характеристика поверхности и исследование совместимости с кровью ex vivo трубок малого диаметра, модифицированных плазмой: влияние диоксида серы и гексаметилдисилоксановой плазмы", Biomaterials, 16, 1017-1023 (1995).

267. Vaudaux, PE, P. Francois, RA Proctor, D. McDevitt, TJ Foster, RM Albrecht, DP Lew, H. Wabers и SL Cooper, "Использование дефектных адгезионных мутантов Staphylococcus Aureus для определения роли специфических Белки плазмы в стимулировании бактериальной адгезии к артериовенозным шунтам собак ", Infection and Immunity, 63, 585-590 (1995).

268. Годдард Р. Дж. И С. Л. Купер, "Катиономеры полиуретана с боковыми группами триметиламмония I. Исследования температуры в инфракрасном диапазоне с преобразованием Фурье" Macromolecules, 28, 1390-1400 (1995).

269. Годдард Р. Дж. И С. Л. Купер, "Полиуретановые катиономеры с боковыми группами триметиламмония II. Исследование перехода микрофазного разделения" Macromolecules, 28, 1401-1406 (1995).

270. О'Коннелл, Э. М., Т. В. Рут и С. Л. Купер, "Морфологические исследования слабосульфированного полистирола с использованием 23Na ЯМР: 2.Эффекты подготовки образца », Macromolecules, 28, 3995-3999 (1995).

271. O'Connell, E. М., Т. У. Рут и С. Л. Купер "Морфологические исследования слабосульфированного полистирола с использованием 23Na ЯМР: 3. Эффекты увлажнения и отжига", Macromolecules, 28, 4000-4006 (1995).

272. Караянни, Э., Р. Джером и С. Л. Купер, "Исследование структуры и термодинамических взаимодействий ассоциированных растворов телехелических иономеров с помощью малоуглового рассеяния нейтронов: I.Полное рассеяние ", Macromolecules, 28, 6494-6507 (1995).

273. Филлипс Р. А. и С. Л. Купер, "Морфологические аспекты вторичной кристаллизации в многоблочных сополимерах полиэфира и сложного эфира", Macromolecules, 28, 5734-5744 (1995).

274. Лим Ф. и С. Л. Купер, "Влияние включения сульфонатов на адгезию лейкоцитов к полиуретанам in vitro", Biomaterials, 16, 457-466 (1995).

275. Лин, Н.-Б., Ф. Лим и С. Л. Купер, "Полиуретаны, содержащие ковалентно привитые RGD-пептиды", Adv.Sci. Technol., 12, 385-392 (1995).

276. Сильвер, Дж. Х., Э. Караянни и С. Л. Купер, «Влияние гидрофильности полиола на структуру и антикоагулянтную активность водорастворимых сульфированных полиуретанов», J. Coll. и Интерф. Sci., 178, 219-232 (1996).

277. Lin, J.-C. и S. L. Cooper, "Адсорбция фибриногена in-vitro из различных разбавлений плазмы крови человека на полиэтилене, модифицированном плазмой RFGD", J. Colloid and Interf. Sci., 182, 315-325 (1996).

278. Лим Ф. и С. Л. Купер, "Хемилюминесцентные окислительные продукты, генерируемые взаимодействием лейкоцитов и материалов in vitro", J. Materials Science, Materials in Medicine, 7, 69-76 (1996).

279. О'Коннелл, Э. М., Д. Г. Пайффер, Т. В. Рут и С. Л. Купер, «Морфологические исследования слабосульфированного полистирола с использованием 23Na ЯМР: эффекты полидисперсности в молекулярной массе», Macromolecules, 29, 2124-2130 (1996).

280. О'Коннелл, Э. М. Ц-З Янг, Т.W. Root и S. L. Cooper, "Спектроскопические исследования пиридинсодержащих полиуретанов", Macromolecules, 29, 6002-6010 (1996).

281. Сундарам, С., Ф. Лим, С.Л. Купер и Р.В. Колман, "Роль лейкоцитов в коагуляции, вызванной искусственными поверхностями: исследование экспрессии Mac-1, высвобождения эластазы гранулоцитов и адгезии лейкоцитов на модифицированных полиуретанах", Биоматериалы , 17, 1041-1047 (1996).

282. Нагель, Дж. А., Р. Б. Дикинсон и С. Л. Купер, "С.aureus Адгезия к полиуретановым поверхностям в присутствии предварительно адсорбированного высокомолекулярного кининогена ", J. Biomaterials Science, Polymer Ed., 7, 769-780 (1996).

283. Нагель-Баумгартнер, Дж. И С. Л. Купер, «Бактериальная адгезия на полиуретановых поверхностях, обработанных тромбовидными компонентами», ASAIO J., 42 (5), M476-M479 (1996).

284. Веланкар, С., Дж. Пазос и С. Л. Купер, «Высокоэффективные УФ-отверждаемые уретановые акрилаты посредством химического удаления изоцианатов», J.Прил. Polymer Sci., 62, 1361-1376 (1996).

285. Филлипс Р. А. и С. Л. Купер, "Развитие морфологии во время твердофазного отжига многоблочных сополимеров полиэфира и сложного эфира", J. Polym. Sci., Polym. Phys. Ed., 34, 737-749 (1996).

286. Сундарум, С., Н. Гикакис, CE Hack, С. Невяровски, Л. Х. Эдмундс, младший, А. К. Рао, Л. Сан, С. Л. Купер и Р. В. Колман, «Нафамостат мезилат, ингибитор протеазы широкого спектра действия, модулирующий тромбоциты. , Нейтрофилы и контактная активация при моделировании экстракорпорального кровообращения, тромбоза и гемостаза, 75, 76-82 (1996)

287.Юнг, LY L., F. Lim, MMH Khan, SP Kunapuli, L. Rick, RW Colman и SL Cooper, "Адгезия нейтрофилов к поверхностям, предварительно абсорбированным киноногеном с высокой молекулярной массой, в условиях четко определенного потока, иммунофармакология, 32, 19- 23 (1996).

288. Карайанни, Э., Р. Джером и С. Л. Купер, "Исследования малоуглового нейтронного рассеяния растворов телехелических иономеров с низкой полярностью. II. Одноцепочечное рассеяние", Macromolecules, 30, 7444-7455 (1997).

289. Дикинсон, Р.Б., Дж. А. Нагель, Р. А. Проктор и С. Л. Купер, «Количественное сравнение зависящей от сдвига адгезии Staphylococcus Aureus к трем аналогам полиуретановых иономеров с различными поверхностными свойствами», J. Biomed. Матер. Res., 36, 152-162 (1997).

290. Номула С. и С. Л. Купер, "Структурные исследования растворов полиуретановых иономеров 1. Динамическое рассеяние света", Macromolecules, 30, 1355-1362 (1997).

291. Нагель-Баумгартнер, Дж. И С. Л. Купер, "Анализ физических свойств и бактериальная адгезия на ряде фосфонированных полиуретанов", Биоматериалы, 18, 831-837 (1997).

292. Хан, М. Х. М., С. П. Кунапули, Ю. Лин, А. Маджлуф-Круз, Р. А. ДеЛа Кадена, С. Л. Купер и Р. В. Колман, «Три несмежных пептида содержат участки связывания высокомолекулярного кининогена с нейтрофилами», Am. J. Physiol.: Heart and Circulatory Physiol., H245-h250 (1998).

293. Баумгартнер, Дж. Н. и С. Л. Купер, «Влияние компонентов тромба на адгезию золотистого стафилококка к полиуретановым поверхностям», J. Biomed. Матер. Res., 40, 660-670 (1998).

294. Юнг, Лин-Юэ и С. Л. Купер, «Адгезия нейтрофилов на фосфорилхолинсодержащих полиуретанах», Biomaterials, 19, 31-40 (1998).

Бхаргава С. и С. Л. Купер, «Влияние воды на вязкость и поведение телехелатных иономеров в неполярных растворителях», Macromolecules, 31, 508-514 (1998).
Веланкар С. и С. Л. Купер, "Микрофазовое разделение и реологические свойства полиуретанов. I. Влияние длины блока", Macromolecules, 31, 9181-9192 (1998).

297. Номула С. и С. Л. Купер, «Гидрофобная агрегация в растворах полиуретановых иономеров», J. Colloid and Interf Sci., 205, 331-339 (1998).

298. Флемминг Р. Г., Р. А. Проктор и С. Л. Купер, «Бактериальная адгезия к функционализированным полиуретанам», J. Biomaterials Sci., Polymer Ed., 10, 679-697 (1999).

Чен, С. З., Н. С. Бек Тан и С. Л. Купер, «Включение функциональных возможностей хлорида диметилдодециламмония в дендримеры поли (пропиленимин) значительно усиливает их антибактериальные свойства», Chemical Comm., 16, 1585-1586 (1999).
Сильвер, J.H., J.-C. Лин, Ф. Лим, В.А. Тегулия, М.К. Чаудхури и С.Л. Купер, «Свойства поверхности и гемосовместимость монослоев алкилсилоксана, нанесенных на силиконовый каучук: влияние длины алкильной цепи и ионной функциональности», Biomaterials, 20, 1533-1543 (1999) .

301. Юнг, Лин-Юэ Л., Ф. Лим, ММХ Хан, С.П. Кунаполи, Л. Рик, Р.У. Колман и С.Л. Купер, «Кининоген с высокой молекулярной массой, предварительно абсорбированный на поверхности стекла, заметно снижает адгезию нейтрофилов», Биоматериалы, 21, 405-414 (2000).

302. Веланкар, С. и С. Л. Купер, «Микрофазовое разделение и реологические свойства полиуретанов. II. Влияние несовместимости блоков на микроструктуру », Macromolecules, 33, 382-394 (2000).

303. Веланкар С. и С. Л. Купер, «Микрофазовое разделение и реологические свойства полиуретанов. III. Эффект несовместимости сегментов », Macromolecules, 33, 395-403 (2000).

304. Тегулия, В. А. и С. Л. Купер, "Адгезия лейкоцитов на модельных поверхностях в потоке: влияние химии поверхности, адсорбции белков и скорости сдвига", J.Биомед. Mater .. Res., 50, 291-301 (2000).

305. Флемминг, Р. Г., К. К. Капелли, Р. А. Проктор и С. Л. Купер, "Бактериальная колонизация функционализированных полиуретанов", Биоматериалы, 21, 273-283 (2000).

306. Номула, С. и С. Л. Купер, «Влияние содержания ионов на растворы полиуретановых иономеров, J. Phys. Chem. В, 104, 6963-6975 (2000).

307. Караянни, Э., Р. Джером и С. Л. Купер, "Малоугловое рассеяние нейтронов в растворах телехелатных иономеров с низкой полярностью.III. Влияние температуры », Macromolecules, 33, 6473-6484 (2000).

308. Грапски, Дж. А. и С. Л. Купер, «Синтез и характеристика невыщелачивающихся биоцидных полиуретанов», Biomaterials, 22, 2239-2246 (2001).

Номула, С. и С. Л. Купер, «Структура раствора иономера и диаграмма решения», Macromolecules, 34, 2653-2659 (2001).
Чен, Ч.З., Н.С. Бек Тан, П. Дурджати, Т. К. ван Дайк, Р. А. ЛаРосса и С. Л. Купер, «Поли) пропиленимин) дендримеры, функционализированные четвертичным аммонием, как эффективные противомикробные средства.I. Исследования структуры и активности ”, Biomacromolecules, 1, 473-480 (2000).
Тегулиа, В.А., В. Рао, А. Каламбур, Дж. Ф. Рабольт и С. Л. Купер, «Свойства поверхности, адсорбция фибриногена и клеточные взаимодействия нового фосфорилхолин-содержащего самоорганизующегося монослоя на золоте», Langmuir, 17, 4396-4404 (2001) ).

312. Номула, С. и С. Л. Купер, «Структурные исследования растворов иономеров II. Флуоресценция », Macromolecules, 33, 6402-6406 (2000).

313. Номула, С.и С. Л. Купер «Эффект полярности растворителя в растворах иономеров, макромолекулы», 34, 925-930 (2001).

314 Ма, С. X. и С. Л. Купер, «Утолщение при сдвиге в водных растворах поли (этиленоксида) с концевыми блокированными углеводородами», Macromolecules, 34, 3294-3301 (2001).

Ма, С. X. и С. Л. Купер, «Эффект полидисперсности вязкоупругости и сдвигового утолщения в водных растворах поли (этиленоксида) с концевыми группами углеводородов», Macromolecules, 35, 2024 (2002).
Чен, С. З. и С. Л. Купер, «Взаимодействие между дендримерными биоцидами и бактериальными мембранами», Biomaterials, 23, 3359-3368 (2002).
Ма, С. X. и С. Л. Купер, «Влияние поверхностно-активного вещества на вязкоупругость и сгущение при сдвиге в водных растворах поли (этиленоксида) с концевыми углеводородными группами», J. Rheology, 46, 339-350 (2002).

318. Тегулиа, В. А. и С. Л. Купер, «Адгезия Staphylococcus aureus к самоорганизующимся монослоям: влияние химии поверхности и присутствия фибриногена», Коллоиды и поверхности B: Biointerfaces 24, 217-228 (2002).

319. Фасселл, Г. и С. Л. Купер, "Адгезия эндотелиальных клеток на RGD-содержащих терполимерах метакрилата", J. Biomed. Матер. Res., 70A, 265-273 (2004).

320 Fussell, B. и S. L. Cooper, «Синтез и характеристика акриловых терполимеров с пептидами RGD для биомедицинских применений», Biomaterials, 25, 2971-2978 (2004).

321. Велева, А. Н., С. А. Хан и С. Л. Купер "Окислительная и гидролитическая стабильность нового акрилового терполимера для биомедицинских применений", J.Biomed Mater. Res., 74A, 117-123 (2005).

322. Велева, А. Н., С. Л. Купер и С. Паттерсон, "Отбор и начальная характеристика новых пептидных лигандов, которые специфически связываются с эндотелиальными клетками отростка крови человека", Биотехнология и биоинженерия, 98, 306-312 (2007).

323. Велева, А. Н., Д. Э. Хит, С. Паттерсон и С. Л. Купер, «Селективное прикрепление эндотелиальных клеток к модифицированным пептидом терполимерам», Биоматериалы, 29, 3656-3661 (2008).

324.Велева, А. Н., Д. Е. Хит, К. Паттерсон, Дж. Дж. Ланнатти и С. Л. Купер, «Взаимодействие между эндотелиальными клетками и электропрядеными метакриловыми терполимерными волокнами для инженерных замен сосудов», J. Biomed. Матер. Res., 91A, 1131-1139 (2009).

325. Хит, Д. Е. и С. Л. Купер, "Взаимодействие эндотелиальных клеток с метакриловыми терполимерными биоматериалами", J. Biomed. Матер. Res., 92B, 289-297 (2009).

326. Хит, Д. Э., Дж. Дж. Ланнатти и С. Л. Купер, «Топография электроспрядного каркаса влияет на пролиферацию, метаболическую активность и морфологию эндотелиальных клеток», J.Биомед. Матер. Res., 94A, 1195-1204 (2010).

327. Хит, Д. Э. и С. Л. Купер, "Дизайн и характеристика ПЭГилированных терполимерных биоматериалов", J. Biomed. Матер. Res., 94A, 1294-1302 (2010).

328. Ван, X., Д. Е. Хит и С. Л. Купер, "Адгезия и пролиферация эндотелиальных клеток к ПЭГилированным полимерам с ковалентно связанными пептидами RGD", J. Biomed. Матер. Res., 100A, 794-801 (2012).

329. Ван, X. и С. Л. Купер, «Адгезия эндотелиальных клеток и эндотелиальных клеток-предшественников на пептидно-связанных полимерах при сдвиговом потоке», Tissue Engineering, Part A, 19 (9-10), 1113-1121 (2013).

330 Хит, Д. Э. и С. Л. Купер, «Дизайн и характеристика сульфобетаинсодержащих терполимерных биоматериалов», Acta Biomaterialia, 8, 2899-2910 (2012).

331. Хит, Д.Е., К. Кобе, Д. Джонс, Н. Молдован и С.Л. Купер, "Эндотелиализация in vitro электроспрядных терполимерных каркасов: исследование типа каркасов и источника клеток", Tissue Engineering, 19, 79-90 (2013).

Изобретения, патенты и патентные заявки Джошуа М. Шендельмана

Номер патента: 10577666

Abstract: Предложены молекулярные маркеры, ассоциированные с репродуктивной стадией сои, способы их использования и композиции, содержащие один или несколько маркерных локусов.Способы включают обнаружение по меньшей мере одного маркерного локуса, обнаружение гаплотипа и / или обнаружение профиля маркера. Способы могут дополнительно включать скрещивание выбранного растения сои со вторым растением сои. Также предоставляются изолированные полинуклеотиды, праймеры, зонды, наборы, системы и т.д.

Тип: Грант

Зарегистрирован: 14 марта 2018 г.

Дата патента: 3 марта 2020 г.

Цессионарий: PIONEER HI-BRED INTERNATIONAL, INC.

Изобретателей: Кэтрин Энн Форт, Дэвид Л. Хайтен младший, Андреа Бет Калвиг, Кейт Эдвард Кинг, Лесли Чарльз Кульман, Дональд Кайл, Тай Ли, Джон М.Массман, Эдвин Дж. Мендес, Салли Энн Сантьяго-Партон, Джошуа Майкл Шендельман, Джордан Дастин Спир, Джон Брайан Вудворд, Янвен Сюн

.

Добавить комментарий

*
*

Необходимые поля отмечены*